黄藤合剂的急性毒性和药效学研究

用热板法和扭体法研究黄藤合剂镇痛效果,测定毛细血管通透性和炎症组织PGE2含量以研究其抗炎活性及机理.小鼠灌胃给予黄藤合剂最大给药量76.8 g/kg后,7天内未见明显异常变化.黄藤合剂8mg/kg即能明显提高小鼠对热刺激的痛阈值,减少醋酸引起的扭体次数,降低毛细血管通透性,减少炎症组织PGE2的含量.16 g/kg,还能推迟疼痛反应出现的时间,延长潜伏期.黄藤合剂具有镇痛抗炎作用,最大给药量为76.8 g/kg,其作用机理可能与减少PGE2含量有关.

大鼠肝再生相关基因Tax1bp1与绿色荧光蛋白融合表达的研究

目的构建大鼠肝再生相关基因Tax1bp1的真核表达载体,融合绿色荧光蛋白并在再生肝中高效表达,观察目的蛋白的表达情况。方法利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术以大鼠再生肝为材料克隆Tax1bp1基因的开放阅读框(ORF),然后亚克隆到表达载体上构建重组表达载体pEGFP-N1-Tax1bp1,再用尾静脉液压法转入大鼠再生肝中进行绿色荧光蛋白融合表达。结果 Tax1bp1ORF克隆正确,融合绿色荧光蛋白重组表达载体pEGFP-N1-Tax1bp1构建成功;部分肝切除转基因6、12、24、48 h后均有荧光表达,Tax1bp1融合蛋白在上述时间点绿色荧光融合蛋白细胞转染率分别为8.7%、11.2%、14.5%和1.2%,转染率趋势同空载体绿色荧光蛋白表达情况一致。结论重组表达载体pEGFP-N1-Tax1bp1构建成功,并实现了绿色荧光融合蛋白的高效表达,为进一步研究肝再生相关Tax1bp1基因功能奠定了基础。

大鼠肝再生相关基因MafF的分子进化研究

Maf家族是碱性亮氨酸拉链(the basic leucine zipper,bZip)转录因子的一个亚群,是v-maf癌蛋白类似物.它可以通过结合不同的底物来调节下游基因的表达.cDNA Microarray结果显示,小Maf家族成员MafF在大鼠部分肝切除后表达水平迅速升高.为了详细研究该基因的特性,我们采用生物信息学手段来分析在不同动物中MafF基因的长度多态性、终止密码子多态性、ORF多态性以及氨基酸序列的同源性,建立不同动物MafF基因上的进化关系图谱,为了解MafF基因的演化关系,研究该基因参与大鼠肝再生的作用机理提供资料.

施用有机肥环境下盐胁迫小麦幼苗长势和内源激素的变化

在盆栽条件下,研究了不同浓度NaCl处理下,底施不同施用量有机肥小麦品种豫麦49-198幼苗的生长变化,在此基础上,选择出合适的NaCl处理浓度和有机肥施用量区间,并对此情况下小麦幼苗苗和根中内源激素含量和比例的变化进行了测定,以揭示其耐盐差异机制。结果表明,15000—35000 kg/hm2施用量有机肥处理明显减轻NaCl浓度为150 mmol/L的盐胁迫,其中25000 kg/hm2有机肥处理效果最明显;45000 kg/hm2以上的有机肥处理对幼苗生长抑制无明显缓解作用;当NaCl浓度为450 mmol/L时,各种施用量的有机肥处理均不能减轻盐胁迫对幼苗生长的抑制。150 mmol/L NaCl胁迫下,不同施用量有机肥处理,分别为对照(不施肥)、低施用量(15000 kg/hm2)、中施用量(25000 kg/hm2)和高施用量(35000 kg/hm2)的有机肥,土壤盐度的增加量随有机肥用量增加而上升,对小麦幼苗生长的抑制作用得到缓解,以25000 kg/hm2有机肥处理缓解作用最强。有机肥处理下盐胁迫小麦幼苗苗和根中ABA含量的增加得到显著缓解,IAA和GAs的含量比不施有机肥的对照有不同程度的提高,说明盐胁迫下有机肥处理小麦幼苗具有较高IAA和GAs合成量。盐胁迫下有机肥处理使苗中ZR的含量较高而根中则较低,说明抗盐性较强的有机肥处理可迅速将根部合成的ZR向苗中转移,促进苗的生长。盐胁迫下有机肥处理的IAA/ABA、GAs/ABA、ZR/ABA的比值也有不同程度提高。在盐胁迫下,有机肥处理尤其是在25000 kg/hm2施用量时,小麦幼苗协调自身激素平衡的能力较强可能是其生长受抑制较小的重要原因。

CAPS标记技术及其应用进展

酶切扩增多态性序列(CAPS)标记技术是一种简单、经济、可靠和共显性的技术,适用于生物研究的许多方面。本文综述了该标记技术的原理、过程、特点和在植物、动物和微生物的基因分型、分子标记辅助选择育种、品种鉴定、分子标记的开发、基因鉴定、基因定位、遗传图谱构建、基因分离、体细胞杂合植株的遗传鉴定与分析诸方面应用的新进展,并展望了其应用前景。

河南内乡宝天曼国家级自然保护区两栖动物多样性及保护

2000年4月至2008年11月对河南内乡宝天曼国家级自然保护区的两栖动物资源进行了调查,共发现11种,隶属于2目、5科、10属。区系组成以东洋界和广布种为主,各5种,分别占该区两栖动物总数的45.5%,其中大鲵为国家Ⅱ级保护动物.伏牛山是臭蛙属及花臭蛙分布的北限,同时也是秦巴拟小鲵分布的东限.根据其资源特点,提出了保护区两栖动物保护的对策与建议.

雪莲果染色体数目及核型分析

雪莲果为菊科多年生双子叶草本植物,容易产生变异形成新的种系,为了确定我国引种雪莲果的染色体数目,采用0.002 M的8-羟基喹啉溶液预处理雪莲果根尖3～4 h,经卡诺氏液固定、酸解去壁、卡宝品红染色等步骤,对雪莲果进行了染色体数目的确定及体细胞染色体核型分析,结果表明雪莲果的染色体数目为2n=52=30m+22sm,核型属于Stebbins核型分类中的"2B"类型.

维生素C与甘氨酸甜菜碱对芍药花瓣生理生化的影响

在芍药大富贵蕾期,以维生素C 100 mg/L+甘氨酸甜菜碱60、120、200 mg/L组合水溶液进行全株喷洒处理,测定整个花期花瓣中部分生理生化指标的变化。结果表明:维生素C 100 mg/L+甘氨酸甜菜碱60、120、200 mg/L组合处理使芍药大富贵盛花期花瓣中可溶性糖和可溶性蛋白含量分别比对照增加9.16%～26.32%和12.33%～24.25%;超氧化物歧化酶活力提高7.95%～27.08%;超氧阴离子产生速率与丙二醛含量分别降低了4.92%～20.07%和12.89%～36.32%,以维生素C 100 mg/L+甘氨酸甜菜碱120 mg/L处理效果最佳。

广义金线侧褶蛙河南3个地理种群的形态分析及分类探讨

运用典型判别分析和聚类分析,对河南省内3个广义金线侧褶蛙(Pelophylax plancyi)种群16个特征进行形态测量和比较分析.结果显示:广义金线侧褶蛙在河南应分为两个物种,分布于黄淮平原及以北的种群属于金线侧褶蛙,分布于大别山丘陵地区的种群属于湖北侧褶蛙(Pelophylax hubeiensis);金线侧褶蛙伏牛山种群的分类地位尚不能确定,湖北侧褶蛙和金线侧褶蛙是否在伏牛山区交叉分布,需要更多的形态学比较和分子生物学证据.

水稻胁迫应答基因OsABI8的克隆与表达分析

利用拟南芥abscisic acid-insensitive8(ABI8)基因的序列在NCBI核酸数据库中检索到水稻ABI8的序列信息,并设计特异性引物,以水稻cDNA为模板,利用RT-PCR技术,扩增出水稻ABI8 cDNA序列.将所得序列片段克隆到T载体上并进行序列测定,结果显示,该基因全长1 666 bp,开放阅读框927 bp,编码一个308个氨基酸的蛋白.该蛋白序列与普通小麦、一粒小麦、玉米、高粱、拟南芥菜等植物的ABI8基因序列高度同源,分别达到86.1%、86.4%、89.6%、90.3%及72.5%的一致性.利用荧光定量PCR法检测了OsABI8基因在ABA激素、干旱和盐胁迫下的表达谱,发现胁迫下植物积累更多的OsABI8 mRNA.

日本三角涡虫神经系统的组织学观察

为了给涡虫神经生物学的比较研究提供基础资料和通过RNAi技术为研究与脑部再生有关基因的功能奠定基础,本研究使用石蜡连续切片技术,经HE和Masson染色后,对日本三角涡虫Dugesia japonica的神经系统进行观察。日本三角涡虫的中枢神经系统由脑和2条纵神经索组成,脑呈马蹄形;纵神经索从头部到尾部逐渐变细;脑部神经细胞突起连接成网状,纵神经索内神经细胞突起呈纵向排列;咽壁神经组织排列成内外2个圆筒状。这些结构差异反映出日本三角涡虫在涡虫纲系统演化中处于较高级的地位。

沟鲹骨骼系统的研究——兼与鲹科某些种类比较

对沟鲹骨骼系统的特征进行了观察,并比较其与蓝圆鲹、美长吻鲹、游鳍叶鲹及镰鳍裸胸鲹等4种鲹科鱼类的差别,结果表明,它们脑颅上的上筛骨、侧筛骨、犁骨、额骨、眶下骨、蝶耳骨、翼耳骨和上耳骨等,咽颅上的前上颌骨、腭骨、舌颌骨、尾舌骨、鳃盖骨和上枕骨等;肩带上的主后颞骨、后颞骨、上匙骨、后匙骨等均有明显的差异,其中某些特征可能是属间或种间的鉴别依据.

溴化1-辛基-3-甲基咪唑对太行隆肛蛙蝌蚪的毒性及其红细胞微核与核异常诱导研究

采用急性和亚急性暴露方法,用离子液体溴化1-辛基-3-甲基咪唑对太行隆肛蛙(Feirana taihangni-cus)蝌蚪进行染毒,通过微核实验检测离子液体对太行隆肛蛙蝌蚪红细胞微核与核异常的诱导率.实验结果发现,离子液体对太行隆肛蛙蝌蚪的24 h LC50为82.1 mg.L-1,表明该离子液体对太行隆肛蛙蝌蚪具有生物毒性.实验结果还发现,离子液体的亚急性暴露可明显诱导太行隆肛蛙蝌蚪红细胞产生微核并导致核异常.该实验结果说明,离子液体对太行隆肛蛙蝌蚪可能具有遗传毒性.

西溪湿地中四环素类和磺胺类抗性基因的污染现状

以杭州西溪湿地底泥为研究对象,通过PCR扩增和荧光定量PCR技术对各底泥中16种四环素类和3种磺胺类抗生素抗性基因的分布及其丰度进行研究.结果发现,西溪湿地底泥中存在4种四环素类抗性基因和2种磺胺类抗性基因,表明底泥是西溪湿地抗生素抗性基因的一个主要储存库.且抗性基因在人为活动区域的分布更为广泛,这与抗生素的暴露及其在环境中的残留有关.

生物流化床废水处理技术的应用进展

流化床反应器(Fluidized bed reactor,FBR)是以液相和固相的两相混合为特征,固相颗粒通过向下或向上的循环流实现流态化的一类生物反应器,在废水处理领域有较好的发展前景.本文主要介绍了FBR的研究现状,重点综述了FBR的新发展,包括分离固体产物、逆流流化床、与生物膜结合、与各种生物电化学系统结合以及厌氧-好氧工艺组合等新方向.

厌氧氨氧化技术应用于主流城市污水处理的研究进展

长期以来,基于硝化和反硝化过程的传统生物脱氮工艺被广泛应用于废水中氮素污染物的去除,但其能耗物耗高,不能适应节能减排的时代发展要求。近年来新兴的厌氧氨氧化(Anammox)工艺,因具有低能耗、低剩余污泥量、无需外加碳源等优点而备受关注,在废水脱氮领域具有非常广阔的应用前景。综述了Anammox生物脱氮技术应用于城市污水处理的最新研究进展,探讨了主流污水处理应用Anammox所面临的挑战,并提出今后的研究重点。

多维度耦合丝状菌监测方法在污泥膨胀中的应用

丝状菌过度生长诱发的活性污泥膨胀是影响城市污水处理厂正常运行的原因之一。活性污泥体积指数(SVI)是判断污泥膨胀过程的关键指标,但无法对膨胀本质——丝状菌的动态变化提供有效信息。在某大型城市污水处理厂完整污泥膨胀及实施膨胀控制策略的过程中,利用多维度耦合丝状菌监测方法对活性污泥性状、丝状菌种群及主要致膨丝状菌动态进行了跟踪监测,结果显示在以SVI划分的不同膨胀阶段,耦合监测方法不仅可以有效定性和定量丝状菌及其种群动态变化,同时对微丝菌(Microthrix parvicella)生长位置及生长状态的准确判定为膨胀整体进程判断及膨胀有效防控提供了直观、准确的微生物信息证据。定量PCR结果显示,耦合监测方法的定量结果不仅与分子生物学精确定量结果的趋势相一致,同时具有相对快速、现场可操作性强、成本低等优势,在我国城市污水处理厂实际污泥膨胀控制中具有重要的应用价值。

活性污泥DNA样品的保存条件对聚磷菌FQ-PCR结果的影响

对目标微生物的准确定量是研究微生物群落的组成与功能的重要前提。荧光定量PCR技术作为目前流行的核酸定量分析技术,具有操作时间短,敏感性高,特异性强等特点,但也存在由客观因素导致实验结果出现显著误差的缺点。针对目前环境微生物定量方法中容易忽略的污泥样品DNA保存步骤与上机时间等环节,详细探讨了保存条件、上机批次对聚磷菌(PAOs)荧光定量PCR结果的影响。结果显示保存温度、保存时间均对标准质粒和污泥DNA样品中PAOs定量结果产生影响:模板DNA的浓度及保存时间会影响标准曲线Ct值的重复性;同一样品在相同保存温度(4℃)、不同保存时间、不同批次条件下的定量结果存在显著性差异(P<0.05);相同样品在不同保存温度、不同保存时间、同一批次条件下定量结果存在显著差异(P<0.05),平行保存于-20℃的污泥DNA样品不同保存时间、同一批次定量结果没有显著差异(P>0.05)。因此,在对活性污泥样品进行定量分析时,DNA样品应平行保存于-20℃条件,尽量避免反复冻融,并确保对比的生物样品保存及上机条件完全一致,从而减少定量结果误差。

微丝菌诱发污泥膨胀生长特性控制策略研究进展

丝状菌过量生长诱发的污泥膨胀现象是城市污水生物处理系统稳定运行面临的巨大挑战,它会造成二沉池固液分离困难、出水水质恶化,严重时导致整体生物处理系统的崩溃。其中,微丝菌(Microthrix parvicella)诱发的污泥膨胀现象因其发生普遍,后果严重,在污水日常工艺运行中对其的预防与控制显得尤为重要。目前,由于微丝菌分离困难,已获得的纯培养物在实验室条件下生长极为缓慢,限制了人们对其生理生化特性的深入认识,为建立有针对性的通用控制策略带来了相当难度。从实际污水处理厂的污泥膨胀现象调查与解析、混合培养体系富集模拟实验的结果表明,微丝菌在低水温(12～15℃)、低污泥负荷(<0.1 kg·(kg·d)^(-1)(以MLSS计))及含长链脂肪酸的环境中具有竞争生长优势,相关组学研究也证实了其对长链脂肪酸具有良好的吸收能力。丝状菌污泥膨胀的控制手段主要包括非特异性技术(如杀菌剂投加)和针对目标丝状菌的特异性技术(如絮凝剂投加、工艺运行参数调节等);而微丝菌膨胀的传统控制策略存在见效慢、成本高、通用性差等特点。迄今为止,我国针对微丝菌诱发污泥膨胀的有效特异性调控策略依然较少。因此,系统总结目前国内外对微丝菌理化特征与生长特性,详细介绍实际工艺运行过程中对其膨胀现象的控制方法,并提出可能的控制策略对未来的研究方向具有重要的现实意义。