基于细胞焦亡及中性粒细胞胞外诱捕网探讨刺梨根对溃疡性结肠炎大鼠的影响

目的 基于细胞焦亡与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)探讨刺梨根对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的影响。方法 将大鼠随机分为正常组和造模组,造模组给予三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇联合灌肠建立UC大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、柳氮磺吡啶组(0.3 g/kg)和刺梨根低、中、高剂量组(2、4、8 g/kg),各组灌胃给予相应药物。给药21 d后,计算疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理改变,ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β和髓过氧化物酶(MPO)水平,Western blot及免疫组化法检测结肠组织NE、MPO、NLRP3、caspase-1、GSDMD蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组DAI评分升高(P<0.01),血清IL-1β、IL-18、MPO水平升高(P<0.01),结肠组织NE、MPO、caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,柳氮磺吡啶组和刺梨根中、高剂量组DAI评分降低(P<0.05,P<0.01),血清IL-1β、IL-18、MPO水平降低(P<0.01),结肠组织NE、MPO、caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 刺梨根可能通过调控细胞焦亡及NETs缓解UC大鼠炎症反应,改善结肠病理损伤。

基于网络药理学及分子对接技术探讨刺梨干预脓毒症的作用

目的:借助网络药理学及分子对接技术探讨刺梨干预脓毒症的作用机制,为扩大刺梨用药范围提供依据.方法:通过文献研究及Swiss数据库筛选刺梨活性成分并分析相关作用蛋白靶点,借助OMIM、Gene Cards、DRUG BANK、DisGeNet等数据库分析脓毒症基因靶点并取交集;借助STRING数据库及CytoScape软件构建PPI网络关系并得到刺梨干预脓毒症关键靶点;借助Metascape数据库进行生物富集分析;使用Schrödinger软件进行核心化合物-蛋白分子对接.结果:得到刺梨核心化合物为57个,涉及132个蛋白靶点,其中与脓毒症相关核心靶点为AKT1、PIK3R1、SRC等;在60组分子对接结果中,所有对接分数均<-4,表明多数化合物-蛋白有较大结合能;KEGG富集分析结果显示关键通路为Phospholipase D signaling pathway和Endocrine resistance pathway.结论:刺梨干预脓毒症依靠多通路、多靶点协调作用,其主要活性成分为槲皮素、鞣花酸、木犀草素,通过AKT1、PIK3R1、SRC等蛋白作用与Phospholipase D signaling pathway和Endocrine resistance pathway等通路发挥治疗脓毒症的干预作用.

头花蓼化学成分及药理作用机制研究进展

头花蓼为贵州传统苗药,具有清热利湿、利水通淋等功效。其主要化学成分为黄酮类、木脂素类及挥发油类,还含有萜类、鞣质类等成分。近年来,因头花蓼具有抗炎、抗菌、抗氧化及降血糖等多种药理作用而成为研究热点。研究头花蓼相关国内外文献,综述其化学成分及药理作用机制,以期对头花蓼的药理研究及临床应用提供参考。

基于网络药理学及分子对接技术探讨头花蓼治疗糖尿病的预防作用

目的:借助网络药理学及分子对接方法探讨头花蓼治疗糖尿病的作用机制,为扩大头花蓼用药范围提供依据。方法:通过文献研究及Swiss数据库筛选得到头花蓼活性成分并分析相关作用蛋白靶点,借助OMIM、GeneCards、DRUG BANK、DisGeNet等数据库分析糖尿病基因靶点,并取交集;借助STRING数据库及Cytoscape软件构建PPI网络关系并得到头花蓼干预糖尿病关键靶点;借助metascape数据库进行生物富集分析;使用autodock软件进行核心化合物–蛋白分子对接。结果:得到头花蓼核心化合物为49个,涉及45个蛋白靶点,其中与糖尿病相关核心靶点为ALB、EGFR、SRC、CASP3等;在60组分子对接结果中,Affinity −1的对接结果有45个,提示多数化合物–蛋白有较大结合能;KEGG富集分析结果显示关键通路为Lipid and atherosclerosis、Pathways in cancer、IL-17 signaling pathway等。结论:头花蓼干预糖尿病依靠多通路、多靶点协调作用,其主要活性成分为槲皮素、红景天甘、木犀草素、齐墩果酸等,通过ALB、EGFR、SRC、CASP3等蛋白作用与Lipid and atherosclerosis、Pathways in cance、IL-17 signaling pathway等通路发挥治疗糖尿病作用。

基于网络药理学及分子对接技术探讨黄芪甲苷治疗骨质疏松的作用机制研究

目的:采用网络药理学及分子对接方法探讨黄芪甲苷治疗骨质疏松的作用机制。方法:通过文献研究及Swiss数据库筛选得到黄芪甲苷活性成分并分析相关作用蛋白靶点,借助OMIM、GeneCards、DRUG BANK、DisGeNet等数据库分析骨质疏松基因靶点,并取交集;借助STRING数据库及Cytoscape软件构建PPI网络关系并得到黄芪甲苷干预骨质疏松关键靶点;借助metascape数据库进行生物富集分析;使用autodock软件进行核心化合物–蛋白分子对接。结果:得到黄芪甲苷涉及268个蛋白靶点,其中与骨质疏松相关核心靶点为ALB、IGF1、SRC、ESR1等;在分子对接实验中,Affinity平均值为−6.49 kcal·mol−1,最小值为−13.46 kcal·mol−1证明黄芪甲苷与核心蛋白有较大结合能;KEGG富集分析结果显示关键通路为AGE-RAGE signaling pathway、FoxO signaling pathway、PI3K-Akt sig-naling pathway等。结论:黄芪甲苷干预骨质疏松依靠多通路、多靶点协调作用,其主要通过ALB、IGF1、SRC、ESR1等蛋白作用与AGE-RAGE signaling pathway、FoxO signaling pathway、PI3K-Akt signaling pathway等通路发挥治疗骨质疏松作用。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的玉蝴蝶祛斑膏化学成分分析

目的采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对玉蝴蝶祛斑膏的中间体及单药味进行化学成分鉴定及综合分析,并对其化学成分进行药味归属,为建立玉蝴蝶祛斑膏特征图谱奠定基础。方法以phenomenex Luna Omega Polar C18(2.1 mm×100 mm,1.6μm)为色谱柱,以0.2%乙酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱(0~1 min,12%~17%B;1~5 min,17%~28%B;5~10 min,28%~90%B;10~11 min,90%~100%B;11~14 min,100%B);检测波长为300 nm;柱温为25℃,流速为0.25 mL·min^(-1)。并采用G6530C型Q-TOF-MS,质谱检测分别在正、负离子模式下进行,干燥气温度:350℃,干燥气流速:10L·min^(-1),雾化气压力:35 psi,鞘气温度:350℃,鞘气流速:12 L·min^(-1),毛细管电压:4000 V(正模式)和3500 V(负模式),一级质谱选用MS模式,质量扫描范围:100~1500m/z。二级质谱选用Auto-MS/MS模式,质量扫描范围:100~1000 m/z,碰撞电压:10、15、20、30 eV。所得数据由Agilent MassHunter软件采集。数据处理采用Agilent软件Qualitative Navigator(B.08.00)和Qualitative Workflows(B.08.00)。对玉蝴蝶祛斑膏及单药味进行UPLCUV和UPLC-TOF-MS分析,在正负离子模式下采集数据。结果在正负离子模式条件下共鉴定和推测出19个化合物,结合质谱碎片信息对各色谱峰进行指认和归属。其中5个化合物归属到柿叶,14个化合物归属到木蝴蝶,5个化合物归属到菟丝子;结合文献报道和对照品对比,鉴定出15个化合物,主要为黄酮类化合物,其中包括黄芩苷、木蝴蝶苷B、金丝桃苷、芹菜素等。结论本研究比较全面地阐明了玉蝴蝶祛斑膏的化学组成,对玉蝴蝶祛斑膏的鉴别和质量评价研究有重要的参考价值。

基于网络药理学探讨玉蝴蝶祛斑膏治疗黄褐斑的作用机制

目的:采用网络药理学的分析方法,探讨玉蝴蝶祛斑膏治疗黄褐斑疾病的作用机制。方法:通过TCMSP数据库收集玉蝴蝶祛斑膏潜在有效活性化合物,并通过Swiss Target Prediction数据库筛查其潜在有效活性化合物的人类潜在有效靶点蛋白;在DisGeNET、GeneCards、TTD等数据库筛查黄褐斑的疾病靶点蛋白;通过STRING数据库构建蛋白–蛋白互作网络数据,并利用Cytoscape软件进行可视化拓扑结构分析,将关键靶点蛋白通过DAVID数据库进行基因功能和通路富集分析。结果:筛选得到玉蝴蝶祛斑膏中潜在有效活性成分66个,所对应潜在靶点蛋白478个,与黄褐斑疾病相关疾病靶点蛋白120个。“成分–靶点”网络图提示槲皮素、黄芩素等是玉蝴蝶祛斑膏治疗黄褐斑疾病的关键成分。GO富集分析结果显示,共有225个条目与生物过程相关,共有40个条目与细胞组成相关,共有63个条目与分子功能相关;富集分析显示,参与治疗黄褐斑疾病的关键靶点蛋白主要与131条通路相关联,其主要涉及癌症通路、癌症蛋白聚糖通路等。其中癌症通路的P值最高。结论:文章利用网络药理学多成分、多靶点、多维度、多途径的分析方法,较为全面地阐明了玉蝴蝶祛斑膏治疗黄褐斑疾病的作用特点,初步揭示了玉蝴蝶祛斑膏治疗黄褐斑疾病的有效基础物质和作用机制,为后续研究提供思路与依据。

黄芪的化学成分及药理作用研究进展

黄芪为补药之长,是补气升阳的要药,具有固表止汗、利水消肿、生津养血等功效。黄芪的化学成分复杂,包括黄芪多糖、黄芪皂苷、黄芪黄酮类、氨基酸及微量元素等其他成分。黄芪的药理作用广泛,包括对骨代谢的影响、抗病毒及抗肿瘤等。本文总结了近年来有关黄芪的化学成分及药理作用,为黄芪继续深入研究奠定理论基础。

骨碎补对庆大霉素耳毒性豚鼠耳蜗VDR、CYP27B1及CYP24A1的影响

目的 研究骨碎补对庆大霉素耳毒性豚鼠耳蜗VDR、CYP27B1及CYP24A1的影响。方法 将30只成年健康雄性豚鼠随机均分为空白组,模型组,骨碎补低、中、高剂量组,维生素D组。空白组腹腔注射生理盐水,其他各组腹腔注射庆大霉素进行造模,均持续21 d。空白组与模型组予生理盐水灌胃;骨碎补低、中、高剂量组,依次予不同剂量的骨碎补灌胃;维生素D组予维生素D灌胃,均持续21 d。采用HE染色法观察豚鼠耳蜗组织病理改变;采用免疫组化法检测耳蜗组织VDR、CYP27B1、CYP24A1蛋白表达情况。结果 与空白组比较,模型组豚鼠有明显耳组织病理改变,耳蜗组织VDR、CYP27B1蛋白表达均降低,CYP24A1蛋白表达升高(P <0.01)。与模型组比较,骨碎补中剂量组及维生素D组耳蜗组织病理改变不同程度减轻,耳蜗组织VDR、CYP27B1蛋白表达水平升高,CYP24A1蛋白表达水平降低(P <0.01)。结论骨碎补可改善庆大霉素耳毒性影响的豚鼠耳蜗组织,其机制可能与维生素D相关蛋白表达有关。

热淋清颗粒对干酵母致热大鼠的解热作用研究

目的探讨热淋清颗粒对干酵母致热模型大鼠的解热作用及其作用机制。方法采用颈背部皮下注射干酵母悬浊液法复制大鼠发热模型,将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和热淋清颗粒高、中、低剂量组,每组10只,雌雄各半。检测造模后不同时间点大鼠体温,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、精氨酸加压素(AVP)及下丘脑中的前列腺素E2(PGE2)、环磷酸腺苷(cAMP)水平。结果模型组大鼠体温、血清中TNF-α、AVP含量、下丘脑中PGE2、cAMP含量均较正常组显著上升(P<0.01);热淋清颗粒高、中剂量组大鼠体温、血清中TNF-α及下丘脑中PGE2、cAMP含量均较模型组显著降低(P<0.01);热淋清颗粒抑制发热大鼠体温上升在一定范围内存在量效关系;与模型组比较,热淋清颗粒高剂量组AVP水平显著升高(P<0.01)。结论热淋清颗粒具有良好的解热作用且高剂量效果最优,其作用机制可能是通过抑制机体内生热源TNF-α生成,降低体温中枢正调节介质PGE2、cAMP分泌水平,促进机体体温调节介质AVP的分泌而达到解热作用。

VD/VDR调控RAAS在骨质疏松症中的机制及黄芪干预作用

骨质疏松症是一种由于各种原因导致骨量流失的全身性骨病。骨组织局部的肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)过度激活是骨质疏松症的重要发生机制,不仅直接参与骨代谢,还具有介导细胞发生增殖、分化、凋亡、炎性反应和血管生成等作用。维生素D对RAAS的负调节作用是预防和治疗骨质疏松症的重要靶点,当维生素D缺乏时可导致RAAS过度激活。基于前期研究发现,黄芪治疗骨质疏松症的机制与提高成骨细胞活性及调节维生素D相关基因与蛋白表达水平相关。据此推测,黄芪防治骨质疏松症的作用机制与通过对维生素D系统的调控,进而干预RAAS的表达水平密切相关,为药物预防和治疗骨质疏松提供新的治疗靶点和新的思路。

黄芪调节维生素D介导OPG/RANKL/RANK信号通路对维甲酸诱导骨质疏松C57BL/6J小鼠股骨的影响

目的通过研究黄芪对骨质疏松C57BL/6J小鼠股骨VDR、SOST、OPG、RANKL、RANK mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨其治疗骨质疏松作用机制。方法将30只C57BL/6J小鼠随机分为6组:模型组,黄芪低、中、高剂量组[2g/(kg·d)、4g/(kg·d)、8g/(kg·d)],骨化三醇组0.06μg/(kg·d)和正常组,各组均采用灌胃给药。HE染色法观察各组小鼠股骨组织病理学改变;比色法检测小鼠血清中Ca^(2+)含量;ELISA法检测小鼠血清中BGP、25(OH)D_(3)含量;RT-PCR及Western-Blot法检测小鼠股骨中VDR、SOST、OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达量。结果与正常组比较,模型组小鼠股骨骨皮质粗糙,破骨细胞增多,骨小梁变细,数量减少,间隙增大,见骨髓水肿;与模型组比较,黄芪高、中、低剂量组小鼠股骨骨小梁变细、数量减少程度均明显减轻。与正常组比较,模型组小鼠血清Ca^(2+)、25(OH)D_(3)、BGP含量显著降低(P<0.01);模型组小鼠股骨VDR、OPG mRNA及蛋白表达量显著降低(P<0.01),SOST、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,黄芪高、中剂量组小鼠血清Ca^(2+)、25(OH)D_(3)、BGP含量显著升高(P<0.01);黄芪高剂量组小鼠股骨VDR、OPG mRNA和蛋白表达量显著升高(P<0.01),SOST、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.01);黄芪中、低剂量组SOST、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达量亦有一定程度下降(P<0.05)。结论黄芪可防治维甲酸诱导的C57BL/6J小鼠骨质疏松,其机制可能与调节维生素D介导分泌SOST调控OPG/RANKL/RANK通路有关。

黄芪多糖对地塞米松诱导的MC-3T3-E1成骨细胞FGF23、Klotho mRNA及蛋白表达的影响

目的通过研究黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞成纤维生长因子-23(FGF23)、Klotho、骨钙素(OC)和碱性磷酸酶(ALP)表达的影响,初步探讨黄芪多糖治疗骨质疏松症(OP)的作用机制。方法实验为6组,分别为正常组、模型组、黄芪多糖低、中、高剂量组、维生素D3组。MTT法检测不同浓度的黄芪多糖在不同时间(24 h,36 h,48 h)对MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制率的影响;比色法检测MC-3T3-E1成骨细胞ALP的活性;ELISA法检测MC-3T3-E1成骨细胞OC的含量;RT-PCR法和Western Blot法检测MC-3T3-E1成骨细胞FGF23、Klotho mRNA和蛋白表达水平。结果MTT法结果显示,与模型组比较,黄芪多糖低、中、高剂量组及维生素D3组MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制率在24 h、36 h、48 h时显著降低(P<0.01),且与黄芪多糖浓度呈负相关;ELISA法结果显示,与模型组比较,黄芪多糖各剂量组与维生素D3组小鼠MC-3T3-E1成骨细胞OC含量均显著升高(P<0.01);比色法结果显示,与模型组比较,黄芪多糖各剂量组与维生素D3组MC-3T3-E1成骨细胞ALP含量均显著升高(P<0.01);RT-PCR法和Western Blot法结果显示,与模型组比较,黄芪多糖各剂量组与维生素D3组均可显著下调FGF23 mRNA和蛋白表达水平(P<0.01),黄芪多糖中、高剂量组与维生素D3组均可显著上调Klotho mRNA和蛋白表达水平(P<0.01)。结论黄芪多糖可防治骨质疏松症,其机制可能与提高MC-3T3-E1成骨细胞活性及调节FGF23、Klotho mRNA和蛋白表达水平有关。

热淋清颗粒对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨热淋清颗粒对脓毒症急性肺损伤模型大鼠的保护作用及其机制。方法将30只SD大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、热淋清颗粒高剂量组[4.8 g/(kg·d)]、热淋清颗粒中剂量组[2.4 g/(kg·d)]、热淋清颗粒低剂量组[1.2 g/(kg·d)]、阳性对照组[地塞米松1.5 mg/(kg·d)],每组5只。各组均采用灌胃给药,1次/d,连续给药7 d,末次给药后各组大鼠均采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症急性肺损伤模型(假手术组不结扎和穿孔),造模24 h后取材。取各组大鼠右肺中叶计算肺组织湿/干重比;采用HE染色法观察各组大鼠肺组织病理学改变并进行损伤评分;采用ELISA法检测各组大鼠血清中IL-1α、TNF-α、PGE2水平含量;采用RT-PCR法检测各组大鼠肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA相对表达量;采用Western-Blot检测各组大鼠肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白相对表达量。结果与假手术组比较,模型组大鼠肺组织湿/干重比、肺组织病理损伤评分显著升高(P<0.01);与模型组比较,热淋清颗粒高剂量组和阳性对照组可显著降低大鼠肺组织湿/干重比、肺组织病理损伤评分(P<0.05);与假手术组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1α、PGE2水平及肺组织TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,热淋清颗粒高、中剂量组和阳性对照组大鼠血清TNF-α、IL-1α、PGE2水平及肺组织TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05);热淋清颗粒高剂量组上述各指标改善情况优于阳性对照组。结论热淋清颗粒能减轻脓毒症大鼠急性肺损伤,其机制可能与调节TLR4/MyD88/NF-κB p65通路有关。