齐口裂腹鱼维氏气单胞菌的耐药性分析

采用k-B法检测分离自齐口裂腹鱼的维氏气单胞菌对20种抗菌药物的耐药表型,用PCR法扩增维氏气单胞菌的四环素类tetA、tetC、tetM,氨基糖苷类aph(3′)-Iia、aac(6′)-Ib、ant(3′′)-Ia、aac(3)-IIa、磺胺类sul1、sul2、sul3共10种耐药基因.结果显示:氟哌酸、氟苯尼考、磺胺异恶唑等11种药物对维氏气单胞菌有较好的抑菌效果.该菌对磺胺类和部分氨基糖苷类敏感,相关耐药基因也未检出,只有四环素类的tetA基因被检出.药敏试验结果和耐药基因检测结果基本一致,这能为维氏气单胞菌的防治和耐药机理的研究提供参考.

小肠结肠炎耶尔森氏菌对黄颡鱼的致病性及毒力基因检测

为研究小肠结肠炎耶尔森氏菌菌株GM2402对黄颡鱼的致病性及毒力基因分布,采用动物回归感染试验方法探讨菌株对黄颡鱼的致病性,利用PCR技术扩增毒力基因,通过药物敏感试验检测该菌株对抗生素的敏感性。在动物回归感染试验中,试验处理组鱼7d内的死亡率达100%,从感染后的试验鱼体中再次分离到小肠结肠炎耶尔森氏菌,证实了该菌株具较强致病性;成功扩增到粘附侵袭位点、耐热肠毒素、粘附素、毒力活化因子和强毒力岛上P4样噬菌体整合酶5种毒力基因,揭示毒力基因与致病性密切相关。菌株GM2402对卡拉霉素、恩诺沙星、磺胺异恶唑等9种药物高度敏感,对氟苯尼考、先锋霉素V中度敏感,而对链霉素、洁霉素等5种药物表现为耐药,这将为鱼类小肠结肠炎耶尔森菌病的有效防治提供参考。

黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌16S rDNA及系统发育分析

从发病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)心脏中分离到1株细菌GM 2402,进行了分离培养、形态学观察、生理生化试验与16S rDNA基因的PCR扩增及序列分析。结果表明,菌株GM 2402为革兰氏阴性杆菌,具动力性,V-P试验、水杨酸、过氧化氢酶、脲酶等阳性,不发酵鼠李糖、乳糖等,硫化氢、枸椽酸盐等阴性。16S rDNA序列长1 417 bp,GenBank的登录号是JX 101598,且与数据库中小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)的相似性高达99.6%,系统发育树显示与小肠结肠炎耶尔森氏菌聚为一个分支。综合菌株的生化特性及分子生物学分析结果,判定菌株GM2402为小肠结肠炎耶尔森氏菌。

复方中药对黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌病的防治

小肠结肠炎耶尔森氏菌广泛分布在环境、食品、动物及人群中，对人、家畜、家禽及水产动物均有致病能力，是重要的“人一畜一鱼”共患病原菌。已有研究表明该菌可感染鱼类并导致其大量死亡。近年来，水产养殖集约化规模进一步扩大，细菌性病害问题日益凸显，目前在防治该类病害过程中抗生素及化学合成药物仍占主导地位，但长期不合理运用药物易引发耐药性及药残超标等问题。

丁鲑鱼维氏气单胞菌的鉴定和生物学特性研究

对引起丁鲑鱼发病的菌株——XN602进行鉴定和生物学特性研究,经形态特征与生理生化鉴定,结果表明:该菌为革兰氏阴性杆菌,其16SrDNA序列与GenBank中多株维氏气单胞菌相似性高达99%,系统发育树显示该菌与维氏气单胞菌聚为一簇。因此,分离菌株XN602在分类学上应属于维氏气单胞菌。

鲫鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌病的诊治

近年来，随着水体富营养化程度加重，部分学者就重金属在鲫鱼养殖中的危害做了相关研究，

胭脂鱼维氏气单胞菌和中间气单胞菌的鉴定及药物敏感性

由发病的胭脂鱼体内分离出两株细菌YZ-1和YZ-2,进行常规的形态学观察、生理生化试验,16SrDNA序列分析和药敏试验。试验结果表明,两株菌均为发酵型,具动力性的革兰氏阴性菌。菌株YZ-1和YZ-2的16SrDNA序列在GenBank数据库中登入号分别为JX441870和JX441871,Blast比对分析发现与GenBank数据库中维氏气单胞菌和中间气单胞菌的不同菌株16SrDNA基因序列同源性最高,相似性达99%;系统发育树显示这两株菌分别与维氏气单胞菌和中间气单胞菌不同菌株聚为一簇,从而判定YZ-1为维氏气单胞菌,YZ-2为中间气单胞菌。药敏试验结果显示,四环素、恩诺沙星、氟苯尼考、庆大霉素对两株菌有较好的抑制效果。为气单胞菌的鉴定及胭脂鱼细菌病防治等提供科学依据。

鱼源维氏气单胞菌的耐药性研究

为检测7株鱼源维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的耐药基因和耐药表型的分布情况,试验采用PCR法检测分离株中氨基糖苷类耐药基因(aac(3)-Ⅱa、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰa和aph(3′)-Ⅱa),磺胺类耐药基因(Sul1、Sul2和Sul3)和四环素类耐药基因(tetA、tetC和tetM),运用Kirby-Bauer纸片扩散法检测7株鱼源维氏气单胞菌分离株对22种常用抗生素的敏感性。结果表明,可检出耐药基因aac(3)-Ⅱa(71.4%)、aac(6′)-Ⅰb(85.7%)、Sul2(85.7%)和tet A(28.5%);未检出ant(3″)-Ⅰa、aph(3′)-Ⅱa、Sul1、Sul3、tetC和tetM基因。7株维氏气单胞菌对磷霉素(100%)、多黏霉素B(100%)、痢特灵(85.7%)、奥复星(71.4%)较敏感;对氨苄西林(100%)、乙酰螺旋霉素(100%)、复方新诺明(85.7%)、磺胺异恶唑(85.7%)、四环素(85.7%)等耐药。这说明耐药基因和耐药表型之间存在一定的相关性。

齐口裂腹鱼同种移植炎症因子AIF-1的克隆及蛋白质结构预测

同种移植炎症因子AIF-1是一种细胞质的钙离子结合蛋白。本研究采用RT-PCR方法从齐口裂腹鱼脾脏中克隆到AIF-1,并运用生物信息学方法预测其蛋白质结构。结果表明:齐口裂腹鱼AIF-1基因包含一个444 bp的完整阅读框,编码一个由147个氨基酸组成的蛋白。AIF-1蛋白预测分子量为16.5 KDa,理论pI为4.43,无信号肽,有一个跨膜区,二级结构以α-螺旋为主,未见β-折叠区。同源建模显示齐口裂腹鱼AIF-1蛋白与已测定的小神经胶质细胞特定蛋白具有非常相似的三级结构。这为深入研究AIF-1分子结构和功能积累了参考资料。

齐口裂腹鱼维氏气单胞菌16SrDNA序列分析

从齐口裂腹鱼(Sclizothorax prenanti)肠道中分离出菌株Spc0408,采用常规形态特征的观察、生理生化试验、结合16S rDNA基因序列分析并构建系统发育树。结果表明,该菌为革兰氏染色呈阴性,短杆形,无芽孢;该菌理化特性为具有动力性,H2S、尿素阴性、不发酵木糖、鼠李糖、山梨醇等;β-半乳糖苷酶、葡磷胨水、枸橼酸盐阳性;其16S rDNA长度为1443bp,GenBank数据库登录号为JF929912,与GenBank中维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)的相似性高达97%;系统发育树显示,菌株Spc0408和多株维氏气单胞菌聚为一簇。综合分离菌的生化特征及分子鉴定结果,判定该菌株是维氏气单胞菌,从而为气单胞菌的分类鉴定提供参考。

中药复方对小肠结肠炎耶尔森菌的抑制作用及对其毒力基因ail的影响

采用二倍稀释-平板法测定7种中药复方对小肠结肠炎耶尔森菌的体外抗菌活性,筛选出抑菌效果较好的复方,应用PCR方法检测复方D作用3个时间段后小肠结肠炎耶尔森菌的黏附侵袭位点基因（ail）,并用生物信息学方法对该基因的序列进行分析.结果表明,复方D（黄连、黄芩、五倍子、炙甘草）的抑菌效果最明显,最小抑菌浓度（MIC）为0.062 5 g/mL,最小杀菌浓度（MBC）为0.125 g/mL;复方B（黄芩、黄连、五倍子、厚朴）抑菌效果次之,MIC值为0.125 g/mL,MBC值为0.25 g/mL;复方F（黄连、黄芩、大黄、地榆）的抑菌作用最不明显,MIC和MBC值均大于1 g/mL.中药复方D作用小肠结肠炎耶尔森菌不同时间后其ail基因发生突变的位点相似,且都集中在10～69碱基区域,该区域相对应的氨基酸序列也相应的发生变化.

江黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌的主要生物学特性研究

从发病江黄颡鱼中分离出菌株YER6022,通过细菌培养、生理生化试、16SrDNA基因扩增等方法对其生物学特性进行研究.结果表明:该菌株为革兰氏阴性球杆菌,具有动力性,不发酵山梨醇,赖氨酸、苯丙氨酸阴性,尿素、鸟氨酸阳性.16SrDNA片段测序为1408bp,与小肠结肠炎耶尔森氏菌相似性达99%,GenBank登录号为JX434637.系统进化树显示菌株YER6022与耶尔森菌属的小肠结肠炎耶尔森菌亲缘关系最近.

鱼源小肠结肠炎耶尔森氏菌的耐药性研究

本试验采用聚合酶链反应(PCR)方法检测鱼源小肠结肠炎耶尔森氏菌的四环素类耐药基因(tetA、tetC、tetM)、磺胺类耐药基因(sul1、sul2、sul3)和氨基糖苷类耐药基因(aph(3')-Ⅲa、aac(6')-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa),并采用κ-B法检测该菌对14种抗生素的耐药表型。结果表明,小肠结肠炎耶尔森氏菌8种耐药基因(tetC、tetM、sul1、sul2,aph(3')-Ⅱa、aac(6')-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa)被检测出,而tetA、sul3基因未被检测出。该菌株对复方新诺明、磺胺异恶唑、红霉素、利福平、洁霉素和头孢噻吩6种抗生素耐药,对氟哌酸、氟苯尼考和头孢曲松等8种抗生素敏感。这为治疗小肠结肠炎耶尔森氏菌引起的鱼病积累了资料。

Toll样受体在鱼类中的研究进展

Toll样受体是鱼类Toll信号传导途径的一个重要组成成员,对激活鱼类机体对入侵病原微生物的先天免疫应答起着十分重要的作用。对鱼类Toll样受体的结构、组织分布、功能及Toll信号传导途径进行了概述,并对鱼类Toll样受体的研究前景进行展望。

枯草芽孢杆菌和粪肠球菌对鲫鱼生长性能、血清学指标和肠道微生物多样性的影响

为探讨在饲料中添加枯草芽孢杆菌和粪肠球菌对鲫鱼生长发育、免疫机能及肠道菌群的影响,将900尾鲫鱼分为3个试验组,分别饲喂基础饲料(S1)、添加枯草芽孢杆菌与粪肠球菌混合饲料(S2)和添加枯草芽孢杆菌饲料(S3),在饲喂47 d后检测3组鲫鱼的生长性能、免疫指标和肠道菌群生物多样性。结果显示,添加枯草芽孢杆菌和粪肠球菌混合饲料组鲫鱼的增质量率、特定生长率和饵料系数均显著高于其他组(P<0.05),该组鲫鱼血清的丙二醛(MDA)含量显著下降且低于其他2组(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)活性较其他2组显著升高(P<0.05);3组鲫鱼肠道菌群中多为厚壁菌门和变形菌门,共有优势菌属均为梭菌属,其中枯草芽孢杆菌和粪肠球菌混合饲料饲养组(S2组)鲫鱼的肠道菌群更具多样性。由此可见,枯草芽孢杆菌和粪肠球菌可有效促进鲫鱼生长,改善鲫鱼肠道菌群结构,增强其免疫机能。

黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌病的诊断与治疗

黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）属于鲇形目、鳞科、黄颡鱼属，又名黄腊丁，是一种重要的淡水经济鱼类，广泛分布在我国各种水域中。黄颡鱼营养丰富、味道鲜美，深受消费者青睐，也引起了科技人员的极大关注。随着养殖集约化程度的加大，由于水体污染严重、化学药品滥用、微生物病原传播等原因使黄颡鱼的疾病频繁发生。2012年6月，本实验室采用常规的细菌鉴定方法结合分子生物学方法，从四川成都某养殖场的发病黄颡鱼体中分离鉴定出了小肠结肠炎耶尔森氏菌，并采用PCR方法扩增该小肠结肠炎耶尔森氏菌菌株的五个毒力基因，验证了该菌株的致病性，最后提出该疾病的治疗措施，从而为黄颡鱼小肠结肠炎耶尔森氏菌病的防治积累资料。

鱼源小肠结肠炎耶尔森菌5种毒力基因的检测和分析

采用煮沸法和细菌基因组DNA试剂盒两种方法制备鱼源小肠结肠炎耶尔森菌DNA模板,运用聚合酶链反应(PCR)方法检测小肠结肠炎耶尔森菌的5种毒力基因(ail、yadA、virF、ystB和HPI-int),并对HPI-int基因进行测序分析。结果表明,小肠结肠炎耶尔森菌ail、virF和HPI-int 3种毒力基因被检测出,而另外两种毒力基因ystB和yadA未被检测到。HPI-int基因长度为722bp,GenBank序列号为JX041513,与该数据库中的小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛基因的相似性达到99%,由此推断该菌株具有较强的致病性。这为深入研究小肠结肠炎耶尔森菌的毒力和危害积累了科学资料。

江团吉氏柠檬酸杆菌的鉴定及药敏试验

从江团中分离得到菌株JT-0603,经形态特征观察、生理生化实验、16S rDNA基因序列分析,得出该菌株为吉氏柠檬酸杆菌。药敏试验表明该菌株对环丙沙星、磺胺异恶唑、痢特灵、氟哌酸、链霉素、氟苯尼考、恩诺沙星等药物高度敏感;对强力霉素、氨苄青霉素低度敏感;对红霉素耐药。

致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌分离鉴定及三重PCR检测方法的建立

为鉴定导致患病鲫鱼肛门红肿、腹部有出血点症状的病原菌,并建立一种快速检测该病原菌的方法。本研究从患病鲫鱼中分离了病原菌,采用形态学、理化特性分析及16S rDNA序列分析方法鉴定菌株。采用PCR扩增法检测该菌毒力基因,琼脂纸片扩散法检测该菌株的耐药性,致病性能验证试验检测其致病性。针对该菌ail基因、inv基因和intB基因设计了3条特异性引物,通过对反应体系和条件的优化,建立了一种检测该菌的三重PCR方法并初步应用于患病鲫鱼样品的检测中。结果显示,从患病鲫鱼心脏组织中分离了一株小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica),命名为fsznc-10。检测到该菌携带ail、ystB、virF、intB毒力基因,该菌对诺氟沙星、庆大霉素等5种抗生素敏感,对鲫鱼具有一定的致病性。三重PCR方法可准确扩增出小肠结肠炎耶尔森氏菌ail、inv和intB三个目的基因,而其他菌株均未扩增出目的基因。该方法检测该菌DNA最低检出量为1.704×10-6 ng/μL,检测患病鱼心脏样品的阳性率约为86.67%,与16S rDNA序列分析方法的检测符合率为100%。本试验建立的三重PCR检测法具有特异性强、敏感性高、操作简单、成本低的优点。这为临床中小肠结肠炎耶尔森氏菌的防控和检测提供参考依据。

我国外汇储备的增加与通货膨胀的关系研究

利用1986-2013年外汇储备和居民物价指数的数据,通过构建向量自回归模型对外汇储备与通货膨胀的关系进行实证研究,并进行格兰杰检验得出结论,即外汇储备的增加与通货膨胀之间互有因果关系,并且是正相关。