绵羊Myostatin基因真核表达载体的构建及在其原代成纤维细胞中的瞬时表达

Myostatin(MSTN)基因是胚胎期肌肉形成和出生后骨骼肌生长的主要调控因子之一,通过抑制肌细胞的扩增和分化而调控肌肉的生长和发育。为了进一步揭示MSTN在绵羊成纤维细胞中的生物学功能,采用RT-PCR从绵羊肌肉组织中扩增MSTN基因,将其cDNA终止密码子TGA删除,采用定向克隆技术连接到带有水母绿色荧光蛋白(AcGFP)报告基因的真核表达载体pAcGFP-N1中,构建融合蛋白重组质粒,经XhoⅠ/SacⅡ双酶切、测序鉴定后,用脂质体介导质粒转染绵羊原代成纤维细胞,观测荧光表达及用RT-PCR和Western blotting方法检测基因转录、蛋白质表达情况。结果表明,成功克隆绵羊MSTN基因,通过PCR方法在MSTN阅读框两端引入了XhoⅠ和SacⅡ克隆位点,成功构建pAcGFP-MSTN融合蛋白真核表达载体,重组质粒转染绵羊成纤维细胞24h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,通过RT-PCR扩增出1138bp的转录产物,并用Western blotting检测到78ku目的蛋白的表达。本试验为研究MSTN基因在成纤维细胞和脂肪分化调控中的具体机制奠定基础。

湖羊舍饲养殖技术

湖羊属于节粮型粮食动物,具有四季发情、性情温顺、繁殖率高等养殖优点。经过长期的选育和圈养,苏州本地培育大量优良的湖羊。为提升圈养养殖经济效益,规范湖羊舍饲养殖技术,文章论述相关的技术要点,以供同仁参考和借鉴。

肉用仔鸡的饲养管理方式及要点

随着社会生活水平的提升，居民对膳食结构要求逐步提升，禽肉需求量猛增，促进了肉用仔鸡养殖业的发展。肉用仔鸡饲养实际上就是一般的育雏过程，但是由于肉用仔鸡生长快、培育时间短、饲料报酬高等，所以，需有独特的饲养管理措施。

禽白血病病毒多重PCR检测法的建立及初步应用

根据GenBank中登录的禽白血病病毒A、B、J亚群的核苷酸序列设计合成了3对引物，各对引物可分别扩增出大小约为195、260、924bp的核苷酸片段：经优化建立禽白血病病毒多重PCR检测法，并进行其敏感性试验及对马立克病病毒（MDV）、

22种中草药对畜禽常见肠道病原菌的体外抑菌作用

对22种中草药对常见畜禽肠道病原菌的抗菌活性进行了定量分析．采用水煎法提取中草药有效成分，通过体外抑菌试验检测不同提取成分的抑菌活性，确定其体外最小抑菌浓度（MIC）。结果表明：

猪全价配合饲料的配制技术

配合饲料就是按照猪饲养的标准要求，将多种饲料原料按照一定的比例，采用特定的加工工艺配制而成地营养丰富的饲料产品。根据饲料中营养构成、形态、饲喂对象等等可细分为多种。具体分类参照项：（1）根据饲料形态可将最终的饲料产品细分为粉状、湿拌料、颗粒料、膨化饲料等等。（2）根据饲料喂养对象不同可细分为乳猪料、断奶仔猪料、生长猪料、育肥猪料、泌乳猪料、公猪料等等。（3）根据营养及用途可细分为添加剂预混饲料、浓缩饲料和全价配合饲料。本文介绍了全价配合饲料的设计原则与方法，为猪健康生长所需饲料的配制提供参考和借鉴。

猪中暑的诊断与治疗

中暑是日射病和热射病的统称。夏季受到日光直射时,引起中枢神经发生急性病变,脑及脑膜充血,致使神经机能发生严重障碍的叫日射病;因气候炎热,环境潮湿,体热产生得多而放散得少,全身过热,而引起中枢神经机能紊乱的叫热射病。临床上以超高体温、循环衰竭为特征。近年来,盛夏酷暑,天气持续高温、燥热,环境、栏舍、猪体的防暑降温工作做的不好,

母猪产后瘫痪的防治

随着畜牧养殖业的迅猛发展，生猪养殖规模化、产业化渐成趋势。母猪产后瘫为生猪养殖中较为常见的疾病。产后瘫痪也称乳热症，是母畜分娩前后突然发生的一种严重代谢疾病，其特征是出于缺钙性的知觉丧失及四肢瘫痪。患猪食欲不振，被毛粗糙，尿量减少，奶量大减或无奶，消瘦，衰弱，后肢无力，卧地不起。此病常发于产仔高峰期的2-5月间，为一种常见病多发病，

畜牧养殖技术推广存在的问题及措施

为了促进畜牧养殖业健康、可持续发展,应大力推行养殖技术,提高畜牧养殖业主的经济效益。需加大力度对畜牧养殖技术的推广,使更多的畜牧养殖业主使用更加科学、合理的畜牧养殖技术。但当前畜牧养殖技术推广中仍然存在很多亟待解决的问题。该文通过对推广畜牧养殖技术的重要性及存在的问题进行论述,并提出具体的措施。

生态猪养殖与粪污处理技术探究

文中对生态养猪技术要点和养殖模式和生态猪养殖注意问题做概述。

中小规模猪场猪病的预防措施

近几年，苏州市地方中小规模生猪养殖渐成规模。但是，从养殖效益来看，是越来越不理想，不少养殖户认为生猪养殖越来越难，尤其是在疾病防控方面，养殖风险是与日俱增。而且地方兽医工作者也普遍认为，疫病并发症日趋多样，防治是越来越难。科学的养殖措施，推广预防为主的设病防控理念，有效避免了生猪养殖疾病的发生。

肉用鸡养殖存在的问题及对策措施

从肉用仔鸡生产特点来看，肉用仔鸡生产具有生产周期短、饲料转化率高、投资见效快等特点，因此，在农村养殖项目中备受推崇。同时，为了保证肉用仔鸡更好、更快、更健康地发展，必须要正视肉用仔鸡生产中的常见问题，科学管理、统筹规划、切实提高养殖质量。

鸡中毒性疾病的诊治

随着家禽养殖业规模化、产业化发展,禽中毒症尤为常见和普遍。禽中毒是指某些物质经禽消化道、呼吸道进入机体,破坏机体正常生理机能,诱发组织器官发生质性改变的病理过程。日常饲养管理中,可引起禽中毒的物质很多,有毒性很大的化学物质,还有是禽机体急需的营养物质。中毒后的家禽,生长发育受限,严重的导致急性死亡,带来甚为惨重的经济损失。1临床症状了解中毒症特点,对诊治此病意义非凡。

湖羊MyoG基因CDS的克隆及其真核表达载体的构建

参阅GenBank发表的波尔山羊肌细胞生成素(MyoG)基因序列,设计3对具有互补末端的特异性引物,分别扩增出湖羊MyoG基因的3个外显子,利用重叠PCR技术,将此3个外显子连接,并构建成重组质粒pcDNA3.0-MyoG,转染NIH-3T3细胞,RT-PCR鉴定。结果表明:成功克隆了湖羊MyoG基因的CDS,在离体细胞中MyoG基因发生了转录,这为进一步研究MyoG基因的体内外表达及生物学的活性奠定了基础。

徐淮山羊PPAR基因克隆及其表达产物亚细胞定位的研究

研究旨在克隆徐淮山羊过氧化物酶体激活增殖受体(PPAR)基因的cDNA,并通过EGFP融合蛋白对该基因产物亚细胞水平定位。采用RT-PCR方法克隆徐淮山羊脂肪组织PPAR基因cDNA,并构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的融合表达载体pEGFP-C1-PPAR,聚乙烯亚胺(PEI)介导基因转染NIH-3T3细胞,48h后荧光倒置显微镜下观察基因表达产物的分布,RT-PCR检测mRNA在体外水平的表达。结果表明:首次成功克隆出徐淮山羊PPAR基因的全序列cDNA,大小为1428bp,GenBank登录号为GU082382;构建了融合表达载体pEGFP-C1-PPAR;RT-PCR检测mRNA表达明显;EGFP-PPAR融合蛋白定位在NIT-3T3细胞质中。体外克隆的徐淮山羊PPAR基因cDNA,在单细胞水平上可表达于细胞质中,结果为进一步研究PPAR的生物学功能奠定基础。