β-连环蛋白反义cDNA对肝癌细胞恶性表型的影响

目的 :探讨应用反义核酸技术降低细胞内 β 连环蛋白水平对人肝癌SMMC 772 1细胞恶性表型的影响。方法 :构建 β 连环蛋白反义cDNA重组质粒 ,转染人肝癌SMMC 772 1细胞 ,筛选 β 连环蛋白低表达株 ,研究其恶性细胞表型的变化。结果 :转染 β 连环蛋白反义质粒后 ,低表达 β 连环蛋白的SMMC 772 1中c myc基因表达降低 ,细胞形态向未转化方向变化 ,细胞生长受到抑制 ,软琼脂克隆形成率下降 ,细胞周期发生改变 ,G0 G1期增加 ,S期减少。结论 :降低 β 连环蛋白表达可显著抑制 772

肝癌SMMC-7721细胞中PKB对β-连环蛋白的调控

目的 探讨在肝癌SMMC - 772 1细胞中蛋白激酶B(PKB)对 β 连环蛋白 (β catenin)的调控作用。 方法用WesternBlot和RT PCR等研究在肝癌SMMC - 772 1细胞中激活或抑制PKB后 ,β catenin基因及蛋白水平的变化。结果 以H2 O2 活化PKB ,则SMMC - 772 1细胞胞质内游离的 β catenin水平明显升高 ,而与E cadherin结合的 β catenin水平没有变化 ,β catenin的mRNA表达也未见明显改变 ;用Wortmannin抑制PKB的活性 ,可使胞质内 β catenin的含量下降。 结论 肝癌SMMC - 772 1细胞中PKB可以调控胞质中游离的 β catenin ,这为深入研究 β

全反式维甲酸通过内质网应激诱导N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V受阻的人肝癌SMMC-7721细胞凋亡

目的初步探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)诱导N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶V(N-acetylglucosaminyltransferase V,GnT-V)表达受阻的人肝癌SMMC-7721细胞(AsGnT-V/SMMC-7721)发生凋亡与细胞中内质网应激的关系。方法利用RT-PCR检测ATRA处理前后AsGnT-V/SMMC-7721细胞中内质网应激关键分子GRP78(glucose regulated protein78)、XBP1(X box binding protein1)等的变化,并用West-ern blot检测ATRA处理前后AsGnT-V/SMMC-7721细胞中内质网应激相关凋亡途径中的重要分子CHOP(C/EBP homologus protein)、caspase-9、caspase-12以及caspase-3的变化。结果GRP78和XBP1的变化表明经ATRA处理后AsGnT-V/SMMC-7721细胞的内质网应激加剧了,而与内质网应激相关的凋亡分子CHOP、caspase-9、caspase-12以及caspase-3都发生了激活。结论ATRA诱导AsGnT-V/SMMC-7721细胞发生的凋亡与内质网应激有关。