血清微小RNA在中药肝毒性临床前评价中的应用研究

通过对19种具有潜在肝脏毒性的中草药进行临床前安全性评价,在观测体重、摄食量、血清生化指标、脏器系数与肝脏组织病理学改变的同时,探讨血清微小RNA(miRNA)作为新型候选标志物在中草药肝损伤诊断中的应用价值。结果表明:与溶剂对照组相比,血清miRNA-122水平显著升高的给药组有6组,而血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平显著升高的分别为2组和3组,其中五倍子组表现为急性药源性肝损伤。在血清miRNA-122的时间相关性和剂量相关性分析中,与血清ALT和AST相比,血清miRNA-122呈现出更高的敏感性,表现为更早期和更大幅度的显著升高。说明血清miRNA-122可作为中草药肝损伤的新型候选诊断标志物,与肝脏组织病理学改变具有良好的相关性,且较传统血清生化学指标更为敏感。

雏鸡法氏囊蛋白质组学双向电泳技术的建立及其初步分析

为了建立并优化鸡法氏囊蛋白质组学的双向电泳技术体系,以不同日龄雏鸡的法氏囊组织为研究对象,用固相pH梯度胶条进行等电聚焦、SDS-PAGE垂直电泳,采用不同的样品制备方法,对上样量、水化、等电聚焦、胶条平衡和凝胶染色方法等进行一系列优化,并应用PDQuest8.0.1软件对图谱进行初步分析。结果显示法氏囊组织在pH 5~8范围1、7 cm的2-DE胶上可以得到很好的分离,胶体考染后经PDQuest软件分析,在正常法氏囊组织可检测到800个以上蛋白点,不同2-DE图谱间蛋白点平均匹配率为83.5%,不同日龄雏鸡法氏囊存在有明显表达差异的蛋白质点37个,其中表达上调蛋白点17个,表达下调蛋白点11个,新增蛋白点5个,消失蛋白点4个。试验建立的鸡法氏囊组织蛋白质组双向电泳技术为法氏囊发育进化及其免疫功能的研究提供了新技术和方法。

两株马立克病病毒的分离及相关致病基因序列的比较

为了解国内鸡群马立克病（MD）流行毒株的遗传特征,采用细胞培养、间接免疫荧光等方法从江苏省2个鸡场送检病鸡中分离鉴定出2株马立克病病毒（MDV）Ⅰ型毒株,采用PCR方法扩增两分离毒株的vIL-8、pp38、meq等病毒致病相关基因,所得序列用DNAStar软件与GenBank上登录的参考毒株进行比较分析。结果显示,两分离毒株的序列同源性为99.7%-100%,与MDVⅠ型强毒及超强毒株的同源性为99.3%-99.8%,具有强毒特征;两分离毒株的meq基因与其他4个国内分离强毒株的序列完全一致,在pp38基因编码的氨基酸序列中第109位均为甘氨酸而不是国外GA等毒株的谷氨酸,这与以前报道的另外3个中国野毒株一致。提示,这些变异可能是国内MDV流行强毒的遗传性特征。

马立克氏病病毒CVI988株VP22蛋白承载异源蛋白细胞间扩散

马立克氏病病毒(MDV)被膜蛋白VP22被证实能在细胞间高效转导,为了进一步证明VP22能够作为蛋白转运的载体,将4种不同的异源蛋白与MDV1型(MDV-1)CVI988/Rispens株VP22蛋白融合表达,通过观察这些融合蛋白的细胞定位以及它们的细胞间扩散能力来研究VP22转运蛋白的情况。结果发现,禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)、牛γ干扰素(BoIFN-γ)及新城疫病毒(NDV)F蛋白能够被MDV-1VP22转运,而鸡法氏囊病病毒(IBDV)蛋白VP2不能被MDV-1VP22转运,上述结果说明MDV-1VP22蛋白能够作为蛋白转运的载体,但对所转运的蛋白具有选择性。

黄药子肝脏毒性研究进展

现代药理学研究表明黄药子具有抗甲状腺肿、抗癌、抗病毒、抗炎等作用,有很高的药用开发价值。但其肝脏毒性的发生大大局限了黄药子特有疗效的应用。本文主要对近几年来黄药子肝脏毒性研究进展作一综述。

基于“慕课+翻转课堂”理念的药物经济学混合式教学模式

针对药物经济学在传统课堂教学模式下存在的难点,探讨如何将药物经济学教学内容和特点与"慕课+翻转课堂"混合式教学模式的成功经验相结合,设计基于慕课的药物经济学教学模式和实施方案,提出提升"慕课+翻转课堂"教学模式教学效果的关键策略,为慕课教学模式在药物经济学教学实践中应用提供借鉴和参考。

乙酰基亚硝基脲(ENU)对C57BL／6J雄鼠睾丸组织的影响

目的观察乙酰基亚硝基脲（ENU）对雄鼠睾丸及其他组织器官的影响，分析引起小鼠死亡的原因，探索ENU处理雄鼠后的最佳配种时间。方法将8～10周龄的C57BL／6J雄鼠分为实验组和对照组。实验组腹腔注射ENU100mg／kg，每周1次，共3次，对照组以同样方法注射生理盐水。首次注射ENU后的第1周至12周，每周分别取4只实验组小鼠和对照组小鼠剖检及组织病理学观察；取其睾丸附睾称重及精子计数。记录死亡小鼠数量，并对其剖检及组织病理学观察。结果对死亡小鼠剖检发现胸腔纵隔内有巨大肿块，明显压迫心脏；组织切片观察发现睾丸和肝脏有明显病变：实验组小鼠睾丸从ENU处理的第2周起开始萎缩，第9周开始恢复；精子数量第4周至第9周稀少。结论ENU为小鼠的一种强诱变剂。纵隔肿瘤是导致雄鼠死亡的主要原因，雄鼠注射ENU后最佳配种时间应在首次注射后的第9周。

甲磺酸伊马替尼片在中国健康受试者中的餐后生物等效性研究

目的建立测定人体血浆中伊马替尼的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)。并评价甲磺酸伊马替尼片的相对生物利用度和生物等效性。方法24例健康受试者随机分为2组,分别餐后口服甲磺酸伊马替尼片受试或参比制剂400 mg,采用UPLC-MS/MS测定人血浆伊马替尼浓度。采用WinNonlin 6.4版统计软件计算药代动力学参数,SAS 9.2版软件评价两制剂的生物等效性。结果受试者餐后口服受试或参比制剂后,血浆中伊马替尼分别在3.47(1.98~5.98)和2.97(1.98~6.00)h达到峰浓度(2308.3±873.59)和(2119.6±597.20)ng·mL^-1;t1/2分别为(14.23±1.45)和(14.01±1.99)h;AUC0-t分别为(39724.7±18670.30)和(35294.4±7991.97)h·ng·mL^-1;AUC0-inf分别为(40111.0±19014.95)和(35595.0±8048.28)h·ng·mL^-1。两种制剂的Cmax、AUC0-t和AUC0-inf经对数转换后90%可信区间分别为95.52%~119.59%、97.07%~119.35%和97.10%~119.39%。结论甲磺酸伊马替尼片受试与参比制剂在餐后条件下具有生物等效性。

microRNA-122作为新药肝毒性早期评价标志物的相关分析

目的:探讨micro RNA-122(miR-122)在新药肝细胞毒性早期评价中的应用价值。方法:建立对乙酰氨基酚诱导的小鼠原代肝脏细胞损伤模型,对细胞培养上清中miR-122含量以及传统细胞毒性标志物乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)含量分别进行测定,对二者进行平行比对和相关性分析,初步探讨miR-122在新药肝细胞毒性早期评价中的作用;采用多种潜在肝脏毒性物质诱发的小鼠原代肝脏细胞损伤模型,进一步验证miR-122在肝细胞毒性早期评价中的应用价值。结果:在对肝细胞毒性早期评价中,miR-122和LDH呈现良好相关性(r>0.9);与LDH相比,miR-122具有更高的灵敏性。结论:miR-122作为新药肝细胞毒性早期评价标志物具有潜在应用价值。

基于OpenFDA的利妥昔单抗和阿达木单抗安全性评价与比较分析

目的 针对单克隆抗体药物利妥昔单抗(rituximab)和阿达木单抗(adalimumab),使用美国食品药品监督管理局公共数据库(the US food and drug administration public data open project,OpenFDA)中药品不良事件(adverse drug events,AE)进行检索,对其药品不良事件的具体情况进行对比分析,比较2种药物在安全性上的差异。方法在OpenFDA数据库,使用端点交互式图表板块中的应用程序接口(application programming interface,API)功能对利妥昔单抗和阿达木单抗在2004年4月1日至2021年10月15日的药品不良事件数据进行详细检索。采用报告比值比(reporting odds ratio,ROR)法进行风险信号挖掘,同时多角度分析两种药物的不良事件的情况。结果 共得到提及利妥昔单抗的不良事件报告131 408例(包含不良反应信号376 203例次),阿达木单抗的不良事件报告515782例(包含不良反应信号1 238 760例次)。利妥昔单抗上报人多为其他卫生系统人员,阿达木单抗多为消费者或非卫生系统人员。因不良反应信号较多,本研究仅筛选出利妥昔单抗和阿达木单抗排名前9位的不良反应信号进行分析,包含利妥昔单抗9 379例次和阿达木单抗6 441例次,其中利妥昔单抗不良事件信号最强的是感染和侵染类疾病,阿达木单抗不良事件信号最强的是皮肤和皮下组织疾病。结论 对OpenFDA数据库中关于利妥昔单抗和阿达木单抗的药品不良事件数据进行挖掘和深入分析,为临床安全用药提供参考,对2种药物的不良事件进行关注,可有助于采取相应的预防措施,促进临床合理用药。

加强药物临床试验中人类遗传资源管理的思考

自2015年药品监管制度与药品审评审批机制改革以来,国内药物临床试验水平迅速发展,我国医药创新产业与全球创新产业链不断融合。全球创新药物引进国内速度不断加快的同时,国产新药也在逐步走向世界。新修订的《药品管理法(2019)》和《药品注册管理办法(2020)》进一步激励了我国的创新药物研发,开展药物临床试验研究成为当前创新药物研发的主要趋势。然而越来越多的药物临床试验研究涉及人类遗传资源的采集、利用、对外提供等事宜,因此加强人类遗传资源管理将成为关乎国家安全的重要内容。本文通过分析南京医科大学附属逸夫医院药物临床试验开始前、过程中及结束后等全过程中人类遗传资源管理的现状,对人类遗传资源管理的职责分工、组织培训、质量管理体系及信息化管理流程等方面提出建议,进一步提高药物临床试验的质量。

中美药学类课程翻转课堂教学模式应用及其研究比较

为促进我国药学类课程翻转课堂教学模式的应用,利用中国期刊全文数据库(CNKI)、PubMed等数据库进行文献检索,比较我国和美国药学类课程翻转课堂在课程类型、课程研究设计、效果评价方面的异同。结果显示,中美两国药学类课程在应用翻转课堂的课程内容和课程类型上既有重合又有创新;在教学设计上两者类似;在研究结果上,参与度、师生互动皆有所提高,但成绩有差异,对翻转课堂的态度略有不同;在评价工具上都有创新。然而美国研究评价指标更多样,研究方法更丰富。美国对药学类课程翻转课堂的研究在应用的课程内容和课程类型、研究设计、效果评价方面值得我国借鉴。我国需拓宽药学类课程翻转课堂的研究范围,完善教学设计,拓展研究方法,丰富评价指标,改进评价工具,深入探讨教学效果。

马立克氏病病毒Ⅰ型CVI988/Rispens疫苗株UL13激酶结构域分析及其偏嗜密码子片段在大肠杆菌中的表达

【目的】寻找MDV-1 UL13激酶催化中心,并体外表达UL13,以便研究UL13蛋白激酶的功能。【方法】用PCR方法从CVI988疫苗株基因组中扩增UL13基因,利用GENEART(www.gcua.de)分析UL13在大肠杆菌中表达时密码子的偏嗜性;通过DNAstar抗原性分析确定UL13的高抗原性片段,进行原核表达,并以切胶免疫方法免疫小鼠制备多抗血清;通过NCBI的protein blast功能及Cn3D 4.1在线软件分析UL13保守结构域。【结果】PCR扩增出UL13基因,序列分析结果表明,UL13的259～400aa、431～513aa两个片段抗原性强,且稀有密码子较少;保守结构域分析发现UL13催化中心主要位于152～297氨基酸残基间,且在激酶SubdomainⅦ的保守甘氨酸残基被丝氨酸替代,SubdomainⅧ的保守非极性脯氨酸残基被极性半胱氨酸残基替换。利用大肠杆菌表达的UL13第259～400aa片段免疫小鼠制备出多抗血清能与真核表达产物反应。【结论】MDV-1UL13催化中心主要位于152～297氨基酸残基间,体外表达的基因产物诱导机体产生了抗UL13激酶的特异性抗体。

内质网应激介导的肾损伤及干预和保护策略

内质网应激是真核细胞对各种有害刺激的保护性应答机制,可触发以未折叠蛋白反应为核心的相关信号通路,且未折叠蛋白反应在内质网应激初期具有细胞保护作用,但在内质网应激过度(即过强或时间过长)时则会导致细胞程序性死亡。新近研究发现,内质网应激与多种肾毒物引发的肾损伤机制密切相关。本文通过简介内质网应激的相关信号通路及介导的细胞凋亡机制以及其生理病理学意义,并以若干典型肾毒物为例,着重对内质网应激在各类肾毒物引发肾损伤过程中的作用作一综述,探讨对内质网应激介导肾损伤的干预和保护策略。

关于中药命名规范化现状与发展的思考

通过文献研究对中药饮片和中成药命名规范存在的问题和原因进行回顾与分析,提出植物的不同基原、各地处方规范和国家标准不统一等是中药命名不规范的主要原因。尽管国家已出台的相关法规和指导原则推动了中药命名规范化的进程,但缺乏通用的中成药编码系统与标准,因此建议政府相关部门制定统一标准来实现中药命名规范化,为中药的合理使用和国际化,以及全球草药的统一监管奠定基础。