MicroRNA-195参与切应力对血管内皮细胞炎症调控作用的研究

目的研究micro RNA-195(miR-195)是否参与切应力对血管内皮细胞(ECs)炎症的调控作用。方法 (1)验证生理切应力调节ECs miRNAs的表达:15 dyne/cm2的生理切应力处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),24 h后利用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测内皮细胞相关miRNAs(miR-27b、miR-143/145及miR-195等)的表达变化;(2)miR-195与内皮细胞炎症反应的关系:体外转染miR-195mimics及inhibitors至HUVEC,通过Western blot、免疫荧光检测ECs中炎症相关因子表达及miR-195对内皮细胞的炎症控制水平。结果 15 dyne/cm^2的生理切应力处理HUVEC,24 h后miR-27b、miR-143/145及miR-195等表达上调;过表达miR-195对ECs内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的表达没有影响,但抑制了p65的磷酸化(P-p65)表达;采用miRNA inhibitors抑制内源性的miR-195后,ECs e NOS的表达下调,抑制了κB抑制蛋白(IκBα)的表达水平。免疫荧光结果显示,在ECs中过表达miR-195抑制了NF-κB的核转运,而抑制miR-195可能促进了NF-κB的核转运,促进炎症。结论生理切应力诱导miR-195表达上调,miR-195可能参与切应力对ECs炎症的调控作用。