匹多莫徳联合维生素A、E对反复呼吸道感染儿童免疫功能及临床疗效的影响

目的:探讨匹多莫徳联合维生素A、E对反复呼吸道感染儿童免疫功能及临床疗效的影响。方法:选择2015年1月—2017年1月收治的反复呼吸道感染患儿100例,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组50例。对照组患儿给予单纯匹多莫德治疗,观察组患儿给予匹多莫德联合维生素A、E治疗,比较两组患儿免疫功能变化及临床疗效。结果:治疗后,观察组外周血CD4^+T、CD8+T细胞水平显著高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组Ig A、Ig G水平显著高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组维生素A、E水平显著高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗总有效率为88.00%,显著高于对照组的68.00%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:匹多莫德联合维生素A、E治疗儿童反复呼吸道感染,能够有效促进患儿免疫功能的提高,疗效显著。

反复呼吸道感染儿童血清维生素A水平测定及边缘型维生素A缺乏的危险因素探讨

目的:检测反复呼吸道感染儿童血清维生素A水平,探讨儿童边缘型维生素A缺乏的危险因素。方法:选择2017年1月至10月在我院就诊的呼吸道感染儿童74例,同期体检的健康儿童68例为研究对象。比较不同临床诊断儿童血清视黄醇水平及边缘型维生素A缺乏的发生率;比较反复呼吸道感染儿童和非反复呼吸道感染儿童血清视黄醇水平及边缘型维生素A缺乏的发生率;并通过Logistic回归分析儿童边缘型维生素A缺乏的危险因素。结果:反复呼吸道感染现症感染儿童、反复呼吸道感染非现症感染儿童、急性呼吸道感染儿童的血清视黄醇水平均低于健康儿童,差异均有统计学意义(P<0.05)。反复呼吸道感染现症感染儿童边缘型维生素A缺乏的发生率高于健康儿童(P<0.05)。反复呼吸道感染儿童血清视黄醇水平低于非反复呼吸道感染儿童;边缘型维生素A缺乏的发生率则高于非反复呼吸道感染儿童(P<0.05)。经Logisitic回归分析,食欲欠佳、农村居住、反复呼吸道感染是儿童边缘型维生素A缺乏发生的独立危险因素。结论:边缘型维生素A缺乏与反复呼吸道感染有一定的相关性;且受机体免疫功能低下、居住环境等因素影响。

肠道病毒71型VP1抗原表位多肽疫苗的实验研究

目的根据贵州省手足口病患儿肠道病毒71型(EV71)分离株的VP1结构蛋白序列研制多肽疫苗并研究其对小鼠的免疫保护作用。方法 2013年3月1日至2015年12月31日从贵州省手足口病患儿的咽拭子样本中分离到17株EV71毒株,其VP1氨基酸序列一致(共297个氨基酸),据此设计并合成多肽片段(除最后一段为27个氨基酸外,其余均为20个氨基酸);用感染EV71的手足口病病愈患儿的阳性血清,通过间接ELISA法筛选出免疫原性较好的多肽片段,制成多肽疫苗;用多肽疫苗免疫ICR健康雌鼠,并设未免疫的对照(Con);将雌鼠的子代小鼠随机分为注射和不注射EV71病毒颗粒的2个亚组;注射病毒2 d后处死所有小鼠,分别取小鼠的骨骼肌、小肠和脑组织,通过RT-PCR检测病毒感染情况,同时HE染色后在显微镜下观察病理改变。结果共设计并合成19段含交叉序列的多肽片段,从中筛选出3段免疫原性较好的(P2:VSRALTHALPAPTGQNTQVS;P4:ALQAAEIGASSNASDESMIE;P8:YANWDIDITGYAQMRRKVEL),制成多肽疫苗并免疫雌鼠,取雌鼠的子代小鼠进行后续试验。RT-PCR结果显示,各感染病毒亚组的骨骼肌、小肠和脑组织中均能检测到EV71病毒,而未感染病毒亚组均检测不到;病理结果显示,未接种多肽疫苗母鼠的子代小鼠在感染EV71病毒后,骨骼肌、小肠和脑组织均出现明显的炎性改变;接种多肽疫苗母鼠的子代小鼠骨骼肌、小肠和脑组织的炎性改变明显减轻,3种多肽疫苗对EV71所致炎症的改善作用无明显差异;接种多肽疫苗母鼠的未注射病毒亚组子代小鼠骨骼肌、小肠和脑组织中均未检测到EV71病毒,也未观察到明显的炎性改变。结论本研究成功制备VP1抗原表位多肽疫苗并在动物实验中证实了其有效性和安全性,可为今后相关疫苗的研制提供方法学借鉴。

遵义地区1岁以下农村留守儿童蛋白质-能量营养不良状况调查及影响因素分析

背景蛋白质-能量营养不仅在认知发育,还在神经系统、生长发育、心血管系统等方面发挥重要作用,并且蛋白质-能量营养对0~1岁儿童体格、智力发育的影响可能是长期的、不可恢复的。因此,研究分析儿童蛋白质-能量营养不良(PEM)的状况及相关影响因素,对预防留守儿童的PEM及相关疾病具有重要意义。但是,遵义市农村留守儿童(≤1岁)的具体蛋白质-能量营养状况与健康问题还没有详细的资料。目的分析遵义地区1岁以下农村留守儿童PEM状况及相关影响因素。方法2017年8月—2019年9月采用分层随机抽样法选取遵义地区1岁以下农村留守儿童进行PEM筛查,采用问卷调查的方法收集儿童性别、月龄、看护人文化程度、吸收情况、饮食结构、父母平均身高、家庭人均年收入等情况,并测量儿童身高、体质量,采用多因素Logistic回归分析探讨1岁以下农村留守儿童PEM的影响因素。结果共发放问卷700份,回收有效问卷650份,问卷有效回收率为92.9%。650例遵义地区1岁以下农村留守儿童PEM患病率为32.5%(211/650)。不同月龄、看护人文化程度、吸收情况、饮食结构、父母平均身高、家庭人均年收入的遵义地区1岁以下农村留守儿童PEM患病率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,月龄[OR=9.562,95%CI(4.737,19.299)]、看护人文化程度[OR=0.482,95%CI(0.330,0.704)]、吸收情况[OR=2.508,95%CI(1.678,3.747)]、饮食结构[OR=0.298,95%CI(0.196,0.453)]、父母平均身高[OR=0.317,95%CI(0.208,0.481)]、家庭人均年收入[OR=0.367,95%CI(0.240,0.561)]是PEM的影响因素(P<0.05)。结论遵义地区1岁以下农村留守儿童PEM患病率较高,月龄、看护人文化程度、吸收情况、饮食结构、父母平均身高、家庭人均年收入是遵义地区1岁以下农村留守儿童PEM的影响因素。

儿童重症监护病房急性重症肺炎常见病原菌分析

目的 分析遵义地区儿童重症肺炎的病原学特点,以期为本地区抗感染用药提供参考.方法 采集2014年1月至2015年12月在我院儿童重症监护病房住院的重症肺炎患儿痰、咽拭子、血清,通过病原菌培养、RT-PCR检测病毒、间接免疫荧光法检测非典型病原体等方法检测并鉴别重症肺炎病原体种类.结果 337例患儿中,病原检测阳性者292例（86.65%）,其中病毒感染最多见,占37.32%,其次为细菌感染占28.42%,肺炎支原体感染占6.50%,混合感染占27.74%;病毒感染以呼吸道合胞病毒B型最为常见,占28.44%,且具有明显的年龄分布差异,3岁以下婴幼儿最为常见,尤其1岁以内婴儿易感性最高（P〈0.05）,各年龄组均以呼吸道合胞病毒B型感染最常见;病毒感染有一定季节性,秋冬季（9月~次年2月）病毒检出率高,夏季检出率较低（χ2=29.28,P=0.001）;细菌感染以大肠埃希菌最为多见,占21.69%,肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌感染以1岁以内婴儿多见,流感嗜血杆菌好发于1~3岁幼儿,肺炎链球菌感染在任何年龄段均可发病.结论 病毒感染是遵义地区儿童重症肺炎的最常见病原,多见于1岁以内幼儿,且秋冬季高发,细菌感染次之,3岁以上儿童重症肺炎以细菌感染多见,3岁以下尤其1岁以下小儿细菌和病毒混和感染明显.

维生素A水平对儿童急性重症肺炎临床转归的影响

目的分析维生素A（vitaminA，VA）水平对儿童急性重症肺炎临床转归的影响，为重症肺炎综合治疗提供新思路。方法选取2014年10月至2015年12月入住我院儿童重症监护病房的357例急性重症肺炎患儿，采用高效液相色谱法检测其血浆VA水平，将检测出的150例重症肺炎伴VA缺乏患儿根据知情告知家长是否同意使用VA干预治疗原则分为治疗组与对照组，治疗组76例采用常规治疗加VA干预，对照组74例只给予常规治疗，对两种治疗方法的疗效进行前瞻性对比研究，观察患儿临床转归情况及VA水平的变化。结果入院时治疗组患儿VA水平为（0．31±0．07）μmol/L，对照组为（0．32±0．05）μmol／L，两组差异无统计学意义（P〉0．05）；VA干预治疗7d后，治疗组VA水平为（0．54±0．14）μmol／L，对照组为（0．34±0．05）μmol／L，治疗组血清VA水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；经过1—2周治疗后，两组临床症状和体征得到改善，对照组患儿平均住院（13．44±0．81）d，治疗组平均住院（10．43±0．97）d，差异有统计学意义（P〈0．05）；对照组治疗总有效率94．59％，治疗组总有效率97．37％，两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论VA缺乏可影响重症肺炎的转归时间，对重症肺炎伴VA缺乏患儿给予VA治疗可作为儿童重症肺炎综合治疗措施之一。

儿童急性下呼吸道感染病毒学特点分析

目的了解黔北地区儿童急性下呼吸道感染病毒学特点，为临床防治及管理提供参考价值。方法随机选择我院2014年1～12月300例诊断为儿童急性下呼吸道感染患儿，采集喉深部痰液，利用多重PCR方法检测12种病毒核酸。结果300例标本中，检出病毒阳性标本134例（占44．67％），其中男175例，女125例。以呼吸道合胞病毒B型（RSVB）阳性检出率最高（37例，27．61％），其次为副流感病毒1型、副流感病毒3型、流感病毒A型、鼻病毒、腺病毒、冠状病毒NL63、呼吸道合胞病毒A型、人偏肺病毒，余3种病毒包括流感病毒B型、副流感病毒2型、冠状病毒OC43此次未被检出。混合感染32例，以RSVB合并其他病毒感染为主。RSVB感染以3岁以内儿童多见，冬春季较多。结论病毒是2014年本地区儿童急性下呼吸道感染的重要病原。RSVB感染居12种常见儿童下呼吸道病毒感染之首，3岁内儿童易患，冬春季多见。

贵州省17例手足口病肠道病毒71型分离株全基因组序列分析

目的 分析我国贵州地区17株肠道病毒71型（Enterovirus 71，EV71）分离株的基因特征及遗传进化情况，探讨本地区EV71病毒的分子流行病学特点。方法 收集2013至2015年贵州省各地区手足口病住院患儿咽拭子样本，提取其病毒核酸，利用逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）分段扩增其全基因组后进行测序，测序结果利用DNAMAN8.0软件进行编辑及拼接，然后将病毒基因组序列分别与基因库中其他EV71基因组序列进行Blastn比对，应用MEGA5.2软件中的Neighbor-Joining法构建系统进化树。结果 本研究成功分离扩增出17株EV71病毒全基因组序列，其基因组全长均为7 405 bp，编码2 193个氨基酸。毒株间存在的12处氨基酸位点差异将17株分离株划分为10种氨基酸序列，不同序列与临床类型尚未表现出规律性和相关性。17株EV71分离株间VP1区、5′非翻译区（ 5′ untranslated region，5′UTR）及3′非翻译区（ 3′ untranslated region，3′UTR）核苷酸同源性均较高，其全基因组与A、B、C基因型及柯萨奇病毒A组16型（Coxsakievirus A 16，CA16）代表株进行同源性比较显示其与EV71 C4a亚型代表株同源性最高，为95.3%～98.1%，与CA16代表株同源性最低。17株分离株基于全基因组、VP1区及5′UTR核苷酸序列构建的遗传进化树显示17株分离株自成一簇，与C4a亚型代表株聚在同一大分支上，不同区域构建的进化树亲缘关系远近存在差异。结论 2013至2015年贵州地区流行的EV71毒株基因型为C4a亚型，与国内其他地区流行的EV71基因型一致，暂未出现抗原转变及新亚型毒株输入，但存在着碱基及氨基酸改变，需动态监测；17株EV71分离株氨基酸序列差异与疾病严重程度尚未表现出相关性。

遵义地区1岁以下农村儿童缺铁性贫血发病率及影响因素

目的分析遵义地区1岁以下农村儿童缺铁性贫血(IDA)的发病情况,探讨其相关影响因素。方法采用队列研究方法,分层抽样选取2017年8月至2018年8月遵义地区1岁以下农村儿童进行IDA筛查,通过问卷调查、血液学检测获得相关资料。采用χ2检验进行单因素分析,采用非条件Logistic回归分析进行多因素分析,探讨婴幼儿IDA的主要影响因素。结果共纳入672例儿童,贫血发生率为37.50%(252/672例),男童发病率为36.19%,女童发病率为39.03%,差异无统计学意义(χ2=0.576,P=0.448)。单因素分析显示,IDA与年龄(χ2=53.546,P<0.001)、出生孕周(χ2=63.423,P<0.001)、饮食结构(χ2=27.920,P<0.001)、孕期是否补铁(χ2=25.036,P<0.001)、喂养方式(χ2=66.274,P<0.001)、家庭年收入(χ2=65.153,P<0.001)相关。多因素非条件Logistic回归分析显示:母乳喂养(OR=0.512,95%CI:0.365~0.718)、6个月~<1岁(OR=5.333,95%CI:3.069~9.266)、早产儿(OR=0.039,95%CI:0.015~0.098)、孕前未服用铁(OR=1.807,95%CI:1.074~3.040)、单一谷物饮食(OR=0.458,95%CI:0.299~0.701)、家庭人均年收入<5 000元(OR=0.047,95%CI:0.029~0.077)为IDA的危险因素。结论遵义地区1岁以下农村儿童IDA发病率较高,母乳喂养、6个月~<1岁龄、早产儿、孕前未服用铁、单一谷物饮食、家庭人均年收入<5 000元为该地区1岁以下农村儿童IDA发病的主要危险因素。

咖啡因对早产鼠高氧肺损伤的影响及其与p38丝裂原活化蛋白激酶信号途径关系的研究

目的探讨咖啡因干预对早产鼠高氧肺损伤的影响及其与p38丝裂原活化蛋白激酶(motigen-activated protein kinase,MAPK)信号途径的关系。方法将60只Wistar早产鼠按随机数字表法分为4组(n=15):空气+生理盐水组(A+N组)、空气+咖啡因组(A+C组)、高氧+生理盐水组(H+N组)、高氧+咖啡因组(H+C组),其中H+N组和H+C组持续暴露于高氧中(氧浓度60%~70%),A+C组和H+C组于早产鼠出生后每日腹腔注射咖啡因29 mg/(kg·d),A+N组和H+N组腹腔注射同等体积的生理盐水。各组分别于第3、7、14天时随机对每组5只早产鼠肺组织取材,光镜下观察肺组织病理改变、辐射状肺泡计数(radiated alveolar count,RAC)、肺组织胶原含量;检测肺湿/干重(wet/drg ratio,W/D)比值;二步法免疫组织化学检测p38MAPK在肺组织中的分布;Western blot检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白含量变化。结果与A+N组、A+C组相比,H+N组和H+C组早产鼠在第3、7、14天肺组织均可见不同程度炎症改变,高氧暴露时间越长,改变越明显,在第14天时可见肺纤维化;咖啡因干预后有一定改善。H+N组和H+C组早产鼠RAC值较A+N组、A+C组显著降低(P<0.05),W/D比值及肺组织胶原含量显著升高(P<0.05),咖啡因干预后有明显改善(P<0.05)。二步免疫组织化学法结果显示H+N组和H+C组早产鼠肺组织中p-p38MAPK阳性细胞数表达增多,分布广泛;咖啡因干预后p-p38MAPK阳性细胞数减少;Western blot结果显示,H+N组和H+C组早产鼠肺组织中p-p38MAPK蛋白含量明显高于A+N组和A+C组(P<0.05),咖啡因干预后p-p38MAPK蛋白含量降低(P<0.05)。结论高氧可通过激活p38MAPK信号途径促进肺纤维化形成;咖啡因通过阻断p38MAPK的表达而减轻高氧暴露下肺组织纤维化,进而起保护作用。

基于磁共振技术对遵义地区1岁以下维生素D缺乏症留守儿童尿液的代谢组学研究

目的运用代谢组学磁共振(NMR)技术探讨遵义地区1岁以下维生素D缺乏症留守儿童尿液代谢产物特征性变化,以期为维生素D缺乏症早期诊断提供新的生物标志物。方法2018年1月至8月通过分层抽样的方法在遵义市下辖凤冈县、播州区、正安县等地区,对1岁以下留守儿童进行血液学检测及尿液采集,选取诊断为维生素D缺乏症的40例儿童为维生素D缺乏组,另选取血液检测正常的40例儿童为健康对照组。对其尿液取样处理,应用SIMCA-P+软件对氢谱图的积分值进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)以区分2组留守儿童尿液代谢物有无差异。采用正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)筛选差异性代谢产物。结果健康对照组血清25羟基维生素D[25-(OH)D]水平[(32.0±3.6)nmol/L]高于维生素D缺乏组[(15.8±2.3)nmol/L],差异有统计学意义(P<0.05)。PCA和PLS-DA分析显示健康对照组与维生素D缺乏组尿液代谢物差异有统计学意义(P<0.05)。OPLS-DA提示R2X=0.365,Q2=0.978,进一步验证差异性代谢产物存在差异。与健康对照组比较,维生素D缺乏组尿液中甲基丙二酸、3-羟基丁酸酯、N-乙酰基糖蛋白信号、谷氨酸、二甲基甘氨酸、2-酮戊二酸、亚牛磺酸、延胡索酸盐水平明显升高,差异均有统计学意义(|r|>0.602,均P<0.05,df=39);而乙基丙二酸、肌酸、胆碱、甘油磷酰胆碱、马尿酸盐水平明显下降,差异均有统计学意义(|r|>0.602,均P<0.05,df=39)。结论遵义地区1岁以下维生素D缺乏留守儿童主要表现为能量代谢、脂类代谢、氨基酸代谢、肠道微生物代谢紊乱,其差异性代谢产物在维生素D缺乏早期诊断及发病机制中具有潜在的应用价值。

遵义市1岁以下维生素A缺乏留守儿童尿液氢核磁共振代谢组学研究

目的探讨氢核磁共振(1H-NMR)技术在维生素A缺乏(VAD)早期筛查中的应用价值。方法2019年1月至6月在遵义地区收集40例确诊VAD<1岁留守儿童为VAD组,另选取40例健康儿童为健康对照组,采集2组儿童尿液,测定1H-NMR波谱。应用代谢组学技术,结合多变量统计分析比较2组代谢产物,筛选出VAD患儿差异性代谢产物。结果健康对照组血清视黄醇水平[(1.35±0.18)μmol/L]与VAD组[(0.56±0.10)μmol/L]比较,差异有统计学意义(t=23.93,P<0.001)。尿液1H-NMR光谱图结果显示:与健康对照组比较,VAD组儿童尿液中甲基丙二酸、2-酮异戊酸酯、N-乙酰基糖蛋白、二甲基甘氨酸、三甲铵乙内酯水平明显升高,差异均有统计学意义(|r|>0.602,均P<0.05);异戊基丙基甘氨酸、2-羟基异丁酸酯、肌酸、磷酸胆碱/甘油磷酸胆碱、马尿酸盐水平明显下降,差异均有统计学意义(|r|>0.602,均P<0.05)。结论VAD患儿与健康儿童比较,尿液代谢产物存在差异,差异代谢产物与肠道微生态平衡、消化系统疾病、呼吸系统疾病、免疫相关疾病及能量代谢、生长发育密切相关,尿液1H-NMR代谢组学分析在VAD早期筛查中具有潜在应用价值。