胶质母细胞瘤FGFR3-TACC3融合基因介导丙酮酸激酶M2入核促进DNA损伤修复基础研究

目的探讨胶质母细胞瘤FGFR3-TACC3(F3-T3)融合基因介导丙酮酸激酶M2(PKM2)入核激活DNA损伤修复致替莫唑胺(TMZ)耐药的作用机制。方法慢病毒转染构建稳定表达F3-T3融合基因和空载体的胶质母细胞瘤细胞系U87MG和U251MG,构建稳定表达F3-T3融合基因的胶质母细胞瘤裸鼠模型,小动物活体成像系统观察荷瘤鼠肿瘤荧光信号强度;采用生物信息学分析基因芯片转录组数据分析F3-T3融合基因的生物学功能,并分析肿瘤基因组学图谱计划(TCGA)数据库中胶质瘤患者生存期与PKM2基因表达的关系;瞬时转染小干扰RNA(siRNA)敲低PKM2基因表达;CCK-8细胞增殖实验观察经梯度浓度替莫唑胺处理后、转染siRNA后、替莫唑胺联合PKM2抑制剂Compound 3k处理后U87MG和U251MG细胞增殖活性;提取核质蛋白并观察经替莫唑胺处理后总蛋白提取物、胞质提取物和胞核提取物PKM2蛋白表达情况;Western blotting法检测稳定表达F3-T3融合基因的U87MG和U251MG细胞PKM2蛋白相对表达量、磷酸化组蛋白H2AX(p-H2AX)相对表达量、siRNA敲低PKM2基因p-H2AX相对表达量。结果(1)CCK-8细胞增殖实验显示,经替莫唑胺640、320、160、80、40μmol/L处理后F3-T3转染组的U87MG细胞存活率均高于空载体转染组(P=0.000,0.000,0.000,0.004,0.010),经替莫唑胺640、320、160、80、40、20、5μmol/L处理后F3-T3转染组的U251MG细胞存活率亦均高于空载体转染组(P=0.000,0.000,0.000,0.000,0.002,0.001,0.002);然而,经替莫唑胺640、320、160、80、40、20、10、5和2.50μmol/L处理后si-PKM2-1009转染组的U87MG细胞存活率均低于F3-T3转染组(P=0.000,0.000,0.000,0.012,0.006,0.030,0.000,0.007,0.025),经替莫唑胺640、320、160、80、40、20、5μmol/L处理后si-PKM2-1377转染组U251MG细胞存活率亦低于F3-T3转染组(P=0.000,0.000,0.002,0.000,0.002,0.048,0.042);经替莫唑胺640、320、160、80、40、20μmol/L处理后TMZ+Compound 3k组U87MG细胞存活率低于TMZ组(P=0.000,0.000,0.000,0.000,0.001,0.002),经高浓度(640、320、160、80、40μmol/L)替莫唑胺处理后TMZ+Compound 3k组U251MG细胞存活率亦低于TMZ组(P=0.000,0.000,0.000,0.000,0.003),而经低浓度(10、5、2.50μmol/L)替莫唑胺处理后TMZ+Compound 3k组U251MG细胞存活率高于TMZ组(P=0.000,0.000,0.006)。(2)胶质母细胞瘤动物模型显示,荷瘤鼠存在替莫唑胺耐药。(3)生物信息学分析,F3-T3融合蛋白的生物学功能显著富集于DNA修复通路(P=0.000)。TCGA数据库中胶质瘤患者PKM2基因高表达组生存率和总生存期均低于低表达组(P<0.05)。(4)Western blotting法显示,经替莫唑胺处理48 h再更换培养基后24、36和48 h,F3-T3转染组U87MG(P=0.000,0.000,0.004)和U251MG(P=0.000,0.007,0.005)细胞p-H2AX蛋白相对表达量均低于空载体转染组;经替莫唑胺处理后F3-T3转染组U87MG和U251MG细胞均可见明显的PKM2入核,而空载体转染组细胞均未见这一现象;si-PKM2-1009和si-PKM2-1377分别敲低U87MG(P=0.000,0.001,0.006)和U251MG(P=0.000,0.000,0.000)细胞PKM2基因表达的效果最显著。结论F3-T3融合基因可促进PKM2入核,激活DNA损伤修复相关通路,进而介导胶质母细胞瘤对替莫唑胺耐药,不同细胞株对替莫唑胺的耐药浓度不一致,PKM2抑制剂可逆转这种耐药。

自适应双时域参数MPC的智能车辆路径规划与跟踪控制

为解决过度避障,基于车辆点质量模型,采用非线性模型预测控制(MPC)算法,设计了新型避障功能函数,建立自动驾驶车辆路径跟踪性能综合评价指标,得到最优预测时域和控制时域参数,设计自适应双时域MPC参数路径跟踪控制器。搭建规划层和控制层集成的联合仿真平台,进行仿真试验。结果表明:在180个障碍物点下,避障功能函数可避免过度避障,且计算时间仅增加0.294 ms。采用局部避障路径规划与路径跟踪控制集成结构时,在多静态障碍物场景与动态障碍物场景下,车速为65 km/h时,最大横向误差偏差减小0.169 m,最大横摆角速度减小3.196(°)/s。

基于最优预瞄和模型预测的智能商用车路径跟踪控制

为解决智能商用车路径跟踪问题,采用一种最优预瞄控制策略。根据商用车航向角与路径曲率的关系,引入航向角偏差反馈控制;根据车速与预瞄距离的关系,提出了变权重因数的多点预瞄距离确定方法。为了保证商用车路径跟踪的稳定性,采用模型预测控制策略,对车轮侧偏角进行约束。通过TruckSim与Simulink联合仿真,对比分析了侧向偏差、横摆角速度和前轮侧偏角变化情况。结果表明:最优预瞄控制策略对车速变化具有较好的适应性,但当路面附着因数较低时,车辆会失去稳定性;模型预测控制策略对车速和路面附着因数变化都具有较好的适应性,行驶稳定性更好,且比最优预瞄控制策略具有更精确的路径跟踪效果。

基于模糊变权重的车辆换道轨迹规划分析

车辆换道为一种常见交通场景,基于五次多项式可得到自动驾驶车辆换道轨迹簇,文章采用模糊控制器动态调整评价函数的权重系数,从而根据实际工况选取最优换道轨迹。仿真结果表明,与传统固定权重系数的换道轨迹规划方法相比,在碰撞风险较大的工况下,基于模糊变权重的换道轨迹规划可合理调整权重值,优先考虑换道效率,提高纵向安全性,规划出适应当前工况的换道效率更高、碰撞风险更小的合理换道轨迹。

基于多MAP图的商用车电动助力转向控制策略

为解决前轴轻载荷和低路面附着因数工况下传统电动助力转向(EPS)降低驾驶员路感的问题,提出设计了基于多MAP图的EPS控制策略。该策略中,考虑了不同前轴载荷和路面附着因数对转向阻力矩的影响,采用反向传播(BP)神经网络计算不同工况下所需转向助力矩。通过Trucksim与Simulink联合仿真,验证评价了基于多MAP图的EPS控制策略。结果表明:基于多MAP图的EPS控制策略使车辆具有良好的转向轻便性,转向手力矩特性符合商用车理想转向盘转矩特性,可在轻载和低附着因数工况下增大转向盘转矩梯度,驾驶员中心转向区路感平均提升212%,改善了行驶安全性。

考虑附着系数的商用车EPS控制策略

为了解决低附着路面上传统电动助力转向(electric power steering,EPS)控制策略导致驾驶员路感下降的问题,分析了不同附着系数路面下转向阻力矩变化,针对商用车设计了考虑附着系数的EPS控制策略,提出基于不同附着系数路面上的阻力矩变化情况的EPS控制策略和基于模糊控制电流补偿的EPS控制策略。通过建立TruckSim/Simulink联合仿真模型,对2种控制策略进行了转向轻便性评价试验及中心转向区路感评价试验。仿真结果表明:提出的2种EPS控制策略均能在保证转向轻便性的同时,提高低附着路面上的行驶安全性及驾驶员的路感。

迷走神经刺激治疗癫痫新进展

癫痫是神经系统最常见的病症之一,严重影响患者、家庭和社会。约1/3的患者为药物难治性癫痫,其中只有一部分适合行手术治疗,其余患者可考虑行迷走神经刺激术(VNS)治疗。迷走神经刺激术是许多癫痫发作类型和癫痫综合征的有效治疗方法,是治疗药物难治性癫痫最常用的神经调控技术。迷走神经刺激术治疗难治性癫痫已有30a历史,本文对近年来在儿童、青年、成年难治性癫痫中的有效性、不良反应、生活质量及花费问题,以及该疗法的一些仍需探讨的问题做一综述。

JSH-23联合Stattic靶向NF-κB和STAT3双信号转导通路抑制胶质瘤细胞增殖和迁移实验研究

目的探讨JSH-23联合Stattic靶向抑制核因子-κB(NF-κB)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)双信号转导通路对间质型胶质母细胞瘤细胞增殖和迁移能力以及NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白表达的影响。方法自肿瘤基因组学图谱计划官网下载529例胶质瘤患者转录组测序结果,生物信息学分析RelA/P65和STAT3与间质型胶质母细胞瘤标志物的相关性,以及NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白在间质型、经典型和前神经型胶质母细胞瘤中的表达。体外培养的人胶质瘤细胞系U87MG和U251MG分别经JSH-23、Stattic、JSH-23和Stattic联合处理,细胞毒性实验计算两种药物的半数抑制浓度(IC_(50)),药物协同实验评估两种药物的协同作用;CCK-8法和平板克隆实验检测肿瘤细胞增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验检测肿瘤细胞迁移能力,Western blotting法检测NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白P65、磷酸化P65(p-P65)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)以及CD44的相对表达量。结果(1)生物信息学分析显示,RelA/P65 mRNA和STAT3 mRNA与间质型胶质母细胞瘤标志物CD44、CXCR4、CHI3L1、IL-4R、TRADD呈正相关(r=0.206~0.605,均P<0.01),且间质型胶质母细胞瘤NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白表达水平最高、经典型其次、前神经型最低。(2)细胞毒性实验显示,JSH-23对U87MG和U251MG细胞的IC_(50)为59.39和56.21μmol/L,Stattic为0.96和1.08μmol/L。药物协同实验显示,JSH-23为40~80μmol/L以及Stattic为0.50~1μmol/L时对U87MG细胞的协同效应最高,JSH-23为40μmol/L以及Stattic为1μmol/L时对U251MG细胞的协同效应最高,并且最终确定JSH-23的终浓度为60μmol/L,Stattic为1μmol/L。(3)经JSH-23、Stattic、JSH-23和Stattic联合处理后,U87MG和U251MG细胞增殖活性降低(均P=0.000),集落形成率减少(均P=0.000),细胞迁移率降低(均P<0.05),结晶紫染色阳性细胞数目减少(均P=0.000),以及P65(均P=0.000)、p-P65(均P=0.000)、STAT3(均P=0.000)、p-STAT3(均P=0.000)和CD44(均P=0.000)相对表达量降低,尤以JSH-23和Stattic联合处理后降低最显著(均P<0.01)。结论JSH-23联合Stattic靶向抑制NF-κB和STAT3双通路可以有效抑制间质型胶质母细胞瘤细胞的增殖和迁移能力,并下调NF-κB通路和STAT3通路相关蛋白的表达。

胼胝体切开术后非癫痫症状随访结果分析

目的探讨胼胝体切开术后难治性癫痫的有效性、安全性及非癫痫症状改善情况。方法 9例难治性癫痫患者均行胼胝体前2/3切开手术,其中2例联合致痫灶切除。结果随访平均38.7个月(2例失访),采用修正Engel分级评估患者术后癫痫控制情况:EngelⅠ级2例,EngelⅡ级2例,EngelⅢ级1例,EngelⅣ级2例,并根据1998年国际癫痫会议上讨论的"癫痫术后生活质量预后分类",结合本组患者的实际情况,发现2例患者术后认知表现有明确改善,达到I级,其余4例均为Ⅱ级。社会功能方面,2例达Ⅰ级,3例为Ⅱ级,1例无变化。结论胼胝体切开术后患者认知、职业等非癫痫症状及生活质量改善明显,且可能与癫痫控制率并不完全相关。

基于集群效应下的中小企业战略联盟模式解析

本文基于对中小企业战略联盟和集群优势的分析，提出应将集群内企业形成一种特殊组织形式，从而促进企业价值链有机组合，获得良好的市场竞争优势，并以此改善中小企业之间的不正当竞争关系和趋势。

论房地产中电商战略

电子商务快速发展为房地产的电商发展提供了社会基础和技术支持。文章以房产电商为出发点,结合房产电商的特性及模式,提出了房产电商营销的战略措施,旨在为今后的研究提供理论基础和技术指导。

对电子商务理论实践中存在问题的几点思考

当前,电子商务的经济效应和社会效益正日益彰显,作为一种新型的经济推动力,其越来越受到社会各界的高度关注和重视。然而,在电子商务现实操作中,其理论和相关知识方面依旧存在不少模糊含混的认知,导致其发展步伐较为缓慢。本文基于对电子商务、电子政务等理论因素开展分析,以期能将电子商务的本质特性挖掘而出,被更多人透彻认识。

迷走神经电刺激术治疗药物难治性癫痫后喉部不良反应的初步观察

迷走神经电刺激术(VNS)作为治疗药物难治性癫痫(DRE)的辅助方法疗效确切。近年来,随着手术患者数量的增加,术后诸如咳嗽、声音嘶哑等喉部不良反应时有发生,极少数患者因难以耐受而影响进一步对参数的调节,甚至影响手术疗效。本研究随访观察13例VNS后DRE患者的喉部不良反应,其中6例行喉镜检查观察喉部运动形态。结果显示,VNS后8例有喉部不良反应,其中咳嗽3例(其中1例伴短暂呼吸急促),声音嘶哑7例。仅1例因喉部不适改变了调机策略,其余均为一过性表现。6例接受喉镜检查的患者中,5例声带表现为正常的双侧对称运动,1例出现左侧声带麻痹。

蓝绿空间冷岛效应时空变化及其影响因素--以苏州市为例

水体和植被组成的"蓝绿空间"能够有效减缓城市热岛效应,探究其时空变化特征和影响因素对于改善城市环境和促进区域绿色低碳发展具有重要意义。以2004、2010和2014年三期Landsat遥感影像为数据源反演地表温度表征热环境,构建冷岛效应强度和冷岛指数定量分析苏州市蓝绿空间降温作用的时空变化特征,利用分类统计、剖面趋势法和线性拟合等方法分析蓝绿空间面积、土地利用变化和其它社会经济因素对冷岛效应的时空影响,结论如下:(1)2004~2014年苏州市冷岛效应面积不断减小,减少比例高达24.04%;空间上看,苏州北部和东部冷岛区域减少尤为明显,南部湖泊为主的地区变化相对较小。(2)从冷岛强度数值大小看,蓝绿空间的降温能力不断增强,2004、2010和2014年的冷岛强度分别为6.3℃、7.1℃和9.6℃;但考虑到其面积变化,苏州市蓝绿空间冷岛效应对于热环境的调节作用呈现出减弱趋势。(3)水体构成的"蓝色空间"降温能力(10.5℃)远大于植被"绿色空间"的冷岛强度(4.8℃);流动河渠的冷岛强度要明显高于静止的湖泊。(4)土地利用变化:尤其城市扩张侵占大量水田为影响苏州市冷岛效应时空变化的重要驱动因素,反观苏州市湖泊总面积在研究时间范围内有小幅增长,推断出政府决策者对于蓝绿空间类型的优先保护程度。