p27及HIF-1α在二甲双胍调节下咽癌细胞增殖与凋亡中的作用研究

目的探讨二甲双胍在下咽癌细胞增殖与凋亡中的作用,以及p27和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)蛋白在该调节机制中的作用,为临床治疗下咽癌提供进一步的理论基础。方法以0、5、10 mmol/L二甲双胍干预体外培养人下咽癌Fadu细胞24 h,5 mmol/L组再干预至48 h,应用免疫细胞化学法检测p27和HIF-1α蛋白的表达。下咽癌移植瘤裸鼠随机分为对照组(不予二甲双胍干预),低剂量二甲双胍治疗组(met 40组,每日40 mg/kg),高剂量二甲双胍治疗组(met 200组,每日200 mg/kg),各5只,腹腔注射给药28 d后,取移植瘤测量肿瘤体积,计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤细胞形态,免疫组织化学染色法检测p27和HIF-1α蛋白表达水平的变化。结果体外培养的Fadu细胞p27蛋白表达随二甲双胍干预浓度的增加及干预时间的延长而增加(P均<0.05),而HIF-1α蛋白表达随二甲双胍干预浓度的增加及干预时间的延长而降低(P均<0.05)。下咽癌移植瘤裸鼠药物干预后,met 40组和met 200组移植瘤体积均较对照组缩小(P均<0.05);移植瘤标本p27蛋白表达随给药浓度的增加而增加,HIF-1α蛋白表达随给药浓度增加而降低(P均<0.05)。结论二甲双胍可有效抑制下咽癌细胞体内、体外的增殖并促进其凋亡,为临床治疗下咽癌提供进一步的理论依据。

鼓室球体瘤12例误漏诊原因分析及治疗体会

目的分析鼓室球体瘤的临床特点及治疗方法,总结防范误漏诊的措施。方法回顾性分析我院12例鼓室球体瘤误漏诊临床资料。结果 12例均为单耳发病,听力下降10例,搏动性耳鸣7例,耳道新生物5例,耳道分泌物4例,耳道间断出血1例。术前11例误漏诊,误诊为胆脂瘤型中耳炎5例（41.7%）,外耳道胆脂瘤2例（16.7%）,外耳道肉芽肿、血管瘤各1例（8.3%）,漏诊2例（16.7%）,均经术后病理检查确诊;仅1例术前经活组织病理检查确诊。12例均行手术治疗,术后随访1-3年无复发。结论鼓室球体瘤与中耳炎性疾病鉴别困难,充分的影像学检查并配合病理检查对减少本病误漏诊十分重要;治疗以手术为主,预后良好。

肥胖青少年上气道结构和体脂构成与阻塞性睡眠呼吸暂停的相关性研究

目的判定肥胖青少年发生阻塞性睡眠呼吸暂停的解剖危险因素。方法收集24例发生阻塞性睡眠呼吸暂停的肥胖青少年组(人体质量指数BMI Z-分数:2.2±0.4)和24例肥胖对照组(人体质量指数BMI Z-分数:2.1±0.3)的相关临床资料,通过磁共振影像测量两组肥胖青少年的上气道结构以及体脂构成,并应用多因素回归分析与条件Logistic回归进行统计学分析。结果与对照组相比,患有阻塞性睡眠呼吸暂停的肥胖青少年组具有小口咽(t=7.56,P<0.05)、大腺样体(t=8.79,P<0.05)、大扁桃体(t=10.11,P<0.05)以及大咽后淋巴结(t=9.35,P<0.05)的解剖特点,并且这些淋巴组织的大小与阻塞性睡眠呼吸暂停的严重程度有关;而人体质量指数的Z-分数与这些组织的大小无相关性。同时,发生阻塞性睡眠呼吸暂停的青少年具有增大的咽旁脂肪垫(t=1.32,P>0.05)和腹部内脏脂肪(t=0.78,P>0.05),而脂肪组织的多少与阻塞性睡眠呼吸暂停的严重程度无关。人体质量指数的Z-分数对脂肪组织的多少无关。结论上气道淋巴组织增生是肥胖青少年发生阻塞性睡眠呼吸暂停的重要因素,而这些组织的增生与肥胖无关。尽管患有阻塞性睡眠呼吸暂停的肥胖青少年具有更丰富的咽旁脂肪垫和腹部内脏脂肪,但并未发现其与阻塞性睡眠呼吸暂停的严重程度及肥胖有直接关系。

右美托咪定对鼻内镜手术术后早期睡眠质量的影响

睡眠在维持人体正常的机体功能方面有着重要作用^([1])。充足的睡眠对于手术患者的术后康复有着良好促进作用^([2])。睡眠障碍可导致围术期风险增加,甚至升高患者围术期死亡率^([3])。鼻内镜手术是鼻腔鼻窦的常规手术模式^([4]),但易出现术后睡眠障碍^([5])。

二甲双胍抑制下咽癌裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:通过构建下咽癌裸鼠移植瘤模型,研究二甲双胍对下咽癌体内生长的抑制作用及临床上治疗下咽癌的理论基础。方法:人下咽癌Fadu细胞悬液皮下接种法构建荷瘤鼠,接种2周后取皮下移植瘤块接种至裸鼠腋背部皮下,建立移植瘤动物模型。当移植瘤体积增大到约60mm3时,选取15只瘤块较均匀的裸鼠,随机均分为3组,分别为对照组(等体积的生理盐水)、低剂量二甲双胍治疗组[met40组,40mg/(kg·d)]和高剂量二甲双胍治疗组[(met200组,200mg/(kg·d)],连续28d每日腹腔注射给药1次,每天观察裸鼠的一般情况。治疗28d后,脱颈处死荷瘤鼠,取移植瘤,以免疫组织化学染色及Western Blot方法检测各组移植瘤内AMPK、p21、cyclin D1的表达情况。结果:(1)以Fadu细胞瘤块接种于裸鼠腋背部皮下,成功构建了下咽癌裸鼠移植瘤模型,在药物干预全程中,各组裸鼠一般情况良好,无特殊异常表现及药物不良反应发生;(2)药物干预28d后,2个二甲双胍治疗组的移植瘤平均体积均较对照组有显著抑制(P<0.05),met40组和met200组的抑瘤率分别为(23.30±7.17)%和(40.51±9.25)%;(3)移植瘤标本免疫组织化学染色结果显示,肿瘤内AMPK和p21蛋白的阳性表达平均吸收度值:met40组为0.262±0.046和0.305±0.091,met200组为0.308±0.087和0.477±0.114,均显著高于对照组(0.246±0.038和0.288±0.065),差异有统计学意义(P<0.05);cyclin D1蛋白阳性表达平均吸收度值:met40组为0.269±0.042,met200组为0.216±0.032,显著低于对照组(0.307±0.060),差异有统计学意义(P<0.05);(4)Western Blot方法检测AMPK和p21蛋白的灰度值结果显示:AMPK和p21蛋白met40组分别为1.124±0.085和0.594±0.063,met200组为1.783±0.128和0.970±0.079,均显著高于对照组(0.641±0.042和0.474±0.027),差异有统计学意义(P<0.05);cyclin D1蛋白met40组为0.781±0.055,met200组为0.711±0.046,显著低于对照组(1.608±0.101),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:40mg/(kg·d)和200mg/(kg·d)浓度的二甲双胍均可有效抑制下咽癌裸鼠移植瘤模型的生长,抑制肿瘤细胞的增殖、促进其凋亡,且没有引起明显的不良反应,提示二甲双胍对于下咽癌患者的治疗具有较好的临床应用前景。

累及鼻颅底区域鼻腔鼻窦骨源性良性肿瘤的鼻内镜手术治疗

目的探讨包括骨瘤、骨化纤维瘤、骨纤维异常增殖症在内的累及鼻颅底区域鼻腔鼻窦骨源性良性肿瘤鼻内镜手术治疗策略。方法经鼻内镜治疗鼻腔鼻窦骨源性良性肿瘤140例,包括骨瘤116例,骨化纤维瘤14例,骨纤维异常增殖10例。手术方式包括:单纯鼻内镜手术95例,影像导航辅助鼻内镜手术24例,鼻内镜联合鼻外入路21例。结果患者均顺利完成手术,未发生严重并发症。骨瘤均彻底切除。骨化纤维瘤12例得到彻底切除,2例有病变残留。骨纤维异常增殖症10例采取姑息性手术,术后面部外观得以恢复,病变对周围组织地压迫症状得以缓解。术后随访6~36个月,骨瘤术后无复发,骨化纤维瘤术后复发2例,骨纤维异常增殖症1例术后视力无改善,其余患者症状得到不同程度的缓解。结论骨瘤、骨化纤维瘤及骨纤维异常增殖是鼻窦常见的良性纤维骨性病变。三者临床症状相似。高分辨率CT和(或)MRI是早期诊断的重要手段。影像导航引导鼻内镜并必要时联合鼻外入路手术是治疗该类疾病的有效方法。手术时机及手术方式的选择应依据病变类型、患者症状、肿瘤位置及范围综合考虑。

阻塞性睡眠呼吸暂停对儿童生活质量的影响

目的:研究阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)对儿童生活质量的影响。方法:选择经整夜多导睡眠监测诊断的44例OSA儿童为研究对象,以35例同期儿科的无打鼾健康儿童为对照,采用儿少主观生活质量问卷和儿童焦虑自评量表评定儿童生活质量问题。结果:儿少主观生活质量问卷中OSA组儿童的生活质量满意度评分在各水平、各维度均显著低于健康对照组(P<0.05),尤其表现在认知成份中的学校生活(3.78±1.73)及情感成份中的抑郁体验(3.70±2.18)方面。OSA组儿童焦虑障碍评分(21.39±10.49)高于健康对照组(14.21±9.69)(P<0.05);OSA组儿童存在焦虑障碍的比率亦高于健康对照组(P<0.05)。结论:OSA组儿童较健康儿童在各水平、各维度对生活质量不满意均有较高的发生率。OSA组儿童较健康儿童对生活质量不满意在各水平、各维度均有明显统计学差异,尤其表现在认知成份中的学校生活及情感成份中的抑郁体验方面。OSA组儿童较健康儿童有较高的焦虑障碍问题。

外鼻恶性肿瘤的精准切除及缺损修复

目的探讨精准切除外鼻恶性肿瘤以及准确评估、合理修复组织缺损的方法。方法回顾性分析解放军联勤保障部队第九八〇医院2010年1月至2020年6月期间收治的48例外鼻恶性肿瘤患者,其中男性28例,女性20例,年龄36~86岁。肿瘤病理类型包括基底细胞癌29例,鳞状细胞癌11例,外毛根鞘癌6例,腺样囊性癌1例,非霍奇金淋巴瘤1例。肿瘤切除以传统的安全缘扩大切除为主,对于明显影响修复效果的切缘,即病变邻近鼻翼缘、鼻小柱或深部易贯通切缘采用Mohs显微描记手术原理,尽可能缩小切除范围。全部病例均采用肿瘤全切及一期/分期皮瓣修复方法完成,以皮瓣转移为主。结果根据病理类型和肿瘤大小,肿瘤安全切缘以4~10 mm为主,其中24例采用了Mohs手术方式。外鼻局限缺损38例,选择邻近双叶瓣、风筝瓣、鼻背眉间皮瓣以及鼻唇沟瓣或游离组织修复;多解剖亚区、全层或累及鼻中隔的复合缺损共10例,有8例选择额瓣修复,包括单纯额瓣修复4例、额瓣+钛网支架重建2例、双岛瓦合额瓣修复2例。随访1~10年,所有皮瓣均成活,没有发生坏死的病例,绝大多数患者对术后鼻外形及鼻通气情况满意。1例患者在术后18个月肿瘤复发,2例患者随访期间死于心脑血管疾病,其余患者均无瘤生存。结论有限度地应用Mohs手术原理基本能够满足外鼻恶性肿瘤精准切除的需求,个体化应用邻近组织瓣以及多种形式的额瓣,是达到外鼻修复满意、兼顾手术复杂性的合理选择。

听觉剥夺对大鼠听力的影响及生长相关蛋白-43在大鼠听皮层的可塑性表达研究

目的:研究在药毒性听觉剥夺后大鼠发育的不同时期耳蜗内电刺激后生长相关蛋白-43(GAP-43)在听皮层的表达情况,探索听觉系统损伤后修复的神经可塑性的分子机制。方法:应用听性脑干反应(ABR)检测对照组、药毒性听觉剥夺组(OAD组)、传导性听觉剥夺组大鼠听阈。应用免疫组织化学方法检测对照组、药毒性听觉剥夺组和早期、晚期耳蜗内电刺激组所有标本中GAP-43在大鼠听皮层的阳性神经元表达变化及应用RTPCR方法检测GAP-43mRNA的表达情况。结果:早期耳蜗内电刺激(EIS1)后,GAP-43在大鼠听皮层免疫反应性急剧升高,平均每高倍视野阳性神经元数高达120.00±5.29/HP,与刺激前(OAD4W,93.25±4.30/HP)相比明显升高(EIS1/OAD4W,129.17%±3.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。晚期耳蜗内电刺激(EIS2,102.50±4.02/HP)后GAP-43在大鼠听皮层表达与早期刺激有平行的变化模式,与刺激前(OAD8W,81.67±3.76/HP)相比阳性神经元数亦明显升高(EIS2/OAD8W,123.74%±2.70%),差异有统计学意义(P<0.05)。早、晚期刺激后阳性神经元增加的标准化率分别为45.53%和31.05%,早期刺激比晚期刺激的效果明显,且有与GAP-43蛋白在大鼠听皮层的表达模式平行的mRNA表达。结论:GAP-43是标记神经轴突再生、修复的间接指标,可作为突触可塑性的重要标志。

EphA2/E-cadherin在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的:检测甲状腺乳头状癌组织中EphA2与E-cadherin蛋白的表达及其临床意义,探究两者的相关性。方法:采用免疫组织化学SP/PV方法检测43例甲状腺乳头状癌、11例甲状腺腺瘤、10例癌旁正常甲状腺组织中蛋白EphA2与E-cadherin表达,并观察其与临床病理因素的关系。结果:EphA2蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达(阳性率58.14%)分别高于甲状腺腺瘤(阳性率18.18%)和正常甲状腺组织(阳性率10.00%)的表达(P<0.05),而E-cadherin蛋白在甲状腺乳头状癌(阳性率32.56%)中的表达分别低于甲状腺腺瘤(阳性率81.81%)及正常甲状腺组织(阳性率100.00%)的表达(P<0.05),甲状腺乳头状癌中蛋白EphA2与E-cadherin的表达与患者的淋巴结转移和临床分期相关(P<0.05),而与患者的性别、年龄及肿瘤的大小均无关(P>0.05),且EphA2与E-cadherin蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达呈负相关(r=-0.416,P<0.01)。结论:甲状腺乳头状癌的发生发展与EphA2和E-cadherin蛋白的表达密切相关。