应用SELDI-TOF-MS技术初步建立结直肠癌分类树模型

目的:分析结直肠癌期患者血清蛋白质组变化,初步建立结直肠癌期分类树模型.方法:将335例血清样本(其中结直肠癌患者169例,健康人166例)随机分为训练组和测试组,将血清样本加至IMAC30-Cu2+蛋白芯片,利用SELDI-TOF-MS得到血清蛋白质谱,利用Biomarker Wizard软件进行蛋白峰值鉴定和聚类.利用Biomarker Pattern以训练组建立由1个差异蛋白组成的结直肠癌期分类树模型,以测试组进行独立样本的双盲验证.另外,应用电化学发光免疫测定法检测测试组血清样本CEA.结果:软件识别了59个质峰,其中由质荷比为5765的蛋白构成的分类树模型可以有效鉴别结直肠癌患者与正常人,灵敏度和特异度分别是98.81%及100.00%,经双盲验证其灵敏度,特异度及阳性预测值分别是97.65%,98.80%及98.81%.CEA的灵敏度及特异度低于SELDI分类树模型(P<0.05).结论:SELDI-TOF-MS检测得到的血清蛋白质组分类树模型可以准确的鉴别结直肠癌患者与正常人,对结直肠癌的筛查有重要的意义.

自噬在乳腺癌中发挥作用的分子机制

自噬在乳腺癌(Breast cancer, BC)中的作用复杂,根据肿瘤的不同阶段,自噬发挥促进或抑制作用,这可能与不同的分子通路有关。miRNAs通过上调或下调细胞自噬,促进或抑制BC的进展,miRNAs还可以作为BC患者诊断和预后判断的生物标志物以及BC的潜在治疗靶点。通过调节Beclin-1蛋白影响自噬的发生进而抑制或促进BC的进展。H19 lncRNA通过不同分子通路在BC进展、增殖、转移和治疗中发挥关键作用。上调雌激素受体β(Estrogen receptor β,ERβ)能够促进BC细胞的自噬,抑制其迁移和侵袭。环状RNA circ-Dnmt1通过p53和AUF1通路抑制BC细胞增殖和存活,而KISS1通过调节自噬影响BC的远处转移。本文综述了自噬在乳腺癌中发挥作用的分子机制,为乳腺癌的防治提供参考。

表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用

结直肠癌是威胁人类健康的常见肿瘤之一,目前缺乏敏感度、特异度高的早期诊断方法。蛋白质组学为结直肠癌许多研究领域拓开了新视野,表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是蛋白质芯片和质谱技术的结合,主要由蛋白质芯片、芯片阅读器和生物信息学3大部分组成,可直接分析患者血清、淋巴液、脑脊液、尿液、细胞分泌液等样品而无需复杂的样品制备,具有快速、简便、易行高通量平行分析等特点,是蛋白质组学的主要技术平台之一,目前已经初步应用于结直肠癌早期诊断、术后随访及标志物鉴定等方面的研究。作者综述了SELDI-TOF-MS的基本原理、技术特点及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用和展望。

SELDI蛋白质芯片平台在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用

表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption ionization-time of flight-mass spectroscopy,SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片平台是蛋白质组学的主要技术平台之一,笔者综述了SELDI蛋白质芯片平台的基本原理及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用和展望。

现代恐怖袭击致冲击伤的病征及防治

从俄克拉荷马城爆炸案、马德里连续轰炸案到2001-09-11世贸中心袭击事件,可以看出国内外恐怖事件是我们现代的不幸产物。近些年来,用于实施恐怖活动的武器包括爆炸性的常规武器、化学武器和生物武器。了解这些武器损伤的机制对救治有重要意义。此外,在此类损伤中,儿童是最大的受害者,因此,在发生大规模伤亡事件时,要求重点考虑对儿童的施救。本文综述了恐怖袭击中冲击伤的临床表现、病理生理机制及救治。

应用SELDI-TOF-MS技术初步建立结直肠癌Ⅰ期分类树模型

目的:分析结直肠癌Ⅰ期患者血清蛋白质组学变化,初步建立结直肠癌Ⅰ期分类树模型。方法:应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱仪(surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)和固相金属螯合(immobilized metal affinity capture,IMAC30-Cu2+)蛋白芯片检测血清样本得到质谱图,应用Biomarker Wizard软件对结直肠散发性中分化腺癌Ⅰ期31例和非癌组35例(其中健康志愿者16例,结直肠良性疾病患者19例)进行蛋白峰值鉴定和聚类。应用Biomarker Pattern软件分析得到分类树模型,在测试模式下行双盲验证。另外,应用电化学发光免疫测定法检测样本癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的表达。结果:软件识别了61个质峰,由质荷比为2 787、3 777、3 816、3 852、5 065、5 828、5 855和4 172等8个蛋白构成的分类树模型可以有效鉴别结直肠癌Ⅰ期与非癌组样本,在学习模式下敏感度、特异度分别是93.55%和91.43%,在测试模式下敏感度、特异度和阳性预测值分别是70.97%、82.86%和78.57%,明显优于CEA的检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SELDI-TOF-MS检测得到的血清蛋白组分类树模型可以准确鉴别结直肠癌Ⅰ期与非癌组,对结直肠癌Ⅰ期的筛查有重要的意义。

原发性冲击伤的研究进展

无论在平时还是战时,冲击伤的发生率均有所增长,掌握冲击伤的发病规律及其救治策略是临床医师需要掌握的基本知识与技能。原发性冲击伤的基本特征是钝挫伤与穿透伤同时发生的多系统复合伤。密闭环境中的爆炸更容易引起原发性冲击伤。将鼓膜破裂作为判断严重原发性冲击伤标准是不准确的。肺部冲击伤出现较早,应该早期实施保护性肺通气。脑部冲击伤的发病较先前的报道有所增加。

SELDI蛋白质芯片平台及其在结直肠癌蛋白质组学中的应用

结直肠癌是威胁人类健康的常见肿瘤之一,目前缺乏敏感度、特异度高的早期诊断方法。蛋白质组学为结直肠癌的许多研究领域开拓了新的视野,表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱(surface enhanced la-ser desorption ionization-time of flight-mass spectroscopy,SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片平台是蛋白质组学的主要技术平台之一,本文综述了SELDI蛋白质芯片平台的基本原理、技术特点及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用和展望。

应用SELDI-TOF-MS技术初步建立结直肠癌区域淋巴转移分类树模型

目的寻找血清中与结直肠癌淋巴结转移相关的特异性生物标志物。方法应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测结直肠癌患者血清的蛋白质谱,利用配套软件进行蛋白质峰值鉴定、聚类并建立分类树模型。70例伴区域淋巴结转移的结直肠癌患者和75例年龄、性别匹配,无区域淋巴结转移的结直肠癌患者作为训练组,通过软件分析得到分类树模型,以35例伴区域淋巴结转移的结直肠癌患者和30例年龄、性别匹配,无区域淋巴结转移的结直肠癌患者作为测试组进行独立样本的双盲验证。结果共识别出46种组间差异蛋白,其中由质荷比(M/Z)为3104、3781、5867、7970、9290五种蛋白构成的分类树模型可以有效鉴别结直肠癌患者伴或不伴区域淋巴结转移,灵敏度和特异度分别为94.3%(66/70)和100.0%(75/75),经双盲验证其灵敏度、特异度、阳性预测值分别为91.4%(32/35)、96.7%(29/30)、97.0%(32/33)。结论所建立的分类树模型可以准确鉴别结直肠癌患者伴或不伴区域淋巴结转移,对结直肠癌的术前筛查有重要价值。

SELDI-TOF-MS联合蛋白质组学实验数据库对结直肠癌血清标志物的鉴定

目的:探讨表面增强激光解析离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)联合蛋白质组学实验数据库方法研究结直肠癌患者血清标志物的可行性.方法:应用SELDI-TOF-MS对169例结直肠癌患者与83例正常人血清进行了蛋白质谱检测,通过Biomarker WizardTM与Biomarker PatternsTM软件分析发现差异蛋白,建立结直肠癌诊断模型;用蛋白质组学实验数据库检索鉴定出有意义的差异蛋白,并用ELISA法对结直肠癌患者及正常人血清样本中差异蛋白表达进行验证.结果:发现34种差异蛋白,以质荷比(m/z)为2873,3163,6121,7778的4种差异蛋白组成的分类树诊断模型,在学习模式下其诊断结直肠癌的灵敏度为91.57%,特异度为90.53%;在测试模式下分别为82.25%,80.72%.其中m/z为7778的蛋白峰强度在结直肠癌患者血清中明显高于正常人(P<0.01),数据库检索结果提示该蛋白为血小板因子4(PF4).ELISA法测定结直肠癌患者血清PF4水平显著高于正常人(P<0.01),其灵敏度及特异度分别为61.1%,76.9%.结论:SELDI-TOF-MS联合蛋白质组学实验数据库的方法简便可行,可为蛋白芯片研究提供新思路;PF4(m/z=7778)在结直肠癌患者血清中明显升高,是结直肠癌患者新的血清学标志物.

血清蛋白质指纹谱对结直肠癌根治术后复发转移的诊断价值

目的应用血清蛋白质指纹谱筛选与结直肠癌根治术后复发转移相关的特异性蛋白标志物。方法收集结直肠癌根治术后经至少2年随访、明确有复发转移的141例患者手术前后的血清标本,以及无复发转移的109例患者手术前后的血清标本,应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测所有患者的血清蛋白质指纹谱,并采用化学发光法测定血清CEA含量。筛选出与术后复发转移相关的血清标志蛋白,应用ROC曲线评价其对结直肠癌根治术后复发转移的诊断效能并与CEA进行比较。结果分析显示,在根治术后出现复发转移的结直肠癌患者中,M/Z为7763的血清蛋白不仅在术前表达增高,在明确有复发转移时仍呈显著高表达。该蛋白预测复发转移的灵敏度为92.0%,特异度为83.9%,约登指数指数为0.759,而CEA预测复发转移的灵敏度为52.0%,特异度为82.3%,Youden指数0.343。结论M/Z为7763的血清蛋白可能是结直肠癌根治术后复发转移的特异性标志蛋白,有望用于术后复发转移的监测。

抑制iASPP基因对大肠癌细胞凋亡作用的实验研究

目的通过构建针对p53凋亡抑制蛋白(inhibitory member of the apoptosistimulating protein of p53,i ASPP)的RNAi质粒,研究在体内外抑制i ASPP基因表达后对大肠癌细胞HT-29凋亡的影响。方法构建i ASPP的腺病毒RNAi质粒p Ad-i ASPP-RNAi,体外转染HT-29细胞,同时建立HT-29的裸鼠移植瘤模型;采用RT-PCR和Western blotting检测转染后瘤细胞i ASPP基因在mRNA和蛋白质水平的变化;采用流式细胞仪检测转染前后瘤细胞凋亡的变化。结果转染i ASPP RNAi后,与阴性对照组、空载病毒对照组相比,HT-29细胞的i ASPP mRNA及蛋白表达量均降低;i ASPP-RNAi组HT-29细胞的凋亡率、坏死率与阴性对照组及空白病毒对照组相比显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。裸鼠移植瘤细胞在病毒转染后,细胞体积增大,核染色质浓集,出现凋亡;移植瘤细胞的凋亡率、坏死率与阴性对照组、空载病毒对照组相比显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在体内外抑制i ASPP基因的表达能够促进大肠癌细胞HT-29的凋亡,i ASPP有可能成为大肠癌分子免疫治疗的靶标。

WCX磁珠联合MALDI-TOF-MS技术在结直肠癌诊断中的应用

目的:比较结直肠癌与正常人血清蛋白质谱的变化,筛选特异性蛋白标志物,建立结直肠癌诊断分类树模型.方法:收集血清样本133例(其中结直肠癌67例,正常人66例),随机分为建模组和验证组.运用弱阳离子纳米磁珠(magnetic bead-weak cation exchange,MB-WCX)联合基质辅助激光解吸离子飞行质谱(matrix-assistedlaser desorption/ionization time-of-flight massspectrometry,MALDI-TOF-MS),建立结直肠癌与正常人血清蛋白质谱.用Flex Analysis2.4软件收集数据,应用ClinproTools2.2软件对建模组34例结直肠癌和33例正常人血清差异蛋白质谱进行定量分析,应用Genetic Algorithm算法建立结直肠癌诊断模型,应用所获取的诊断模型对验证组样本(33例结直肠癌和33例正常人)进行分类诊断,以评价诊断模型的诊断价值.结果:通过比较分析结直肠癌与正常人血清蛋白质谱,发现共有33个差异蛋白峰(P<0.05),其中在结直肠癌中表达上调25个,表达下调8个.利用其中5个差异峰(Mr分别为759,3316,4645,4248,2645Dr)建立诊断模型,获得了94.12%(32/34)敏感性和96.97%(32/33)的特异性,经独立样本双盲验证,其灵敏度为93.94%(31/33),特异度为96.97%(32/33).结论:基于磁珠分离和MALDI-TOF-MS技术能直接检测出结直肠癌患者血清差异表达蛋白,建立的诊断模型具有较高的敏感性和特异性,对提高结直肠癌的诊断具有一定的临床意义.

射频消融技术在肿瘤靶向治疗中的近期应用

射频消融（radiofrequency ablation,RFA）技术原理是利用射频能量贯序使肿瘤内部蛋白凝固、变性坏死,最终达到肿瘤细胞灭活的目的.RFA技术于1995年被意大利的Rossi率先应用于临床,在国内、外的临床实践中得到认可,成为当今最新的肝脏肿瘤靶向治疗方法之一.国内外文献报道,RFA治疗小肝癌在肿瘤术后生存率、术后并发症、术后转移灶控制等方面已取得了良好临床效果,可以与外科手术相媲美[1,2].

爆震伤的物理学基础及损伤机制

强烈的爆炸可以造成多种类型的损伤,尤其是爆震压就可以造成十分复杂的组织损伤。充分了解爆震伤发生的物理原理和发生机制将有助于院外急救人员、急诊医师和外科医师等相关的医护人员对其进行有效的分类及合理积极地救治,故对爆震伤发生的物理学原理和损伤层级等相关内容进行综述。

应用液体蛋白芯片—飞行时间质谱系统研究乳腺癌血清差异蛋白表达

目的分析乳腺癌与健康人血清蛋白质谱差异,筛选特异性蛋白标志物,建立乳腺癌诊断预测模型,评价其诊断价值。方法将58例乳腺癌和57例健康女性的血清,随机分为建模组和验证组,应用弱阳离子纳米磁珠(MB-WCX)结合基质辅助激光解吸离子飞行质谱(MALDI-TOF-MS)技术建立血清蛋白质谱,选择遗传算法建立乳腺癌诊断预测模型,利用诊断模型对验证组进行盲筛验证。结果通过蛋白质谱,筛选出29个显著差异蛋白质峰(P<0.05)。其中乳腺癌中表达上调2个,表达下调27个,利用其中8个差异峰(质荷比分别为698.3、797.37、1449.56、1 466.65、1 520.74、1 584.55、2 379.26、2 739.69)建立诊断模型,获得了96.55%(28/29)的敏感性和96.42%(27/28)的特异性,经独立样本双盲验证,得到灵敏度为93.10%(27/29),特异度为96.55%(28/29)。结论应用弱阳离子纳米磁珠联合MALDI-TOF-MS技术可筛选出血清蛋白质谱中的差异蛋白质,据此建立的诊断模型具有较高的敏感性和特异性,对于乳腺癌的辅助诊断有一定的临床意义。

肝硬化融合状纤维化影像学表现及其病因初探

目的:探讨肝硬化患者肝内融合状纤维化(CHF)的影像表现,并初步分析其发病原因。方法:回顾性分析2014-2021年在本院经病理确诊的6例CHF患者的MRI和CT资料,分析病灶的影像学征象,主要包括位置、密度/信号、形态、强化程度以及动态变化,并初步分析致病原因。结果:6例均行MRI扫描,其中4例病灶位于肝脏右前叶、方叶及左叶外侧段,1例以肝门为中心累及肝左叶和肝右叶,1例位于肝右后叶和左叶外侧段;病灶均呈片状稍长T_(1)、稍长T_(2)信号,DWI上较周围肝实质的信号稍高;动态增强扫描动脉期病灶无明显强化,门静脉期呈轻度强化,延迟期病灶进一步强化,延迟5 min后呈中度均匀强化,局部肝脏包膜呈不同程度局限性凹陷。3例行CT扫描,显示病灶呈大片状低密度区,病灶位置、形态、动态增强表现与MRI表现基本一致。4例病理确诊自身免疫性肝炎(AIH),1例长期服用不明中药史,1例患者致病原因不明。结论:CHF具有相对特征性的CT和MRI表现,AIH是否为国内中老年女性最常见致病因素值得进一步研究。

ASPP蛋白家族成员在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的研究p53凋亡刺激蛋白(apoptosis-stimulating protein of p53, ASPP)家族成员在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法和免疫荧光染色方法检测115例CRC组织中ASPP蛋白家族成员(ASPP1、ASPP2、iASPP)的表达,并应用统计学方法检验ASPP的表达与CRC临床病理特征之间的关系。结果 ASPP1在115例CRC组织中均无表达,ASPP2的表达率为91.3%(105/115),iASPP的表达率为22.6%(26/115)。ASPP2的表达在≥50岁与<50岁组患者间差异具有统计学意义(P<0.01);0+Ⅰ期CRC中的表达与Ⅲ期相比,差异具有统计学意义(P<0.05);浸润深度上,Tis+T1组与T3组相比,差异具有统计学意义(P<0.01);淋巴结转移分组,N0与N2组间差异具有统计学意义(P<0.01)。iASPP在淋巴结转移分组N0组与N1组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。ASPP2和iASPP的表达与CRC的其他临床病理特征均无相关性。结论 ASPP家族成员在CRC组织中的表达存在差异;ASPP2可用于判断CRC患者的预后。

浅谈紫砂壶的起源、作用及鉴定

"供春壶"以外形似银杏树瘿状而得名,造型古朴精工、温雅天然,负有盛名。壶身作扁球形,泥质成素色,凹凸不平,纹理缭绕,寓象物于未识之中,大有返璞归真的意境。

天象寰宇意味长——浅析紫砂壶“天象”的美感

宜兴紫砂是我国优秀的工艺美术陶瓷．有着悠久的历史和很高的艺术成就。古人云：“工欲善其事，必先利其器”。而宜兴紫砂壶便是举世公认的最佳茗饮器具。同时，紫砂壶集实用、艺术和人文于一体，又在长期的发展变化中，逐渐融入书画、雕刻、金石等相关装饰艺术元素，可谓内蕴丰富。令人钟爱有加。