腹腔镜胆囊切除术+T管引流术治疗Mirizzi综合征的疗效评价

目的:探究腹腔镜胆囊切除术(LC)+T管引流术治疗Mirizzi综合征患者的疗效。方法:选取Mirizzi综合征患者74例,根据治疗方案不同分组,各37例。对照组给予开腹胆囊切除术+T管引流术治疗,观察组给予LC+T管引流术治疗。对比两组围术期临床指标、并发症、患者满意度及术前、术后3个月生存质量测定量表(WHOQOL-100)评分。结果:所有患者均顺利完成手术,观察组37例患者中,4例患者由于胆囊三角处存在较为严重的粘连而中转开腹手术;两组并发症发生率无统计学差异(P>0.05);术后3个月观察组WHOQOL-100评分高于对照组;观察组患者满意度高于对照组;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:LC+T管引流术治疗Ⅱ型、Ⅲ型Mirizzi综合征患者安全有效,可减轻创伤,促进术后恢复,提高患者生活质量及满意度。

二十二碳六烯酸对人肝癌细胞HepG2的作用与调控β-catenin及C-myc表达的关系

目的:探讨不同浓度的二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)对人肝癌细胞HepG2生长增殖抑制及促进凋亡的作用及其机制,为其应用于肝癌的药物预防和治疗提供实验及理论依据.方法:以DHA浓度0μg/mL为阴性对照,设置浓度为15、30、45、60、75μg/mL的实验组.采用CCK-8和流式细胞术检测不同浓度DHA对HepG2细胞生长的相对抑制率及凋亡情况,并运用荧光定量PCR及Western blot分别从基因和蛋白质水平分析不同浓度DHA作用前后β-连环蛋白(β-catenin)及C-myc表达量的变化.结果:CCK-8实验表明DHA在体外能抑制H e p G2细胞生长,在D H A作用浓度为0-45μg/mL,作用时间24 h时,实验组与对照组细胞吸光度(A)值差异有显著的统计学意义(P<0.01),实验组内两两比较差异有统计学意义(P<0.01),细胞生长抑制率最高达90.7%.继续增加药物浓度或作用时间,差异无统计学意义.流式细胞术发现DHA可促进HepG2细胞凋亡,实验组与对照组细胞凋亡率差异有显著的统计学意义(P<0.01),实验组内两两比较差异有统计学意义(P<0.01).荧光定量PCR显示DHA可下调HepG2细胞中C-myc基因表达水平,实验组与对照组C-myc基因相对表达量的差异有显著的统计学意义(P<0.01),实验组内两两比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组与对照组及各实验者组之间β-catenin基因的相对表达量差异无统计学意义.Western blot显示DHA可降低HepG2细胞β-catenin、C-myc蛋白质的表达量.结论:DHA对人肝癌HepG2细胞有明显的生长增殖抑制及促进凋亡的作用,与其降低β-catenin蛋白质水平进而下调C-myc基因表达水平有关.

光动力疗法促进胆管癌细胞QBC939的凋亡

目的:研究光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对人胆管癌细胞QBC939凋亡的影响.方法:体外培养人胆管癌QBC939细胞株,用不同浓度血卟啉衍生物(hematoporphyrin derivative,HPD)处理,并用半导体激光治疗仪不同强度光照后,采用CCK8法检测PDT对QBC939细胞的相对抑制率;应用流式细胞仪检测PDT作用前后QBC939细胞的凋亡率;RT-PCR检测PDT作用前后QBC939细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)基因表达情况;SP免疫细胞化学法测定PDT作用前后QBC939细胞核中PCNA的表达情况.结果:CCK8检测结果显示PDT在体外能够抑制胆管癌QBC939细胞生长,8mg/LHPD经5J/cm2光照时实验组吸光度(A)值(0.403±0.027)与对照组A值(2.028±0.013)有统计学差异(P<0.05),细胞生长抑制率达80%,继续增加药物浓度或光照强度,细胞生长抑制率升高不明显,差异无统计学意义;流式细胞技术检测显示PDT能够明显促进胆管癌QBC939细胞的早期凋亡(74.6%±1.5%);RT-PCR检测显示PDT能够明显抑制胆管癌QBC939细胞中PCNA基因表达(0.68±0.06);SP免疫细胞化学结果显示PDT能够明显抑制胆管癌QBC939细胞核中PCNA蛋白表达(4.5%±1.4%).结论:PDT能够抑制胆管癌QBC939细胞生长,促进QBC939细胞的早期凋亡.PDT对QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过抑制QBC939细胞的PCNA基因和蛋白水平的表达,从而促进其早期凋亡实现的.

Cox-2抑制剂NS-398对人胆管癌QBC939细胞增殖侵袭的影响

目的观察选择性Cox-2抑制剂NS-398对人胆管癌细胞株QBC939增殖、侵袭的影响。方法体外培养人胆管癌QBC939细胞,加入不同浓度的NS-398培养后,采用MTT比色法观察不同浓度NS-398作用不同时间对QBC939细胞的增殖抑制情况;采用Transwell小室法检测不同浓度NS-398作用后QBC939细胞的侵袭能力。结果 NS-398对QBC939细胞的增殖有抑制作用,并呈时间及浓度依赖性(P均<0.01),最大抑制浓度为100μmol/L。加入NS-398培养36 h后,随着药物浓度的增加,QBC939细胞体外侵袭能力明显减弱(P<0.01)。结论NS-398可抑制人胆管癌QBC939细胞的增殖,并减弱其体外侵袭能力。

选择性环氧合酶-2抑制剂NS-398对胆管癌细胞株QBC939的抑制作用

NS-398是一种选择性环氧合酶．2（COX-2）的抑制剂，其抗肿瘤作用与其抑制COX-2的活性，减少前列腺素生成有关。本研究旨在探讨NS-398对人胆管癌细胞QBC939的作用机制。一。

超声引导下射频消融治疗甲状腺实性结节的疗效

目的探讨超声引导下射频消融(RFA)治疗甲状腺实性结节的疗效。方法回顾性分析于新乡市中心医院2016年12月至2018年12月接受超声引导下RFA治疗的43例甲状腺实性结节(65枚结节)患者的临床资料。记录所有患者术后3个月及6个月的临床疗效,术前、术后1个月的甲状腺功能[血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、血清游离甲状腺素(FT4)、血清促甲状腺激素(TSH)]变化、超声影像及并发症发生情况。结果治疗3个月后,其治愈率为4.7%(2/43),显效率为37.2%(16/43),好转率为41.9%(18/43),而治疗6个月后,其治愈率为20.9%(9/43),显效率为51.2%(22/43),好转率为27.9%(12/43);术后1个月,所有患者的FT3、FT4、TSH水平与术前比较差异未见统计学意义(P>0.05);术后2 d经过超声检查,发现其65枚结节均呈现低回声,其中14枚结节回声欠均,具有点状强回声,形态规整边界清晰,结节内部无明显血流信号;术后患者仅少数出现声音嘶哑及颈部神经放射性疼痛,且无需干预即可恢复。结论超声引导下RFA可显著改善甲状腺实性结节患者的甲状腺功能,具有较为理想的治疗效果,且术后并发症发生率低,安全性高。

慢病毒介导的FLOT1基因表达对胃癌细胞侵袭凋亡的机制研究

目的探讨抑制FLOT1基因表达对胃癌细胞侵袭、凋亡的影响及机制。方法将设计合成的FLOT1siRNA慢病毒载体(si-FLOT1组)转染人胃癌MKN-45细胞,同时转染阴性对照慢病毒载体(阴性组),并设置空白组。Western blotting检测转染48h后细胞FLOT1、E-cadherin、α-SMA、cleaved caspase 3、Bcl-2和Bax蛋白表达。CCK-8法检测转染24、48、72和96h的细胞活力。Transwell小室、流式细胞术及DCFH-DA法分别检测转染48h的细胞侵袭能力、凋亡率及活性氧(ROS)含量。结果FLOT1siRNA慢病毒载体可明显抑制MKN-45细胞FLOT1表达,与空白组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。si-FLOT1组与空白组比较,细胞活力降低,细胞侵袭能力降低,细胞凋亡率升高,E-cadherin、cleaved caspase 3和Bax蛋白表达升高,α-SMA和Bcl-2蛋白表达降低,ROS含量升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论下调FLOT1基因表达可通过抑制EMT降低胃癌细胞侵袭能力,通过调控凋亡相关蛋白表达及提高细胞ROS含量促进细胞凋亡。

血卟啉光动力对人胆管癌细胞转移潜能影响实验研究

目的:探讨血卟啉衍生物介导的光动力疗法(hematoporphyrin derivative,HPD-PDT)对人胆管癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:体外培养人胆管癌细胞系QBC939,经系列浓度的HPD处理,并应用半导体激光治疗仪给予不同强度的光照,CCK-8试剂盒检测HPD-PDT对人胆管癌细胞增殖的影响;Transwell小室(Matrigel侵袭实验)检测HPD-PDT对人胆管癌细胞体外侵袭能力的影响;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中分泌的VEGF-C浓度变化;RT-PCR检测细胞中VEGF-C mRNA的表达变化;SP免疫组化染色观察细胞中VEGF-C蛋白的表达变化。结果:CCK-8检测结果显示,HPD-PDT在体外能够抑制QBC939细胞生长,当HPD质量浓度4μg/mL和光照剂量5J/cm2时,实验组A450值为1.541 7±0.098 3,明显低于空白对照组的2.027 8±0.198 6,P<0.01;细胞生长抑制率达到23.97%,且随着激光能量密度及光敏剂浓度的增加,其抑制作用也越明显。体外侵袭实验结果显示,实验组穿过Matrigel胶的细胞数为13.33±1.155,明显少于空白对照组的31.67±2.517,P<0.01;ELISA结果显示,实验组上清液中分泌的VEGF-C浓度为(1 558.241 7±97.114 3)ng/L,低于空白对照组的(1 716.375 0±45.047 2)ng/L,P<0.05;RT-PCR结果显示,实验组VEGF-C mRNA/hGAPDH的比值为0.7009±0.1872,明显低于空白对照组的1.542 5±0.107 8,P<0.01;SP免疫组化染色结果显示,实验组VEGF-C蛋白表达阳性的细胞百分率为24.52%±2.22%,明显低于空白对照组的56.94%±3.38%,P<0.01。结论:HPD-PDT能够抑制人胆管癌细胞QBC939的增殖活性及体外侵袭能力,并有可能通过下调VEGF-C因子的表达进一步抑制胆管癌的生长和转移。

多种肿瘤标志物联合检测对肝门胆管癌诊断的意义

目的:探讨联合检测肿瘤标志物CA50,CA125,CA242,CA19-9及CEA对肝门胆管癌诊断的意义。方法:选择近2年间住院且术后病理证实为肝门胆管癌患者90例作为观察组,同期胆道良性病变患者91例作为对照组,采用全自动电化学发光分析仪测定两组患者术前血清中CA50,CA125,CA242,CA19-9及CEA的水平。分别计算两组血清中5种肿瘤标志物的敏感性、特异性及准确性。结果:观察组血清CA50,CA242,CA19-9及CEA的水平明显高于对照组(均P<0.01),而观察组血清CA125水平与对照组血清CA125水平比较无统计学差异(P>0.05)。血清CAl9-9在肝门胆管癌中阳性率最高(86.67%),次为CA242(63.33%)及CA50(60%);两组患者血清中5种标志物的阳性率比较,除CA125外,各相应组间差异具有统计学意义(P<0.05)。对于肝门胆管癌的诊断,血清CA19-9灵敏度最好(93.98%),而CEA的特异度最好(94.60%)。结论:联合检测CA50,CA242,CA19-9和CEA有助于肝门胆管癌与胆道良性疾病鉴别。

光动力疗法对人胆管癌细胞QBC939凋亡的影响

目的研究血卟啉衍生物（hematoporphyrin derivative，HPD）介导的光动力作用（pho－todynamic therapy，PDT）对人胆管癌细胞QBC939凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养人胆管癌QBC939细胞株，用不同浓度HPD处理，并用半导体激光治疗仪不同强度光照后，应用CCK8法检测PDT对QBC939细胞生长的相对抑制率。采用流式细胞术检测PDT作用前后QBC939细胞凋亡情况。应用RT-PCR检测PDT作用前后QBC939细胞中血管内皮细胞生长因子-C（VEGF-C）、环氧合酶-2（COX-2）基因表达情况。用SP免疫细胞化学法测定PDT作用前后QBC939细胞质中VEGF-C、COX-2两种蛋白表达情况。用ELISA法测定PDT作用前后QBC939细胞上清中VEGF-C、COX-2两种蛋白分泌情况。结果HPD-PDT在体外能够抑制QBC939细胞生长，HPD10mg／L经5J／cm2光照强度时，实验组与空白组A值差异有统计学意义（P〈0．05），细胞生长抑制率达到70％。继续增加药物浓度或光照剂量，差异无统计学意义，细胞存活率降低不明显。流式细胞术显示HPD-PDT明显促进QBC939细胞早期凋亡。RT_PCR显示HPD-PDT能明显抑制QBC939细胞中VEGF-C、COX-2基因表达。SP免疫细胞化学法显示HPD-PDT能抑制QBC939细胞质中VEGF-C、COX-2两种蛋白表达。ELISA法显示HPD-PDT能抑制QBC939细胞VEGF-C、COX-2两种蛋白细胞外分泌。结论HPD-PDT能抑制胆管癌QBC939细胞生长，促进胆管癌细胞早期凋亡。HPD-PDT对胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过促进早期凋亡实现的，而VEGF-C、COX-2从基因到蛋白水平低表达可能是促进胆管癌QBC939细胞早期凋亡的途径。