N-乙酰半胱氨酸通过抑制HIF-1α下调肝癌HepG2细胞survivin和VEGF表达的实验研究

目的探讨在低氧环境下N-乙酰半胱氨酸(NAC)能否通过抑制HIF-1α合成下调肝癌HepG2细胞survivin和VEGF的表达。方法将肝癌HepG2细胞分为3组,分别为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)和NAC+低氧组(NAC+Hypoxia组)。在低氧环境下对肝癌HepG2细胞使用NAC进行干预,在不同时间点(0h、24h和72h)采用MTT法对HepG2细胞的活性进行检测;同时在干预24h后,使用qPCR法和western blot法对HepG2细胞survivin、VEGF和HIF-1α的mRNA和蛋白水平进行检测。结果低氧环境下肝癌HepG2细胞活性呈时间依赖性下降,差异有统计学意义(P<0.05);且在各时间点与低氧组细胞相比较NAC+低氧组细胞活性下降更加显著,差异有统计学意义(P<0.05)。在低氧环境下24h后HepG2细胞survivin、VEGF和HIF-1αmRNA和蛋白表达较常氧环境下显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);但NAC+低氧组细胞survivin、VEGF和HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平较低氧组细胞显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低氧环境中N-乙酰半胱氨酸(NAC)可以通过下调HIF-1α的合成抑制肝癌HepG2细胞survivin、VEGF的表达,并可有效抑制肿瘤细胞的增殖。该基础研究为NAC应用于肿瘤的临床治疗奠定了一定的理论基础。

miR-21调控PTEN/Akt信号通路抑制肝癌HepG2细胞增殖的实验研究

目的探讨miR-21对于肝癌HepG2细胞增殖的调控作用及其相关的信号通路。方法分别采用miR-21mimic和miR-21inhibitor上调和下调肝癌HepG2细胞中miR-21的表达量。在不同时间点(0h、24h和48h)对肝癌HepG2细胞的增殖水平使用MTT法进行检测。在干预4h后,使用qPCR法对细胞中miR-21和PTEN mRNA水平进行检测;并对PTEN和Akt蛋白水平及Akt磷酸化(phospho-Akt)水平使用western blot进行检测。结果与对照组相比较,给予miR-21mimic干预的HepG2细胞活性呈时间依赖性增加,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与对照组相比较,给予miR-21inhibitor干预的HepG2细胞活性呈时间依赖性降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。在干预4h后与对照组相比较,miR-21mimic干预的HepG2细胞miR-21mRNA和Akt磷酸化水平明显增加而PTEN mRNA和蛋白表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);同时与对照组相比较,miR-21inhibitor干预的HepG2细胞miR-21mRNA和Akt磷酸化水平明显降低而PTEN mRNA和蛋白表达水平明显增加,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论该基础研究表明miR-21可能可以通过PTEN/Akt信号通路对肝癌HepG2细胞的增殖产生关键性的调控作用。并通过抑制miR-21的表达具有抗肝脏肿瘤的价值,为进一步肿瘤临床治疗提供思路。

长链非编码RNA TFPI2AS1通过AKT通路调控胃癌细胞的增殖和凋亡

目的:探讨长链非编码RNA TFPI2AS1对胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的作用及分子机制。方法:采用lipofectamine2 000转染siRNA构建两组胃癌MGC-803细胞模型:TFPI2AS1靶向转染组(si-TFPI2AS1组)和非TFPI2AS1靶向转染组(NC组)。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测两组TFPI2AS1、TFPI2、Bcl-2和Bax mRNA表达,细胞毒性活性检测(CCK8)和流式细胞术分别检测两组细胞增殖和细胞凋亡,Western blot检测两组p-AKT、cleaved caspase 9、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:qPCR检测结果显示,si-TFPI2AS1组TFPI2AS1和Bcl-2的mRNA表达水平明显低于NC组,TFPI2和Bax的mRNA表达水平明显高于NC组(均P<0.01)。CCK8检测结果显示,si-TFPI2AS1组细胞在培养24 h和48 h后细胞增殖能力均低于NC组(均P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,si-TFPI2AS1组细胞凋亡率显著高于NC组细胞凋亡率(P<0.01)。Western blot结果显示,si-TFPI2AS1组p-AKT、cleaved caspase 9和Bax蛋白表达水平显著高于NC组,而Bcl-2蛋白表达水平显著低于NC组(均P<0.01)。结论:TFPI2AS1可通过下调TFPI2的表达促进胃癌细胞增殖,抑制细胞凋亡,其可能通过抑制AKT/cleaved caspase 9信号通路而发挥作用。

乌司他丁对严重腹腔感染患者临床疗效及炎性介质和免疫系统的影响

目的探讨乌司他丁治疗严重腹腔感染的临床效果及对患者炎性介质和免疫系统的影响。方法选择2013年10月至2017年10月在河北省邯郸钢铁集团有限责任公司职工医院普外科接受治疗的严重腹腔感染患者140例。采用随机数字表法分为对照组和观察组,各70例。对照组采用头孢曲松钠、甲硝唑注射液静脉滴注治疗,观察组在对照组基础上加用乌司他丁静脉滴注治疗。比较2组临床疗效及血清降钙素原、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血乳酸和免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM水平。结果治疗1个月后,观察组有效率高于对照组[94.3%(66/70)比85.7%(60/70)],降钙素原、CRP、IL-6、TNF-α、血乳酸水平低于对照组[(0.41±0.27)μg/L比(0.82±0.29)μg/L、(8.4±0.4)mg/L比(13.2±1.0)mg/L、(14.0±2.0)μg/L比(20.1±2.0)μg/L、(10.4±1.1)μg/L比(14.0±1.3)μg/L、(2.1±0.3)mmol/L比(2.9±0.4)mmol/L],IgA、IgG、IgM水平高于对照组[(2.3±0.7)g/L比(2.0±0.5)g/L、(11.2±2.0)g/L比(8.8±1.9)g/L、(1.1.±0.6)g/L比(1.0±0.5)g/L],差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组治疗期间药物不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论将乌司他丁用于严重腹腔感染患者中有助于提高临床疗效,降低炎症因子水平,提高机体免疫系统调节作用。

乌司他丁对严重腹腔感染患者免疫状态及肠屏障功能的影响

目的观察乌司他丁对严重腹腔感染(sIAI)患者免疫状态及肠屏障功能的影响。方法选择2013年10月—2016年10月河北省邯郸市中心医院普外科收治的严重腹腔感染患者76例作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各38例,2组患者均按照相关指南进行常规治疗,观察组患者在常规治疗的基础上给予乌司他丁20万IU静脉注射,次/8h,2组患者均治疗7d。对比2组患者治疗前后的IgA、IgM、IgG、T淋巴亚群CD3^+、CD4^+、血浆内毒素、D-乳酸、肠脂肪酸结合蛋白、二胺氧化酶水平及APACHEⅡ评分变化情况,同时观察2组患者的ICU住院时间及28d生存情况。结果治疗前2组患者的IgA、IgM、IgG、T淋巴亚群CD3^+、CD4^+、血浆内毒素、D-乳酸、肠脂肪酸结合蛋白、二胺氧化酶水平及APACHEⅡ评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗7d后,2组患者的上述指标均较治疗前不同程度下降(P<0.01),治疗7天后组间比较,观察组患者上述指标下降更显著(t/P值分别为:3.676/0.000、3.614/0.001、4.372/0.000、16.138/0.000、35.580/0.000、10.206/0.000、4.683/0.000、5.471/0.000、9.315/0.000、6.435/0.000);治疗7d后,观察组入住ICU时间明显短于对照组(P<0.05)。2组患者28d病死率比较差异无统计学意义(χ~2=0.395,P=0.724)。结论乌司他丁可有效减轻严重腹腔感染患者炎性反应,改善患者免疫功能,减少脏器炎性损伤打击,保护肠屏障功能。

地西他滨对胃癌细胞AGS增殖和侵袭的影响

目的探究地西他滨对胃癌AGS细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法本研究时间为2017年10月至2018年12月,采用地西他滨处理购自于中国科学院细胞库的胃癌AGS细胞,应用MTT法检测细胞增殖率,亚硫酸氢钠转化测序法检测APC基因启动子的甲基化程度,实时荧光定量PCR法检测APC基因mRNA的表达,Western blotting检测APC蛋白表达,细胞锚定非依赖性生长分析法和Transwell细胞侵袭法检测细胞的增殖和侵袭能力。结果AGS细胞中,APC基因启动子高度甲基化(85.7±5.4)%;地西他滨处理AGS细胞后,细胞活力受到抑制,且呈浓度和时间依赖性。APC基因启动子去甲基化,mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),5μM升高(2.3±0.1)倍,10μM升高(3.6±0.2)倍,25μM升高(4.1±0.1)倍,50μM升高(3.9±0.2)倍,增殖和侵袭能力均减弱(P<0.05),AGS组(290.3±5.7)个细胞,5μM为(213.2±6.7)个细胞,10μM为(160.4±7.3)个细胞,25μM为(145.8±6.2)个细胞,50μM为(119.2±8.6)个细胞。结论地西他滨可以抑制AGS细胞的增殖和侵袭,表现出抗肿瘤活性,其相关机制可能为去除AGS细胞中APC基因的甲基化,恢复APC基因的表达。

严重腹腔感染患者血清炎性指标表达水平与病情严重程度的相关性分析

目的分析严重腹腔感染患者血清炎性指标变化与感染严重程度的相关性。方法选择2013年10月—2017年10月河北省邯郸钢铁集团有限责任公司职工医院普外科诊治的严重腹腔感染患者34例和局部感染者41例作为研究对象,分别作为严重感染组和局部感染组,另选择同期在医院体检的健康人群25例作为健康对照组。对比分析3组研究对象入院时和治疗3d后的体温(T),血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)及降钙素原(PCT)表达水平,APACHEⅡ评分、白细胞计数(WCB),并分析血清炎性指标与WBC的相关性结果入院时,严重感染组与局部感染组患者的T、WBC、CRP、TNF-α、IL-6及PCT、APACHEⅡ评分,均显著高于健康对照组(F/P=19.160/0.000、33.942/0.000、15.270/0.000、26.260/0.000、82.001/0.000、20.944/0.000、87.332/0.000);严重感染组TNF-α、IL-6、PCT及APACHEⅡ评分的表达水平,高于局部感染组(t/P=14.912/0.000、9.702/0.000、5.502/0.000、17.014/0.000);治疗3d后,2组感染患者T、WBC、CRP、TNF-α、IL-6及PCT、APACHEⅡ评分均较治疗前(入院时)显著降低(严重感染组t/P值分别为:9.257/0.000、5.018/0.000、5.059/0.000,19.629/0.000、19.066/0.000、2.632/0.011、13.625/0.000;局部感染组t/P值分别为:13.644/0.000、5.284/0.000、5.341/0.000、16.085/0.000、10.736/0.000、25.642/0.000、8.220/0.000),且治疗后严重感染组的TNF-α、IL-6、PCT水平及APACHEⅡ评分仍高于局部感染组(t/P=12.002/0.000、7.079/0.000、12.784/0.000、11.249/0.000)。经Spearman分析后结果显示,CRP、TNF-α、IL-6及PCT水平与WBC呈正相关(r=0.416、0.633、0.614、0.724,P均=0.000)。结论腹腔感染者的血清CRP、TNF-α、IL-6及PCT水平会显著升高,且其与WCB呈正相关性,在严重腹腔感染患者的诊治中具有积极意义。

腓骨短肌肌瓣的血供研究与临床应用

目的了解腓骨短肌血供的解剖学特征,探讨临床应用腓骨短肌肌瓣和以腓骨短肌为蒂的组织瓣内移修复踝周软组织缺损或治疗胫骨骨不连的可行性。方法 30例经10%福尔马林固定的成人下肢标本,动脉灌注红色乳胶,解剖观察腓骨短肌的血管来源、走行及分布情况;临床上设计切口取腓动脉的弓形动脉分支为蒂,修复踝周软组织缺损和胫骨骨不连患者10例。结果腓骨短肌血管呈节段性分布,主要来自腓动脉的弓形动脉,最远侧的分支平均位于外踝上(50.81±5.45)mm;根据腓骨短肌及血供特点,临床设计的腓骨短肌肌瓣应用于10例患者,均获成功。结论腓骨短肌血供丰富,逆行腓骨短肌肌瓣血供可靠,是修复踝周软组织缺损和胫骨骨不连的一种理想肌瓣。

腓骨短肌肌瓣逆行修复踝部软组织缺损临床观察

目的探讨腓骨短肌肌瓣修复踝部软组织缺损可行性。方法自2005年5月至2009年12月,设计腓骨短肌肌瓣逆行移位修复踝部软组织缺损创面,中厚皮片移植覆盖肌瓣8例,男6例,女2例;年龄18~52岁,平均36岁。结果本组均获随访,随访时间3~18个月,平均11个月。8例踝部软组织缺损合并骨、跟腱外露病例,缺损面积最大4 cm×6 cm,最小为3 cm×4 cm。术后伤口Ⅰ期愈合,肌瓣全部成活。结论腓骨短肌肌瓣逆行移位修复踝部软组织缺损,此方法手术操作简单,并发症少,成功率较高,适用于中小创面。

改良插管技术联合对症护理在胃肠减压治疗中的应用效果

目的观察改良插管技术联合对症护理在胃肠减压治疗中的应用效果。方法选取2017年2月至2018年2月河北省邯郸市中心医院收治的60名接受术后胃肠减压治疗的患者作为研究对象,平均分为对照组与实验组。对照组给予常规插管和护理,实验组给予改良插管和对症护理。对比两组患者舒适度、临床治疗效果指标和干预满意度。结果实验组舒适度高于对照组;实验组插管长度长于对照组,引流量大于对照组,胃蠕动恢复时间短于对照组,腹部不适症患者占比低于对照组(P<0.05)。结论改良插管技术联合对症护理在胃肠减压治疗中的应用效果较好。

腓骨短肌肌瓣修复足、踝部软组织缺损的临床应用

临床上对胫骨骨小连或踝上大面积组织缺损以及骨髓炎刮除后期在覆盖伤口的处理方面，常因踝周缺乏软组织、可利用组织少或因带蒂组织瓣移植的限制等因素感到棘手。有学者应用腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣修复胫前区足、踝部皮肤组织缺损，