高效液相色谱加校正因子主成分对照法测定注射用缩宫素中有关物质的含量

目的:测定缩宫素原料药中7个杂质的有关物质含量并对其限度进行探讨。方法:采用高效液相色谱加校正因子的主成分自身对照法进行测定。采用Waters Xbridge C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.1 mol·L^(-1)磷酸盐缓冲液(pH 5.4)-乙腈(90∶10)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1.5 mL·min^(-1),柱温32℃,检测波长220 nm,进样量100μL。绘制缩宫素和杂质Ac-缩宫素、[Glu4]缩宫素、[+Gly10]缩宫素、缩宫素[-NH2]、[trisulfide]缩宫素、[cis-dimer]缩宫素和[trans-dimer]缩宫素的线性方程,以斜率计算7个杂质相对于缩宫素的校正因子,测定3批缩宫素原料药中各杂质含量,并与杂质对照品外标法测得的结果进行比较。结果:7个缩宫素杂质的定量限在2.75~5.66 ng,检测限在1.38~2.83 ng。各杂质质量浓度在0.03~3.40μg·mL^(-1)范围内,与相应的峰面积均呈良好线性(r>0.999)。相对于缩宫素,Ac-缩宫素、[Glu4]缩宫素和缩宫素[-NH2]的校正因子为1.1,[+Gly10]缩宫素的校正因子为1.2,[trisulfide]缩宫素的校正因子为0.9,[cis-dimer]缩宫素和[trans-dimer]缩宫素的校正因子为1.3。采用加校正因子的主成分自身对照法,测得3批缩宫素原料药中杂质Ac-缩宫素的含量分别为0.96%、0.93%和1.01%;杂质[Glu4]缩宫素的含量分别为0.07%、0.06%和0.08%;杂质[+Gly10]缩宫素的含量分别为0.07%、0.04%和0.04%;杂质缩宫素[-NH2]的含量分别为0.09%、0.05%和0.07%;杂质[trans-dimer]缩宫素的含量分别为0.27%、0.18%和0.22%。其他单个最大杂质含量为0.18%~0.19%,总杂质含量为1.88%~2.06%。比较采用加校正因子的主成分自身对照法和外标法测得的结果,2种方法的测定结果无统计学差异(p>0.05)。结论:本方法操作简单,可重复性高,能准确、有效地测定缩宫素中有关物质的含量。

右旋糖酐铁注射液给药后注射部位未吸收铁含量检查方法改进研究

目的：采用微波消解法替代湿消解法对中国药典中右旋糖酐铁注射液品种的注射部位未吸收铁含量检查方法进行改进研究。方法：参照中国药典方法,分别采用非自身对照加湿消解法、自身对照加湿消解法和自身对照加微波消解法来考察未吸收铁含量。家兔右后腿注射0.2 mL·kg-1右旋糖酐铁注射液,7 d后处死,取出呈色肌肉,分别采用湿消解法或微波消解法对肌肉进行消化,消化完全的样品溶液采用紫外分光光度法测定其530 nm的吸收度,计算未吸收铁含量。结果：对微波消解法进行加样回收率测定,标准溶液和右旋糖酐铁注射液的平均加样回收率均在91.1%~113.1%之间,RSD在2.6%~14.4%之间。采用微波消解法检查右旋糖酐铁注射液给药后注射部位的未吸收铁含量,样品消化完全,空白对照OD值与湿消解法相比下降（OD值由0.2022下降为0.0413）并且稳定（SD值由0.1811下降为0.0253）,未吸收铁含量结果批内变异减小（含量由30.2%下降为20.8%,p〈0.001）,结果更加可靠和可重复（SD值由20.2%下降为11.5%）,并且提高实验效率约80%,节省硫酸、硝酸用量达95%。结论：采用微波消解法替代湿消解法检查右旋糖酐铁注射液给药后注射部位的未吸收铁含量简便易行,准确性和可重复性好,可提高实验效率,并保护实验人员安全和环境安全。

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中靛玉红的含量及其药动学

目的建立灵敏、快速的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中靛玉红的浓度,并研究其在大鼠体内的药动学特点。方法血浆经乙腈沉淀蛋白后取上清进样分析,采用Agilent C_(18)柱,以乙腈:水(70:30,V/V)为流动相,ESI源,负离子检测,检测离子对为m/z 260.9→156.9(靛玉红)和m/z 253.0→225.0(大黄酚,内标)。大鼠禁食过夜后按20 mg·kg^(-1)剂量靛玉红混悬液灌胃,给药前及给药后0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、10、12、24和32 h采血。LC-MS/MS法测定血浆药物浓度,绘制血药浓度-时间曲线图,统计矩法计算主要药动学参数。结果靛玉红线性范围为0.1～10μg·L^(-1),定量下限为0.1μg·L-1。低、中、高浓度质控样品的批内和批间精密度均小于8%,低、中、高浓度质控样品和内标提取回收率在93.6%～96.3%,室温稳定性、冻融稳定性及30 d稳定性考察结果均符合要求。药动学参数为t_(max)(4.2±1.0)h,p)(max)(3.7±0.7)μg·L^(-1),t_(1/2z)(4.7±2.5)h,AUC_(0-t)(22.8±8.7)μg·h·L^(-1)。结论所建立的LC-MS/MS法简便快捷、重复性好、灵敏度高,适合于靛玉红的体内药动学研究。