COX-2、PCNA及p53在鼻咽癌中的表达及意义

目的:研究COX-2、PCNA及p53的基因产物在鼻咽癌组织中的表达及与其生物学行为和生存率之间的关系。方法:采用免疫组化SP法检测60例鼻咽癌及30例正常鼻咽组织中COX-2、PCNA及p53的蛋白表达水平。结果:(1)鼻咽癌组织COX-2、PCNA及p53阳性表达率分别为90%、75%和68%,明显高于正常鼻咽组织;(2)鼻咽癌组织COX-2、PCNA及p53的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05);(3)COX-2、PCNA及p53的表达密切相关;(4)鼻咽癌组织COX-2、PCNA阳性表达和生存率呈负相关,是鼻咽癌复发的显著预后因素。结论:鼻咽癌组织中COX-2、PCNA表达水平明显上调,与鼻咽癌的发生发展及预后不良有关,免疫组化检测COX-2、PCNA表达可用以判断鼻咽癌患者的预后。

白细胞介素-17A对鼻黏膜上皮细胞表达黏蛋白MUC5AC的刺激作用及分子机制

目的观察重组人白细胞介素17A(interleukin-1 7 A,I L-1 7 A)刺激离体培养的人鼻黏膜上皮细胞(human nasal epithelial cells,HNECs)后黏蛋白MUC5AC mRNA的表达变化,并检测相关的信号通路。方法离体培养的HNECs经过IL-17A诱导0～6 h后,通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chainreaction,Q-PCR)技术检测MUC5AC mRNA的表达变化;通过Western blot技术检测有无特异性阻断剂作用时p38信号通路的活化情况及相应MUC5AC mRNA的表达情况。结果 IL-17A在1 ng/ml即能诱导HNECs中MUC5AC的mRNA水平上调,并在浓度为100 ng/ml时达到峰值(F=48.60,P<0.01);p38信号通路在IL-17A诱导后开始活化,并在第30分钟达到最大程度,之后信号递减并趋于正常;采用p38特异性阻断剂SB203580抑制p38信号通路后,MUC5AC mRNA的上调得到抑制(F=223.8,P<0.01)。结论 IL-17A能通过p38信号通路诱导HNECs表达MUC5AC mRNA的过程,阻断p38信号通路可能作为干预由IL-17A诱导导致的气道黏液高分泌状态的一个关键靶点。

基于网络搜索指数与多中心过敏原皮肤点刺数据的广东省变应性鼻炎流行特征分析

目的分析变应性鼻炎(AR)在全国和广东省流行特征的差异,以及经济发展水平对尘螨过敏阳性率的影响。方法通过我国访问量最大的搜索引擎百度提供的'百度指数',选取2014~2018年共5年'过敏性鼻炎'搜索走势,分析全国范围和广东省AR搜索走势差异并分析其特征;通过对比'过敏性鼻炎'和'螨虫'在全国和广东省搜索走势,分析两组数据的相关性;搜集广东省11个地市15所三甲医院临床诊断A R患者尘螨标准化过敏原皮肤点刺(SPT)阳性率,与当地人均国内生产总值(gross domestic product,GDP)对比,分析其相关性。结果全国AR搜索走势具有明显的季节差异,每年4~5月及8~9月为搜索高峰,广东省AR搜索走势没有明显季节差异,只有1~2月搜索量较低;全国每年AR日搜索量谷峰比为24.37%,而广东省为42.28%,两者相比具有显著差异(P<0.001),全国月均搜索量大于峰值月份50%的月份数每年平均为6个月,而广东省平均每年为10.8个月,两者相比具有显著性差异(P=0.008);截取每月1日'过敏性鼻炎'与'螨虫'搜索量进行相关性分析,全国范围内两者没有相关性(R_s=0.392,P=0.064),而广东省两者搜索量具有明显相关性(R=0.604,P=0.002);广东省各地市多中心临床诊断AR患者尘螨SPT阳性率与当地人均GDP具有显著的相关性(R_s=0.900,P<0.001)。结论网络搜索大数据可在一定程度上反映真实世界AR的流行情况,通过对百度指数搜索走势分析,全国AR发作以季节性为主,而广东省AR发作以常年性为主,'螨虫'是广东省AR患者最为关注的过敏原,广东省各地市AR患者尘螨SPT阳性率与当地人均GDP呈高度相关,表明在气候条件基本一致的条件下,经济发展水平差异以及由此带来的生活方式改变是尘螨过敏率增高的重要原因。

第一鳃裂囊肿及瘘管的诊断治疗

目的探讨先天性第一鳃裂囊肿及瘘管的诊断和治疗方法。方法回顾性分析18例患者的病例资料,全部病例行手术切除。结果18例患者中,第一鳃裂瘘10例,外瘘口均位于耳垂后与乳突之间,内瘘口位于外耳道,其中位于骨与软骨交界处后下壁6例;囊肿8例,其中耳垂后4例,位于下颌角2例,腮腺筋膜内2例。术后病理均确诊为鳃裂囊肿或瘘管,随访未见复发。结论先天性第一鳃裂囊肿及瘘管临床少见,易误诊、误治;影像学检查是术前确诊的重要依据;合理的手术方案是该病治愈的关键,完整切除囊肿及瘘管是避免复发的重要措施。

B细胞活化因子在鼻息肉组织中的表达及与合并哮喘的关联性

目的探讨B细胞活化因子(B cell-activating factor,BAFF)在伴和不伴哮喘的鼻息肉组织中的表达情况。方法 18例鼻息肉患者(其中8例合并哮喘)和10例正常对照者,分别采用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)、定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chainreaction,qRT-PCR)检测鼻息肉和对照鼻甲组织中BAFF的定位、mRNA表达情况,并比较伴和不伴哮喘的鼻息肉组织中BAFF mRNA和蛋白表达的差异。结果鼻息肉组织中BAFF存在广泛阳性染色,而对照组织为弱阳性染色,2组阳性细胞数分别为4.05[2.01,6.72]/HPF和1.74[0.68,2.47]/HPF。鼻息肉组织中BAFF mRNA的表达分别为5.30[2.42,7.92]和1.20[0.51,1.95]),差异有显著性意义(P<0.05)。两个亚组进行比较,BAFF mRNA和蛋白表达在伴随哮喘的鼻息肉组织中较不伴随哮喘的嗜酸性鼻息肉组织中显著增高,mRNA:8.35[6.35,14.2]和2.85[1.20,4.47];蛋白:424.8[332.3,475.8]和276.3[161.0,322.6],差异有显著性意义(P<0.05)。结论鼻息肉组织中BAFF的表达增高可能是与鼻息肉伴发哮喘与否存在关联性。

下咽癌、颈段食管癌切除后胃代食管术并发症分析

目的 :报告非开胸食管内翻拔脱后胃代食管术治疗下咽癌、颈段食管癌的术后并发症 ,探讨并发症的发生原因及预防措施。方法 :回顾性分析 1994年～ 2 0 0 0年间对 2 1例下咽癌、颈段食管癌病人行非开胸食管内翻拔脱后胃代食管术治疗情况。其中颈段食管癌 9例 ,全部保留喉功能 ;下咽癌 12例 ,其中 7例同时行喉全切除术 ,5例行喉部分切除术。全部病例均行幽门成形术。结果 :6例发生并发症 :吻合口瘘 1例 ,胃坏死 2例 ,肺炎 2例 ,心衰 1例。其中术后死亡 2例 ,并发症发生率 2 8.6 %。结论 :对并发症的发生原因。

喉癌中原癌基因c-met蛋白的表达

目的:研究原癌基因c-met蛋白在人类喉癌组织中的表达,探讨c-met的蛋白表达与喉癌的临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组化SABC法检测80例人类喉癌组织标本及60例声带小结、息肉中c-met的蛋白表达,并行统计学分析。结果:原癌基因c-met蛋白在声带小结、息肉中的表达率为10％,在喉癌组织中的表达率为65％;c-met蛋白的表达与喉癌的临床分期、病理学分级、淋巴结转移均显著相关(P<0．01)。结论:原癌基因c-met蛋白在喉癌组织中高表达且与喉癌淋巴结转移、病理学分期、组织分级密切相关。

耳鼻咽喉科医生职业困境及其对策探讨

目的根据我国当前医患关系矛盾较为突出的现状,分析耳鼻咽喉专科领域医疗暴力发生原因,探讨如何在医疗实践中有效化解医患矛盾、确实保护医护工作者身心安全的调节思路与对策。方法剖析当前我国公立医院耳鼻咽喉科医师职业现状,分析领域医患冲突事件的起因及发展过程与结局事件,把握突出的矛盾焦点,探讨相应对策。结果当前我国耳鼻咽喉科领域现状为医疗软环境较为恶劣,专业人才培养周期长且工作强度大而医生满意度低,社会认可度和职业认同感低,临床诊疗难度大,需要制定相应政策以优化从医软环境,加大耳鼻咽喉科医生专业素养培养提升力度,加强医患沟通打造和谐医患关系,给予人文关怀缓解医生职业压力。结论从医院管理角度看,需要完善相关政策,加大专科医生的培养力度,提高从业人员工作满意度。同时,耳鼻咽喉科医生本身也要加强自身专业技术能力的提升,注重医患沟通细节和技巧,主动避免和防范纠纷的发生。

结核分枝杆菌复合群四重PCR检测方法的建立及应用

目的本文旨在建立一种能快速鉴定结核分枝杆菌复合群不同成员的多重PCR方法。方法针对结核分枝杆菌复合群4个特异性基因16sRNA、IS6110、RV2652、RV3873设计引物,通过筛选优化引物浓度、退火温度、Mg2+浓度和dNTP浓度,确定了最佳反应条件。结果扩增产物的大小分别为824bp、621bp、418bp和254bp,能特异性检测并鉴别出非结核分枝杆菌(824bp 1条带)、卡介苗(824bp和621bp 2条带)、牛分枝杆菌(824bp、621bp和254bp 3条带)和结核分枝杆菌(4条带)。检测灵敏度达到125fg。对42份牛结核菌素皮内变态反应阳性牛的肺淋巴结样本和115份肺结核病人的痰液样品进行了检测,其检出率或准确率明显高于传统方法。结论成功建立了多重PCR方法,能快速、准确地对结核分枝杆菌群进行种、型鉴别。

重组adv5.oriP.HRP腺病毒载体构建及对EBV阳性鼻咽癌C666-1细胞株的靶向表达

目的:构建腺病毒载体adv5.oriP.HRP,观察其对EBV阳性鼻咽癌C666-1细胞株的靶向表达。方法:采用p△EIsp1A穿梭质粒系统,酶切、定向克隆方法构建含HRP自杀基因的p△EIsp1A/oriP-HRP重组质粒,在293细胞中进行重组腺病毒adv5.oriP.HRP包装、扩增、纯化与病毒滴度测定,体外转染EBV阳性鼻咽癌C666-1细胞株与EBV阴性鼻咽癌CNE-2Z细胞株,RT-PCR法检测不同细胞系中adv5.oriP.HRP的表达,Western blot法检测经不同浓度adv5.oriP.HRP转染后细胞中HRP蛋白的表达。结果:p△EIsp1A/oriP-HRP在293细胞中包装扩增后的病毒滴度为528@1012TCID50/L;体外转染鼻咽癌C666-1细胞株与CNE-2Z细胞株后,RT-PCR检测到C666-1细胞系1229bp处得明亮条带,而CNE-2Z细胞几乎未检测到重组基因mRNA的表达,Western blot可见随着MOI的增加C666-1细胞中HRP蛋白表达逐渐增多,而在CNE-2细胞中HRP蛋白的表达几乎呈阴性,两组间差别有统计学意义(P<0.05)。结论:重组腺病毒adv5.oriP.HRP能在EBV阳性的鼻咽癌C666-1细胞株内靶向性转染和表达。

深圳市医务工作者甲状腺结节相关风险因素研究

目的:观察深圳市第二人民医院医务工作者的甲状腺结节检查情况,并分析其相关影响因素。方法:回顾性分析深圳市第二人民医院医务工作者2020年1月至2020年12月期间的体检资料,纳入体检资料完备的医务工作者749例,统计分析医务工作者甲状腺结节超声检查情况与甲状腺功能、血糖、血脂、血压、体质量指数(BMI)、工作岗位及职称等因素的相关性。结果:深圳市第二人民医院职工甲状腺结节超声检出率为43.66%,女性甲状腺结节检出率高于男性,高级职称员工的检出率高于初、中级职称;45~55岁组与<35岁组相比,甲状腺结节检出率更高,>55岁组分别与<35岁组、35~45岁组相比,甲状腺结节检出率检均更高,差异均具有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,年龄、舒张压(DBP)、BMI及总胆固醇(TC)为甲状腺结节的独立危险因素(P<0.05)。结论:深圳市第二人民医院医务工作者的甲状腺结节检出率与年龄、血脂、血压及BMI相关,高级职称者的甲状腺结节检出率更高,可能与其承受着更多的精神与工作压力相关。因此有必要针对不同层次的医务工作者制定适宜的随访计划,并给予生活指导及压力疏导。

经鼻内镜脑脊液鼻漏修补术15例

目的:总结鼻内镜治疗脑脊液鼻漏的要点及可靠的诊断定位方法。方法:回顾性分析15例脑脊液鼻漏患者,其中外伤引起者10例,医源性4例,原发性1例。其中6例经2～6周保守治疗无明显好转给予经鼻内镜下修补术;2例外伤性脑脊液鼻漏经神经外科开颅修补失败后转入我科手术治疗;1例复杂的多发性颅底骨折并双侧额窦后壁缺损致脑脊液鼻漏,经鼻内镜修补成功(DraftⅢ型)。缺损最大者2.5 cm×1.5 cm,所有患者术前均经实验室生化检查确诊,均予以CT和(或)MRI检查和经鼻内镜检查。10例给予脑池造影结合超薄螺旋CT扫描。结果:所有患者均一次治愈,平均随访时间20个月(8～40个月),无复发。1例术后有轻微头疼,经保守治疗后缓解。脑池造影结合超薄螺旋CT扫描定位精确,10例均经术中确定。结论:鼻内镜下脑脊液鼻漏修补术是外科治疗脑脊液鼻漏的首选术式。脑池造影结合超薄螺旋CT扫描是目前最好的影像学定位方法。随着鼻内镜相关器械质量提高及新器械的开发应用,手术范围可能进一步扩大。

鼻内翻性乳头状瘤Kamel分期对术式选择的意义

目的研究以鼻内翻性乳头状瘤(NIP)起源为主要依据的临床分期,用以指导手术和评价术后疗效。方法 回顾性分析55例NIP手术病例。男37例,女18例,男女比例为2∶1,27～78岁。右侧23例,左侧32例,未发现双侧发病者。11例有NIP手术史。25例术前病理检查证实为NIP,按照Kamel分期,其中Ⅰ型30例、Ⅱ型25例。结果Ⅰ型NIP行鼻内镜下局部切除术(30例),Ⅱ型NIP行鼻内镜下局部切除术(4例)、鼻内镜下上颌窦内侧壁切除术(11例)、鼻内镜下双径路手术(10例)。复发率:Ⅰ型复发率为6.7%(2/30),Ⅱ型复发率为16.0%(4/25),总复发率为10.9%(6/55)。与检索资料相比复发率差异无统计学意义。结论 NIPⅠ型手术采取鼻内窥镜下局部切除术,Ⅱ型采取鼻内镜下上颌窦内壁切除术或经唇龈沟切口上颌窦前壁开窗结合经鼻内镜手术(双径路手术)。术后复发率与报道资料复发率相比没有统计学意义,说明这种基于疾病来源新的Kamel方法临床分型对手术治疗有指导意义,并且经鼻内镜鼻内翻性乳头状瘤切除和传统方法相比有较大优势。

颈静脉球瘤诊断与治疗(附8例报告)

目的探讨颈静脉球瘤的临床特点、诊断要点及巨大颈静脉球瘤的手术治疗方法。方法回顾性分析2000至2009年深圳市第二人民医院及山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科收治的8例颈静脉球瘤的病例资料。结果 8例患者中,男5例,女3例;33～62岁;均为单耳病变,左耳2例,右耳6例;主要临床症状为搏动性耳鸣、声音嘶哑、听力下降和面瘫。临床表现结合CT、MRI等影像学检查可明确诊断。所有病例均经术后病理证实。按1979年Fisch分型,A型0耳,B型1耳,C型1耳,D1型4耳,D2型2耳。均给予手术治疗,2例行单纯乳突根治术,6例行颞颈联合入路彻底切除肿瘤。术中2例出现脑脊液漏均经硬脑膜修补后治愈;2例术后面瘫,1例经治疗后缓解,1例为永久性;原有声音嘶哑、搏动性耳鸣缓慢消失。随访6例,单纯乳突根治术2例中,1例随访5年未复发,1例失访;余5例中,有1例术后第2年复发,给予放射治疗;2例随访7年,1例3年,1例2年,均未复发。结论颈静脉球瘤易误诊;诊断主要根据病史、临床及影像学检查,其中影像学对确诊起重要作用。手术切除是目前治疗颈静脉球瘤最好的方式,入路的选择对于手术的成功起决定性作用。

鼻咽癌中VEGF的表达与树突状细胞含量的相关分析及临床意义

目的探讨鼻咽癌组织中VEGF表达与树突状细胞含量的相关性。方法选取鼻咽癌组织和鼻咽部淋巴组织各25例,采用ELISA方法检测组织中VEGF的表达,采用流式细胞仪检测组织中树突状细胞和调节性T细胞的含量并分析其相关性。结果鼻咽癌组织中VEGF含量高于鼻咽部淋巴组织,组间差异具有统计学意义(t=12.324,P<0.01);鼻咽癌组织中CD4+淋巴细胞含量低于鼻咽部淋巴组织,组间差异具有统计学意义(t=14.304,P<0.01);而鼻咽癌组织中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞含量高于鼻咽部淋巴组织,组间差异具有统计学意义(t=5.910,P<0.01);鼻咽癌组织中CD123+树突状细胞含量低于鼻咽部淋巴组织,组间差异具有统计学意义(t=7.866,P<0.01),鼻咽癌组织中CD11c+树突状细胞含量低于鼻咽部淋巴组织,组间差异具有统计学意义(t=3.411,P<0.01),鼻咽癌组织VEGF表达与CD4+CD25+淋巴细胞含量呈正相关(r=0.966,P<0.01),与CD123+树突状细胞含量呈负相关(r=-0.946,P<0.01),与CD11c+树突状细胞含量呈负相关(r=-0.954,P<0.01)。结论鼻咽癌组织中VEGF表达与鼻咽癌组织中CD4+、CD25+调节性T细胞和树突状细胞的含量有关,可能参与鼻咽癌的免疫逃逸。

辣根过氧化物酶/吲哚三醋酸酶前药对鼻咽癌细胞的杀伤作用

目的研究adv5.oriP.HRP对鼻咽癌细胞靶向性转染和HRP/IAA对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法将adv5.oriP.HRP感染C666-1,KS1和CNE-2Z细胞,加入IAA,用MTT法评估细胞杀伤效果。建立乏氧有氧条件,检测HRP/IAA在乏氧状态下鼻咽癌细胞的杀伤能力及旁观者效应。结果adv5.oriP.HRP能靶向性在EBV阳性的鼻咽癌细胞内高效转染和表达。HRP/IAA对鼻咽癌细胞有强大的杀伤作用,在一定范围内杀伤能力随孵育时间和病毒载体及前药的浓度增高而增加。在乏氧状态下,HRP/IAA有同样的杀伤能力。当感染细胞占总细胞的10%左右时,65%的肿瘤细胞死亡,当比例达到20%时,90%以上的细胞死亡,显示HRP/IAA有很强的旁观者效应。结论adv5.oriP.HRP能在EBV病毒阳性的细胞内靶向性表达;HRP/IAA在乏氧和有氧状态下均有强大的杀伤能力和旁观者效应。adv5.oriP.HRP/IAA是理想的病毒介导的酶前药基因组合。

Twist和HIF-1α在鼻咽癌中的表达及其相关性研究

目的探讨Twist和HIF-1α在鼻咽癌组织中表达及其相关性。方法应用RT-PCR及SABC免疫组化法检测50例鼻咽癌组织Twist、HIF-1α的mRNA及蛋白表达情况。结果鼻咽癌组织中不同患者年龄、肿瘤大小分组间Twist及HIF-1α的mRNA和蛋白表达差异无统计学意义;不同淋巴结转移、临床分期和病理分级分组间Twist及HIF-1α的mRNA和蛋白表达差异具有统计学意义。鼻咽癌组织中Twist的mRNA及蛋白表达间、HIF-1α的mRNA及蛋白表达间、Tw ist和HIF-1α的蛋白表达间、Tw ist和HIF-1α的mRNA表达间均存在正相关关系。结论鼻咽癌组织中Twist、HIF-1α均高表达,且两者间具有相关性。HIF-1α蛋白可能通过上调Twist表达成为其促进鼻咽癌浸润、转移的途径之一。

早期声门区癌的手术治疗及疗效评估

目的探讨T1、T2早期声门型喉癌的治疗方法。方法对112例T1、T2早期声门型喉癌(其中T1N0M080例、T2N0M032例)患者施行喉小部分切除术。结果 112例患者切口均Ⅰ期愈合,6～7 d拆线,术后2～3 d恢复经口进食,术后第5～6 d更换小号气管套管,1～2d后试堵管,平均戴管时间7.3 d,拔管率100%;纤维喉镜检查见术后6个月声门裂形态接近正常且闭合严密。嗓音学分析结果示术前、术后1周与术后2个月、6个月Shimmer和NNE对比,差异有统计学意义(P<0.01);随访满3年76例,全部生存;满5年36例,35例生存(1例不明原因死亡),生存率97.2%。结论早期声门区喉癌施行喉部分切除术,疗效确切,可获得稳定的局部控制率。在彻底切除肿瘤的前提下,最大限度地减少了手术造成的创伤,住院时间缩短,患者及家属的经济负担减轻,最大程度地保留和重建了患者的喉功能。

顺铂增加BCL-2蛋白高表达的鼻咽癌细胞凋亡

目的:通过对3种不同鼻咽癌细胞的BCL-2蛋白表达、细胞存活率和凋亡率的观察,探讨提高顺铂治疗鼻咽癌疗效的新方法。方法:采用Western blot技术检测3种不同鼻咽癌细胞CNE1、C666-1及SUNE1的BCL-2蛋白的表达情况;采用MTT法及流式细胞技术,检测并比较顺铂对3种鼻咽癌细胞的细胞存活率和凋亡率的影响。结果:BCL-2蛋白在CNE1及C666-1细胞上高表达,在SUNE1上几乎无表达(P<0.05);经顺铂干预后,CNE1及C666-1细胞的细胞凋亡率明显升高,存活率明显低于对照组(P<0.05);SUNE1细胞的细胞凋亡作用较弱(P<0.05)。结论:BCL-2蛋白在不同类型的鼻咽癌细胞上表达量不同,提示顺铂对BCL-2蛋白高表达的鼻咽癌细胞的杀伤作用更强。

HRP/IAA酶前药系统抗鼻咽癌的实验研究

目的体外、原位实验观察HRP/IAA酶前药系统对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤效应,以探讨其对鼻咽癌的治疗作用。方法细胞转染获得稳定表达HRP蛋白的C666-1细胞。MTT法检测不同浓度的IAA对HRP表达阳性的C666-1细胞的杀伤效应。原位基因治疗:取5×106对数生长期的C666-1细胞接种裸鼠右腋下,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,接种细胞10d后将裸鼠随机分成3组,观察HRP/IAA酶前药系统对移植瘤生长的抑制作用。结果体外实验中,同一浓度IAA干预后C666-1/HRP(+)组细胞的相对存活率显著低于C666-1/HRP(-)组(P<0.05),且随着IAA浓度的升高C666-1/HRP(+)组细胞的相对存活率逐渐降低,分别为(15.58±1.12)%、(10.11土1.06)%、(5.21±1.04)%;原位基因治疗实验结果表明IAA组鼻咽癌移植瘤生长受到抑制,体积明显小于空病毒组和生理盐水组(P<0.05),且肿瘤细胞凋亡显著增多(P<0.05)。结论 HRP/IAA酶前药系统对鼻咽癌C666-1细胞具有杀伤作用,具有抗鼻咽癌的作用。