瑞芬太尼痛觉过敏大鼠Delta阿片受体mRNA的表达水平

目的：探讨切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠背根神经节及海马Delta阿片受体mRNA表达水平的变化。方法：健康雄性SD大鼠32只，尾静脉置管后随机分为4组，瑞芬太尼组（R组）输注瑞芬太尼1μg·kg-1·min-1，切口痛组（I组）输注等体积生理盐水，甘氨酸组（G组）输注甘氨酸15μg·kg-1·min-1，对照组（C组）输注等体积生理盐水，最后一次痛阈测定后留取大鼠L4-L6背根神经节及海马标本，应用实时定量PCR方法测定Delta阿片受体mRNA的表达水平。结果：R组、I组、G组均发生痛觉过敏，且R组痛觉过敏的程度高于I组和G组；R组海马Delta阿片受体mRNA表达水平（4.359±1.031）显著高于C组、I组（2.373±1.014）和G组（2.411±0.326）（P＜0.05）；R组背根神经节Delta阿片受体mRNA表达水平（2.108±0.361）显著高于C组、I组（1.409±0.435）和G组（1.413±0.234）（P＜0.05）。结论：瑞芬太尼可在切口痛模型大鼠中引发痛觉过敏，其机制可能与背根神经节及海马Delta阿片受体mRNA表达上调有关。

税收征管改革笔谈

随着征、管方式改革的展开与深入,人们开始从深层次上对新的征、管模式进行了较深刻的反思,到底是实行征、管、查三分离好,还是实行查、管两分离好?实行查、管分离后,应如何处理好查、管关系?等等,都是人们关注的焦点,本期我们有侧重地选择了几篇有代表性文章,经整理以笔谈形式进行讨论,以飨读者.

切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl、NR2A及NR2B亚基表达的变化

目的评价切口痛．瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl、NR2A及NR2B亚基表达的变化。方法尾静脉置管成功的雄性sD大鼠32只，体重240—260g，月龄2～3月，采用随机数字表法，将大鼠随机分为4组（n=8）：对照组（C组）静脉输注等容量生理盐水60min，瑞芬太尼组（R组）静脉输注瑞芬太尼1．2μg·kg-1·min-160min；切口痛组（I组）建立切I：1痛模型，同时静脉输注等容量生理盐水60min；瑞芬太尼＋切口痛组（R＋I组）建立切口痛模型，同时静脉输注瑞芬太尼1．2μg·kg-1·min-160min。于生理盐水或瑞芬太尼给药前24h、给药后2,6、24和48h时测定机械刺激缩足阈值（PWT）和热刺激缩足潜伏期（PWL），最后一次测定痛阈后处死取脊髓L4-6节段，采用Western blot法测定脊髓总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl、NR2A及NR2B亚基的表达，并计算膜蛋白中NP,2B／NR2A比值。结果与C组比较，I组、R组和R＋I组PWT降低，PWL缩短，总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl和NR2B亚基表达上调，膜蛋白中NR2B／NR2A比值增加（P〈0．05）。与R组和I组比较，R＋I组PWT降低，PWL缩短，总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl和NR2B亚基表达上调，膜蛋白中NR2B／NR2A比值增加（P〈0．05）。各组总蛋白及膜蛋白NMDA受体NR2A亚基表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论大鼠切口痛．瑞芬太尼痛觉过敏的形成可能与脊髓总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl和NR2B亚基表达上调和膜蛋白中NMDA受体NR2B亚基组成比例的增加有关。

瑞芬太尼痛觉过敏大鼠糖原合成酶激酶-3β表达水平的变化

目的探讨切口痛一瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓糖原合成酶激酶（GSK）-3β表达水平的变化。方法尾静脉置管成功的雄性sD大鼠32只，体质量240～260g，随机数字表法分为4组（n=8），瑞芬太尼组（R组）、切口痛组（I组）、瑞芬太尼＋切口痛组（R＋I组）和对照组（C组）。于麻醉前24h、麻醉后2、6、24和48h，分别采用Von-Frey丝法和热板法测定机械刺激缩足阈值（邢汀）和热刺激缩足潜伏期（PWL），最后一次测定痛阈后处死大鼠，取脊髓L4；节段，采用实时定量聚合酶链式反应法测定脊髓GSK-3βmRNA表达水平的变化，采用免疫印迹（Westernblot）法测定脊髓GSK．3B及pGSK-3p表达水平的变化并计算pGSK-3β／GSK-3p比值。结果R组、I组、R＋I组均发生痛觉过敏，且R＋I组痛觉过敏的程度高于R组和I组。4组中R＋I组GSK-3βmRNA表达水平最高，是C组的4．4倍，GSK．3p表达水平最高，是C组的3．7倍，且pGSK．3β／GSK-3p比值最小，与C组比较，减少了57．0％（P〈0．05）。结论术中应用瑞芬太尼麻醉可加重切口痛导致的痛觉过敏；切口痛．瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓GSK-3BmRNA表达升高，GSK．3B表达水平升高，且pGSK-3β／GSK-3β比值减小，该变化可能参与了切口痛．瑞芬太尼痛觉过敏形成的机制。

糖原合成酶激酶-3β在切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓含NR1及NR2B亚基的NMDA受体转运中的作用

目的探讨糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）在切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓含NR1及NR2B亚基的NMDA受体转运中的作用。方法雄性sD大鼠24只，体重240-260g，2-3月龄，采用随机数字表法，将大鼠随机分为3组（n=8）：对照组（C组）尾静脉注射二甲基亚砜（DMSO）2ml／kg，随后输注与瑞芬太尼等容量生理盐水60min；瑞芬太尼组（R组）尾静脉注射DMSO2ml／kg后制备切口痛模型，同时静脉输注瑞芬太尼1．2μg·kg-1·min-1 60min；GSK-3B抑制剂组（TDZD-8组）尾静脉注射GSK．38抑制剂（TDZD-8）1mg／kg后制备切口痛模型，同时静脉输注瑞芬太尼1．2μg·kg-1·min-160min。于静脉输注生理盐水或瑞芬太尼前24h、输注后2、6、24和48h（T0-4）时测定机械刺激缩足阈值（PWT）和热刺激缩足潜伏期（PWL），最后1次测定痛阈后处死，取脊髓L4-6节段，采用Westernblot法测定脊髓细胞膜（s）及胞浆内（i）NMDA受体NR1及NR2B亚基的表达，计算sNRl／iNRl及sNR2B／iNR2B比值。结果与C组比较，R组和TDZD-8组PWT降低，PWL缩短，sNR1和sNR2B表达上调，iNR1和iNR2B表达下调，sNR1／iNR1及sNR2B／iNR2B升高（P〈0．05）。与R组比较，TDZD-8组PWT升高，PWL延长，sNR1和sNR2B表达下调，iNR1和iNR2B表达上调，sNRl／iNRl及sNR2B／iNR2B降低（P〈0．05）。结论GSK．3B参与切口痛．瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓含NR1及NR2B亚基的NMDA受体从胞浆向胞膜的转运。