microRNA-181b调控精神分裂症易感基因EGR3的分子机制

目的用分子生物学的方法来检测microRNA-181b对EGR3基因的靶向调控作用,为后续microRNA-181b在精神分裂症(schizophrenia)中的分子功能研究指明方向。方法运用生物信息学软件预测到精神分裂症易感基因EGR3是microRNA-181b的潜在靶基因,随后采用PCR方法扩增EGR3基因3'UTR包含与microRNA-181b种子序列相结合的片段,再将该片段连接入pmirGLO质粒载体,用双酶切和测序的方法进行鉴定,与UCSC网站上EGR3序列相同的阳性重组质粒载体记为pmirGLO-EGR3。最后将该重组体与microRNA-181b阴性对照(NC)和模拟物(mimics)分为五组转染HEK293T细胞系,进行双荧光素酶报告基因活性测定。结果双酶切和测序结果表明EGR3 3'UTR成功构建入pmirGLO载体中。荧光显微镜下观察发现细胞转染实验成功,在大约90%的细胞中可检测到荧光信号。双荧光素酶报告基因活性检测结果表明,microRNA-181bmimics与NC相比,显著性降低了报告基因的活性。结论在细胞水平证明了精神分裂症易感基因EGR3是microRNA-181b的靶基因,对后续microRNA-181b的功能研究,以及其在精神分裂症中的分子作用机制研究提供了新的线索。

Y编码样睾丸特异性蛋白5在心肌缺血再灌注损伤中的保护作用

目的:观察过表达Y编码样睾丸特异性蛋白5(TSPYL5)对缺氧/复氧损伤后H9c2细胞的影响。方法:检测TSPYL5在小鼠心肌缺血再灌注及心肌细胞缺氧/复氧损伤后的表达水平。根据表达结果上调TSPYL5,以缺氧/复氧后普通H9c2细胞为对照组,相同模型中过表达TSPYL5的H9c2细胞为实验组,比较2组间凋亡水平的差异。结果:TSPYL5在体内、体外实验中表达水平均显著下降(P<0.001)。与对照组相比,缺氧/复氧模型中过表达组p53的蛋白表达水平显著下调(25.52±0.19对47.39±0.40,P<0.05),caspase-3显著下调(60.57±0.26对108.24±0.56,P<0.05),Bcl-2显著上调(45.65±0.22对28.92±0.01,P<0.05),Tunel染色凋亡阳性率显著下调(P<0.01)。结论:TSPYL 5在心肌缺血再灌注及细胞缺氧/复氧后表达下降;过表达TSPYL5可以减轻细胞在缺氧/复氧后的凋亡水平,从而起保护作用。

心内直视术同期行Cox-Maze Ⅳ迷宫术治疗心房颤动的影响因素

目的:分析心内直视术同期行Cox-MazeⅣ迷宫术治疗心房颤动(房颤)的影响因素。方法:收集2013年1月至2018年6月心内直视术同期行Cox-MazeⅣ迷宫术的322例患者资料。根据随访期心电图结果,将患者分为随访窦性组(n=248)与随访房颤组(n=74),分析影响房颤复发的独立危险因素。结果:随访窦性组与随访房颤组在性别、高血压史、左房内径等方面的差异均有统计学意义(P均<0.05),女性、高血压史、左房内径是房颤复发的独立危险因素。结论:心内直视术同期行Cox-MazeⅣ迷宫术治疗房颤的疗效是可靠的,女性、高血压史、左房内径是影响手术疗效的危险因素。

睾丸特异性Y编码蛋白5在心肌缺血损伤中的作用

目的:探讨睾丸特异性Y编码蛋白5(TSPYL5)在心肌缺血损伤中的作用及机制。方法:在体内实验中,构建心肌缺血小鼠模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色等方法检测正常对照组和心肌缺血组小鼠心肌组织中TSPYL5的表达情况。在体外实验中,将HL-1细胞分成4组:空白对照组、TSPYL5过表达组、化学缺氧组和TSPYL5过表达+化学缺氧组,采用流式细胞仪检测凋亡率,Western blot检测活化胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、Bcl-2和p53的蛋白表达水平,qRT-PCR检测Bax和Bcl-2的mRNA表达水平。结果:与正常对照组相比,心肌缺血组小鼠心肌TSPYL 5的mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P均<0.05)。使用500μmol/L氯化钴能够成功诱导HL-1化学缺氧,与空白对照组相比,化学缺氧组凋亡细胞比例和cleaved caspase-3、p53的蛋白表达水平显著升高,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著下降,Bax的mRNA表达水平显著升高;与化学缺氧组相比,TSPYL5过表达+化学缺氧组cleaved caspase-3、p53蛋白水平显著下降,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平显著升高,Bax的mRNA表达水平显著下降(P均<0.05)。结论:TSPYL5能够通过抑制p53通路减轻缺氧诱导的心肌细胞凋亡。