柔嫩艾美耳球虫子孢子感染对CEK细胞免疫因子表达及抗氧化能力的影响

为了探究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)子孢子感染对鸡胚肾(CEK)细胞免疫反应及抗氧化程度的影响,试验在成功构建E.tenella感染CEK细胞模型的基础上,将CEK细胞分为空白组和感染组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR方法分别检测子孢子感染后第3,9,12,24小时时细胞上清液中与E.tenella感染相关的4种免疫因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度及其在CEK细胞中mRNA相对表达量,同时检测细胞上清液中4种氧化指标过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮(NO)和活性氧(ROS)浓度。结果表明:子孢子感染后第3,9小时时,感染组IL-6、IL-8及IL-1βmRNA相对表达量及其浓度均极显著高于空白组(P<0.01),且随着感染时间的延长呈下降趋势;感染后第12,24小时时,感染组TNF-αmRNA相对表达量和其浓度均极显著高于空白组(P<0.01),且在感染子孢子后呈上升趋势。此外,感染组CAT和SOD活性在子孢子感染后第3,9,12小时时极显著低于空白组(P<0.01),并呈下降趋势;在感染后第3,9小时时,感染组NO和ROS浓度显著或极显著高于空白组(P<0.05或P<0.01),这些氧化指标的变化主要发生在感染后的9 h或12 h内。说明E.tenella的感染会显著影响CEK细胞的氧化动态平衡与免疫细胞因子的表达水平。