人源诱导多潜能干细胞在心血管疾病研究中的应用与挑战

2017年的《中国心血管病报告》显示,中国心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)的患病率和病死率仍处在上升阶段,CVD死亡占居民死亡构成的40%以上,现患人数约2.9亿,心血管疾病的治疗仍面临严峻挑战,成为当今社会的重大公共卫生问题。心血管疾病所造成的心肌损伤表现出具有正常收缩功能的心肌细胞数量的相对或绝对减少,受损的心肌细胞通过纤维组织瘢痕修复,未受损的心肌细胞出现代偿性肥大.

基于网络药理学的有关苓桂术甘汤干预治疗心力衰竭的作用机制

目的:根据网络药理学方法寻找苓桂术甘汤治疗心血管疾病的潜在靶点。方法:从在线的中医药生物信息学分析网站(BATMAN-TCM)筛查和预见苓桂术甘汤干预心力衰竭的可能的有效成分及其作用于心力衰竭的靶点。使用Cytoscape软件建立苓桂术甘汤以及其中所含的单味药针对心力衰竭的靶点-成分网络图。采取韦恩图(Venny2.1)进一步研究苓桂术甘汤中茯苓及甘草治疗心力衰竭的机制。结果:我们从结果里发现苓桂术甘汤在治疗心力衰竭方面有79个活性成分,有18个靶点与心力衰竭是相关的,且检索到的靶点和有效成分有紧密的关系,找到的18个靶点主要是:ACE;ADRA2A;ADRA2B等。甘草在苓桂术甘汤中的靶点数最多,占全方治疗心力衰竭总靶点数的94.4%。结论:苓桂术甘汤改善心力衰竭的机制可能与降低AngⅡ、抑制RAS的活性、调节交感神经系统等具有相关性,其中甘草在治疗心力衰竭方面是苓桂术甘汤中最突出药物。

山奈酚和芒柄花黄素对H9c2细胞缺氧损伤的保护作用

目的探讨山奈酚和芒柄花黄素对缺氧损伤的H9c2心肌细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量和肌酸激西酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响。方法将H9c2细胞分为对照组、缺氧模型组、阳性药夹竹桃组、山奈酚组、芒柄花黄素组,采用CCK8法检测细胞活力,采用试剂盒检测上清液中CK、LDH活性和细胞内SOD活性,MDA含量。结果与正常组相比,模型组细胞活力显著降低(P<0.01);山奈酚、夹竹桃和芒柄花黄素能升高模型组细胞活力(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。与正常组相比,模型组CK、LDH释放量和MDA活性显著升高(P<0.01),SOD活性下降(P<0.05)。山奈酚组CK、LDH释放量均明显低于模型组(P<0.01),芒柄花黄素组CK、LDH释放量低于模型组(P<0.01,P<0.05)。山奈酚与芒柄花黄素均能显著降低模型组MDA活性(P<0.01),升高模型组SOD活性(P<0.05)。结论山奈酚和芒柄花黄素能通过降低CK、LDH活性和MDA含量,升高SOD活性对缺氧损伤心肌细胞发挥保护作用。

中医药基于氧化应激治疗心力衰竭的应用

心力衰竭(Heart Failure,HF)是各类心血管疾病的终末阶段,近年来随着高血压、冠心病等心血管疾病发病率的增加,最终发展为心力衰竭的人群也逐渐庞大。氧化应激(Oxidative Stress,OS)是指体内氧化与抗氧化作用失衡,导致中性粒细胞炎性浸润,蛋白酶分泌增加,产生大量氧化中间产物,对机体产生一种负面作用。大量研究证明,氧化应激在心力衰竭的发生发展过程中发挥了重要作用。通过探讨氧化应激反应在心力衰竭中的作用机制,为预防及治疗心力衰竭提供新的思路及研究方向。

基于网络药理学预测四妙勇安汤干预心力衰竭的作用机制研究

[目的]借助网络药理学技术预测并筛选四妙勇安汤干预心力衰竭的主要活性成分及其潜在靶点,探讨四妙勇安汤对心力衰竭的疾病-多靶点-多成分的干预作用机制。[方法]依据在线中医药生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)疾病分类预测和筛选四妙勇安汤活性成分的作用靶点。采用Cytoscape软件构建四妙勇安汤活性治疗心力衰竭的成分-靶点网络。[结果]在四妙勇安汤中筛选出89个活性成分,共涉及心力衰竭等15个靶点,且活性成分与预测的靶点有较好的相互作用,预测的15个靶点主要与ACE、ADRA2A、ADRA2B、等靶点有关。[结论]表明四妙勇安汤改善心功能的机制可能与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)抑制肾素血管紧张素系统(RAS)活性、调节交感神经系统等有关,并且在四妙勇安汤治疗心力衰竭中金银花药味的贡献度可能最大。

穿心莲内酯干预异丙肾诱导的心力衰竭小鼠的效应及其机制研究

[目的]评价穿心莲内酯干预过量异丙肾上腺素(ISO)致心力衰竭小鼠的药效,运用网络药理学的方法预测其作用靶点并验证。[方法]制备过量盐酸异丙肾上腺素诱导的心力衰竭小鼠模型,随机分为空白组、模型组、穿心莲内酯组、地高辛组。通过心脏超声、形态学与病理分析,评价各组小鼠心功能。采用生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)预测药物靶点,运用实时荧光定量PCR法检测候选靶点m RNA水平。[结果]与空白组比较,模型组小鼠射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)和舒张早期二尖瓣血流速度与舒张晚期二尖瓣血流速度比值(E/A)显著降低(P<0.05),左室收缩末内径(LVIDs)显著增大(P<0.05),心肌细胞肥大,伴有血窦扩张和结缔组织增生,心肌组织羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR,HMG-Co A还原酶)基因表达显著上调(P<0.05)。与模型组相比,穿心莲内酯组小鼠EF、FS和E/A显著升高(P<0.05),LVIDs显著降低(P<0.01),心肌细胞肥大减轻,心肌组织HMGCR基因表达显著下调(P<0.05)。[结论]穿心莲内酯可以改善过量异丙肾上腺素诱导的心力衰竭,其机制可能与抑制HMG-Co A还原酶、调节胆固醇合成有关。

芪参颗粒中獐牙菜苷对过量异丙肾上腺素致小鼠心力衰竭的保护作用

[目的]心力衰竭(简称心衰)是许多心血管疾病的终末阶段。芪参颗粒治疗心衰疗效确切,獐牙菜苷可能是其主要活性成分之一。本研究旨在评价獐牙菜苷对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心衰的保护作用,并初步探讨其作用靶点与机制。[方法]通过皮下注射过量ISO构建心衰小鼠模型,随机分为空白组、模型组、卡托普利组、獐牙菜苷组。超声心动评价心功能、苏木精-伊红(HE)染色法检测心肌病理变化、BATMAN-TCM数据库预测作用靶点,蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测靶点蛋白表达水平。[结果]与空白组相比,模型组小鼠射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)显著降低(P<0.01),左室收缩末内径(LVIDs)显著增大(P<0.01)。同模型组比,獐牙菜苷组小鼠EF值、FS值增加,LVIDs值降低(P<0.01)。组织病理学检查可见模型组小鼠心脏左心室壁变薄、心肌纤维变细,局部心肌纤维坏死,或伴炎细胞浸润等,獐牙菜苷组心肌细胞形态较为正常。BATMAN-TCM数据库提示,钠钾ATP酶α1亚基(ATP1A1)是獐牙菜苷治疗心衰的靶标。Westernblot结果显示,模型组ATP1A1蛋白表达下调,獐牙菜苷可增加ATP1A1蛋白含量。[结论]本研究通过基础药理学与网络药理学相结合的研究方法,证明了獐牙菜苷能显著改善ISO诱导的小鼠心衰,初步证明其机制可能与增加ATP1A1蛋白表达,改善心肌能量代谢有关。

中药干预化疗药物所致心脏毒性的文献分析

目的探讨中药防治化疗药物心脏毒性的一般规律。方法检索1988年1月—2017年10月收录于中国期刊全文数据库(CNKI)的中药干预化疗药引起心脏毒性的相关文献,按照制定的纳入和排除标准筛选文献,采用频数统计的方法,归纳中药干预化疗药物心脏毒性的一般规律。结果纳入文献279篇,包括中药126味,使用频次前10位为人参、黄芪、麦冬、丹参、甘草、五味子、附子、党参、三七、川芎;中药制剂剂型中注射剂和汤剂居多;常用中药组合为人参-麦冬、人参-麦冬-五味子、人参-黄芪、人参-附子、桂枝-甘草;根据中药的功效进行分类,功效频次前3位为补虚药(462次)、活血化瘀药(97次)、清热药(53次)。结论中药干预化疗药所致心脏毒性的治则以补虚为主,常用补虚、活血、清热、温里等药物。

基于“优势成分预测-潜在靶点筛选”的“2R网络药理学”的中药复方有效组分研究方法的构建

中药复方是中医临床用药的主要形式。中药复方有效组分的阐明是推进中医药现代化发展的关键科学问题之一。目前,中药复方有效组分的研究思路众多,通过剖析已有研究思路的现状和存在的问题,作者提出基于"优势成分预测-潜在靶点筛选"的"双减网络药理学"(简称"2R网络药理学")研究方法。"优势成分预测"是采用ADMET性质预测技术选择ADMET性质良好的化学成分,与入血成分、靶器官成分对比分析,确定具有潜在治疗作用的优势成分,即"减成分(reducing constituents)";"潜在靶点筛选"是通过转录组测序(RNA-seq)技术结合网络数据库富集中药复方的潜在核心调节通路,再基于信号通路挖掘中药复方的作用靶点,以减少中药复方有效组分作用靶点筛选研究的范围,即"减靶点(reducing targets)"。通过网络药理学方法的相关技术建立"成分-靶点"网络关系,提高有效组分筛选的效率和准确率。旨在为阐明中药复方有效组分、揭示复方配伍规律、明确药物作用靶点等方面提供具有实用性的研究思路和方法。

3种溃疡性结肠炎动物模型的对比

溃疡性结肠炎(UC)是一种病因不明的直肠和结肠炎性疾病,临床表现为反复发作的腹泻、腹痛及黏液脓血便,又称为非特异性溃疡性结肠炎。选择合适的动物模型有助于进行UC的机制及治疗研究。UC造模方法众多,但因为模型制备手段、发病机制、持续时间等各不相同,文章就常用的葡聚糖硫酸钠(DSS)模型、三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇模型及免疫复合TNBS-乙醇模型进行介绍对比,以期为动物模型的合适选择及继续完善提供新思路。

从炎性反应角度探讨清热解毒药的作用机制

清热解毒药主要用于治疗痈肿疮毒、咽喉肿痛、丹毒、痄腮、痢疾等热毒所致疾病。炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子的防御反应。近年来大量基础和临床研究表明清热解毒药对炎症反应具有较好的治疗作用。该研究通过检索近5年文献,对金银花、山银花、忍冬藤、连翘、黄连、栀子、穿心莲、蒲公英、玄参、白头翁、仙鹤草等11味中药的抗炎机制进行分析,发现清热解毒药主要是通过NF-κB,MAPK,JAK-STAT 3条信号通路发挥抗炎作用,且作用环节相似。并且,针对目前该领域存在的问题,提出了未来可能的发展方向,为今后清热解毒药的基础研究和临床应用提供可靠的理论依据。

“瘀毒”致心力衰竭心肌纤维化理论依据初探

心肌纤维化是多种心血管疾病发展至一定阶段的共同病理改变,符合血瘀证的微观诊断。文章从中西医角度分析"瘀毒"病机特点,依据"心血管事件链"规律,结合"瘀毒"与心力衰竭基础病的关系,探讨其与心力衰竭心肌纤维化的密切关系。慢性心血管疾病日久不愈、诸邪久积不解、蕴毒骤发,"瘀毒互结,损伤血络",引起心脏结构和功能改变是心力衰竭心肌纤维化的病理基础;"瘀毒既成,百证丛化,正气亏虚,变生诸病"是其突发骤变、错综复杂、缠绵难愈的关键环节。心肌纤维化以瘀毒为害,初期虽未彰显,有可寻察之外证时往往病属晚期,因其持续进展过程和不良结局,未病先防,治疗关口前移显得尤为重要。因此,活血解毒应成为贯穿心肌纤维化治疗过程的重要方法之一。

血小板活化机制及调节血小板中药的研究进展

血小板生理病理性变化是造成心血管疾病主要因素之一,抗血小板的相关研究已经成为当前研究心血管疾病的热点。在血小板活化、聚集等过程中,与血栓和炎症反应息息相关,而且其调控机制复杂、药物的作用靶点繁多。临床上,中药的抗血小板作用显著,以及近年中药干预血小板活化与聚集的基础研究也取得了一定成果。文章中主要整理了血小板活化、聚集时常见的调控机制和传统的中药在以血小板为靶点时治疗心血管疾病的研究成果,其中主要为MAPK、PI3K、SFK等机制调控,调节血小板中药以川芎、人参、丹参等研究居多。

溃疡性结肠炎模型大鼠脾虚湿蕴证辨识方法研究

目的从疾病和证候2个维度建立溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠脾虚湿蕴证辨识方法,为中药药效评价及证候基础研究提供适宜动物模型。方法将40只SD大鼠随机分为4周及8周的对照组与模型组,每组10只。采用免疫复合法造模,多时间点采集比较大鼠的宏观表征、抓力、毛发、旷场实验等方面数据,并分别于造模后28、56 d取材,HE染色分析结肠病理变化。将溃疡性结肠炎临床常见证候诊断标准等效转化,用于大鼠证候辨识。结果在造模后1~3 d,模型组大鼠不欲饮食,体重下降明显,腹泻便血,抓取反抗变强,但活跃度、反应能力、自主活动、精神状态均正常,毛发较暗淡凌乱。4 d^2周,模型组大鼠表现为稀便黏附肛门,宏观表征、抓力等与对照组基本无差异。在3~4周,模型组大鼠排稀便,饮食量及抓力降低(P<0.05),毛发暗淡凌乱,较对照组活跃度降低,抓取反抗及反应能力减弱,病理符合疾病诊断。5~8周,模型组各指标逐渐恢复正常。结论免疫复合法造模后3~4周模型动物符合溃疡性结肠炎脾虚湿蕴证。

缺血性脑卒中气虚证动物模型的建立

目的:建立缺血性脑卒中动物模型后,动态观察动物模型疾病发生后不同时间窗的证候,明确模型动物气虚证出现的时间窗。方法:首先依据临床意义相似性,将临床脑卒中及气虚证的诊断指标进行等效转化,建立动物模型诊断指标,再采用线栓法建立缺血性脑卒中动物模型后,动态采集动物气虚证诊断相关指标,对各阶段模型的气虚证特征数据进行分析、聚类以及检验。结果:动物模型气虚证诊断指标包括宏观表征、旷场、抓力及体质量。线栓法造模后模型组动物神经缺损严重程度评分均>0分,大脑TTC染色可见模型组大脑出现明显白色梗死区域,脑卒中造模成功。疾病发生后第2、3周,模型组大鼠较假手术组体质量、抓力显著降低(P<0.01),宏观表征见模型组大鼠毛发凌乱,精神不振,身体蜷缩,饮食饮水量减少,部分动物可见后肢颜色改变。术后第4周,模型组较假手术组体质量及抓力仍有显著降低(P<0.05),但宏观表征可见模型组大鼠毛发稍凌乱,精神活跃,饮食饮水量较第2、3周模型组有所增加,但不及假手术组。结论:大脑中动脉线栓法制备的缺血性脑卒中大鼠模型术后第2、3周符合气虚证诊断,术后第4周模型组气虚表现减轻。

气虚血瘀型缺血性脑卒中动物模型建立与评价方法浅析

建立合理可重复的病证结合动物模型及规范客观的模型评价体系,对气虚血瘀型缺血性脑卒中的疾病研究及中医气虚血瘀证的证候研究都非常重要。笔者对目前国内外气虚血瘀型缺血性脑卒中的动物模型制作方法进行文献调查研究,汇总了目前该证型疾病动物模型的制作方法及相关评价检测方法,分析探讨各方法的利与弊,以便为气虚血瘀型缺血性脑卒中疾病的相关实验研究提供相关依据。