应用SELDI-TOF-MS技术对肝损伤模型大鼠血清蛋白质表达谱的比较分析

目的:应用SELDI-TOF-MS技术对肝损伤模型大鼠血清内蛋白质表达谱进行比较分析,以揭示肝损伤模型大鼠血清促使骨髓间质细胞向肝细胞方向分化的分子基础。方法:采用2种不同蛋白质芯片CM10和IMAC3先对肝损伤模型大鼠血清进行吸附分馏,后置入蛋白质芯片阅读机,用激光解吸和离子化飞行时间质谱检测被富集到芯片样品点上的蛋白质,对肝损伤模型大鼠血清和正常大鼠血清间的蛋白质表达谱进行比较分析。结果:肝损伤大鼠血清能诱导骨髓间质细胞向肝细胞方向分化。蛋白质芯片-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)结果显示,CM10芯片共捕获到9个差异蛋白峰,其中有6个蛋白表达峰的峰值在肝损伤实验血清中明显高于对照组血清,其质荷比(m/z)分别为3480、7888、8275、8528、15101和15787;另有3个蛋白表达峰的峰值在肝损伤实验血清中明显低于对照组血清,其质荷比(m/z)分别为8833、12039和12720。IMAC3芯片共捕获到5个差异蛋白峰,其中有3个蛋白表达峰的峰值在肝损伤实验血清中明显高于对照组血清,其质荷比(m/z)分别为3481、15105和15792;另有2个蛋白表达峰的峰值在肝损伤实验血清中明显低于对照组血清,其质荷比(m/z)分别为9018和11593。结论:肝损伤模型大鼠血清内确实存在差异表达蛋白,这些差异表达蛋白很可能是决定骨髓间质干细胞分化方向的"信号分子"。

骨髓间充质干细胞移植后的肝功能重建

背景:细胞移植是治疗肝功能衰竭的一种有效方法,而理想的细胞源和最佳的移植途径一直是各实验室不断研究的目标。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对急性肝衰竭大鼠肝功能重建的影响和最佳移植途径。方法:以D-氨基半乳糖胺作为肝脏毒剂,构建雌性SD大鼠急性肝衰竭模型。以雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞为细胞源,通过腹股沟静脉和脾内移植两种途径植入肝衰竭大鼠,动态检测多项肝功能血生化指标。并以sry基因为分子标志,采用PCR技术检测骨髓间充质干细胞在肝脏内的存活状态。结果与结论:骨髓间充质干细胞经腹股沟静脉和脾内移植均可降低血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素水平,提高白蛋白合成能力,改善肝功能,降低动物死亡率。经腹股沟静脉移植组死亡率低于经脾内移植组。移植后7～30d在受体大鼠肝脏内均能检测到sry基因阳性细胞的存在,而相应对照组未能检测到sry基因阳性细胞。结果表明①骨髓间充质干细胞移植可改善急性肝衰竭大鼠的肝功能。②骨髓间充质干细胞可在受体肝脏内存活。③经腹股沟静脉移植操作简便易行,死亡率较低,是较好的细胞移植途径。

消化道类癌19例病理特征及临床分析

目的探讨消化道类癌的临床病理、免疫组化特点及诊治。方法对19例消化道类癌临床及病理资料进行复习,应用免疫组化SP法染色。结果 19例均为典型类癌,组织构型上可分为实性小巢状或岛状、梁状、腺管状、混合性等4种。免疫表型19例Syn和NSE均阳性,10例CgA阳性,13例CD56阳性。19例消化道类癌15例为直肠类癌。19例肿瘤直径均小于1.5厘米,18例肿瘤局限于黏膜层及黏膜下层,1例浸润至浅肌层,1例淋巴结有转移。结论消化道类癌以直肠类癌最多见,生物学行为低度恶性,一般不侵犯肌层,也很少转移,大多数病例可以在内镜下行黏膜切除术获得治愈。免疫组化Syn、NSE、CgA及CD56染色可作为直肠类癌的常规内分泌标记物。

磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在胃癌组织中的表达

【目的】哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在多种肿瘤组织中均有表达,但其与胃癌关系的研究国内尚无报道。本研究旨在检测中国人胃癌组织中mTOR的活化形式p-mTOR的表达,并探讨其与胃癌临床病理特征的关系。【方法】采用免疫组化方法检测181例胃癌组织中p-mTOR蛋白的表达情况,并结合患者的临床病理资料分析与其相关性。【结果】所检测的181例胃癌标本中p-mTOR蛋白表达阳性93例,阳性表达率为51.4%,p-mTOR阳性表达与胃癌的淋巴结转移及临床分期密切相关;而与年龄、性别、肿瘤大小、病理T分期等临床病理特征无显著性相关(P>0.05)。【结论】p-mTOR蛋白在胃癌组织中的阳性表达与肿瘤进展相关,可能成为预测胃癌转移的新分子标志物和治疗靶点。

结直肠腺癌中HIF-1α、VEGF的表达及其相关性

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)在结直肠正常组织、腺瘤及腺癌组织中的表达及其之间的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测64例原发性结直肠腺癌、20例腺瘤及20例正常结直肠组织中HIF-1α、VEGF蛋白的表达,分析其与临床病理特征之间的关系。结果结直肠正常组织、腺瘤及腺癌组织中HIF-1α的阳性表达率分别为15%、25%和51.6%,正常组织与腺瘤之间的差异无统计学意义(P>0.05),正常组织与腺癌、腺瘤与腺癌之间的差异具有统计学意义(P<0.05);VEGF在正常组织、腺瘤及腺癌组织中的阳性表达率分别为20%、30%和62.6%,VEGF在正常组织与腺瘤之间的差异无统计学意义(P>0.05),正常组织与腺癌、腺瘤与腺癌之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α与结直肠腺癌Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移及组织学分级明显相关(P<0.05);VEGF的表达与Dukes分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),与浸润深度及组织学分级无关(P>0.05)。HIF-1α与VEGF的表达呈显著正相关(r=0.577,P<0.01)。结论HIF-1α及VEGF蛋白可以作为检测结直肠腺瘤癌变的指标,HIF-1α及VEGF蛋白的高表达可能在结直肠癌侵袭转移过程中发挥重要作用。

胰腺类癌的临床和病理学特点分析

【目的】探讨胰腺类癌的临床和病理学特点。【方法】对1997年1月1日至2007年12月31日期间手术治疗的8例胰腺类癌临床病理资料(如肿瘤标志物、病理免疫组织化学染色、伴发其他肿瘤、误诊率、肿瘤转移率、住院死亡率、手术根治率等)进行回顾性分析,并结合国内外文献探讨胰腺类癌的临床和病理学特点。【结果】肿瘤标志物CEA、CA199、CA125、CA72-4在胰腺类癌的表达阳性率分别为0%,25%,12.5%,0%,病理免疫组织化学染色Syn、CgA、NSE、CK阳性率分别为25%,62.5%,75%,75%。胰腺类癌伴发其他肿瘤为1/4。胰腺类癌误诊率较高,8例患者中有7例误诊为其它肿瘤。胰腺类癌肿瘤总的转移率为50%,住院死亡率为37.5%,而手术根治率为62.5%。【结论】胰腺类癌误诊率高,常规血液肿瘤标志对早期发现胰腺类癌意义不大,确诊需要病理病理,临床预后较差。

黄嘌呤核苷促进骨髓间质干细胞体外快速扩增的实验研究

目的:探讨黄嘌呤核苷(Xs)对骨髓间质干细胞(BMSCs)增殖及分化状态的影响。方法:将Xs加入骨髓间质干细胞培养体系,观察它对骨髓间质干细胞增殖和分化特性的影响。结果:在Xs的影响下,传至第10代的细胞生长速率与第4代的细胞基本保持一致,无下降趋势。而对照组细胞(无Xs影响)传至第10代时,生长速率则有明显下降。经Xs促进增殖的骨髓间质干细胞仍能保持足够的肝向分化能力。结论:Xs作为非平衡细胞动力学分裂方式的抑制剂,既能实现骨髓间质干细胞的分裂方式由非平衡态向平衡态转变,又不影响其肝向分化的特性,有助于提高骨髓间质干细胞的体外增殖效率,有着广泛的应用空间。

鼻咽癌放化疗后卵巢组织冷冻及自体原位移植成功1例

1病例报告患者,32岁,因鼻咽癌放、化疗后4年发现肿瘤复发行生育力保存,于2012年7月26日就诊中山大学附属第六医院生殖医学中心。2008年患者因鼻咽癌(未分化型非角化性癌,T1N2M0,Ⅲ期)行顺铂+依托泊苷方案化疗4疗程,末次化疗时间为2008年9月17日。同期行鼻咽部放疗共35次,剂量>70 Gy。

骨髓间质细胞和非骨髓间质细胞源细胞移植后机体免疫反应差异的比较

目的:比较骨髓间质细胞(BMSCs)和非骨髓间质细胞源细胞移植后体内的免疫反应特征。方法:选用SD大鼠和新西兰大白兔作为细胞移植的受体动物,分别将大鼠BMSCs和肝细胞株BRL经静脉和皮下植入动物体内,通过分析外周血淋巴细胞和单核细胞数目变化及皮下移植位点组织病理学特征,揭示2种细胞移植后体内的免疫反应差异。结果:无论在同种异体移植组或异种交叉移植组,BMSCs所引起的淋巴细胞增殖强度均低于BRL移植组,动物对BMSCs移植的免疫反应较为迟钝;而单核细胞的增殖能力则是BMSCs移植组高于BRL移植组。组织病理学结果显示,BMSCs移植组未在移植位点附近观察到明显的细胞坏死及炎症细胞浸润。结论:由BMSCs引发的免疫反应强度低于BRL,在细胞移植中抵御免疫排斥的能力要优于BRL。

HIF-1α和PCNA在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和增殖细胞核抗原(PCNA)在结直肠癌(CRC)组织中表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测64例CRC中HIF-1α和PCNA蛋白表达情况,20例正常大肠组织作对照。结果HIF-1α蛋白在CRC中阳性表达率为51.56%,与对照组相比有显著性差异(P<0.05),且与淋巴结转移和Dukes分期有统计学意义(P<0.05)。PCNA蛋白在CRC中阳性表达率为70.31%,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。HIF-1α和PCNA之间存在显著的正相关(r=0.306,P<0.05)。结论HIF-1α在CRC的发生、发展中起重要作用,并且HIF-1α和PCNA在表达上密切相关。

微囊化肝细胞移植代偿肝功能的实验研究

目的探讨微囊化肝细胞移植对肝脏功能的代偿能力。方法以D-氨基半乳糖胺（D-gal）作为肝脏毒剂,构建SD大鼠急性肝功能衰竭模型。通过腹腔移植分别植入微囊化肝细胞和游离肝细胞。结合谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）多项血生化指标以及模型动物生存率比较,评估植入细胞对肝功能衰竭的代偿能力。结果细胞植入后12 h开始对模型动物的肝生化指标ALT、AST、TBIL、ALB产生影响,其影响力在细胞植入后24-48 h达到高峰。对比游离肝细胞,微囊化肝细胞移植对各项肝生化指标的改善尤为明显,且动物的存活率最高。结论微囊化肝细胞腹腔内移植有助于提高药物诱导急性肝功能衰竭大鼠的存活率,可明显改善急性肝功能衰竭模型大鼠的肝功能。

硼酸美蓝染色法检测幽门螺杆菌200例分析

目的探讨应用硼酸美蓝染色改良法检测慢性胃炎及胃溃疡中的幽门螺杆菌。方法应用硼酸美蓝染色法染色改良法检测幽门螺杆菌。结果位于胃窦部的慢性胃炎及胃溃疡幽门螺杆菌阳性率达94.7%,胃体部感染幽门螺杆菌的阳性率为77.8%,胃底部感染幽门螺杆菌的阳性率为58.3%,其中轻度慢性浅表性胃炎检出幽门螺杆菌阳性率为88.2%,中度慢性浅表性胃炎检出幽门螺杆菌阳性率90%,重度慢性浅表性胃炎检出幽门螺杆菌阳性率93.3%,胃溃疡幽门累杆菌检出率为90%。结论幽门螺杆菌感染与部位有关,慢性胃炎与胃溃疡感染幽门螺杆菌的检出率无明显差异。

急性肝衰竭模型构建及细胞移植途径初探

目的优化急性肝衰竭模型的构建方法，探讨细胞移植的最佳途径。方法以D-氨基半乳糖胺（D-gal）作为肝脏毒剂，构建雌性SD大鼠急性肝衰竭模型。以病理形态学和多项血生化指标综合评估肝功能损伤的状态，确定模型构建的最优方案。以此为基础，通过脾内和腹股沟静脉两种途径植入雄性SD大鼠的骨髓间质干细胞（BMSCs）。以sry基因为分子标志，采用PCR技术检测植入细胞在肝脏内的存活状态，并对两种不同的植入途径综合评估。结果（1）不同剂量的D-gal可导致不同程度的肝损伤，而1．4g/kg剂量较好地模拟了急性肝衰竭的病理生理改变且稳定性较好。（2）移植后7～30天在两组细胞移植组大鼠肝脏内均能检测到sry基因阳性细胞的存在，而相应对照组未能检测到sry基因阳性细胞的存在。结论（1）D-gal 1．4g/kg腹腔注射可以很好构建SD大鼠急性肝衰竭模型。（2）骨髓间质细胞经腹股沟静脉移植和脾内移植均可在受体肝脏内存活至少1个月。经腹股沟静脉进行移植是治疗大鼠急性肝衰竭的一种较好的途径。

斯坦纳阐释学视角下的译者主体性微探——以《丰乳肥臀》为例

传统的译论以原文和作者为中心,译者处于边缘地位,依附于作者而存在。西方翻译研究的"文化转向"以来,译者在翻译中的作用得到了关注,译者的主体性成为译介的一个热门研究课题。本文借助译者主体性的研究和乔治·斯坦纳翻译四步骤,以《丰乳肥臀》英译本为例,分析译本语言的翻译特色,并认为翻译过程中从译本的选择到作品的阐释、语言层面上的艺术再创造,都充分彰显了译者主体性。

胃肠道恶性神经外胚层肿瘤临床病理分析及文献复习

目的探讨胃肠道恶性神经外胚层肿瘤的临床病理特征、免疫表型、分子遗传学及鉴别诊断。方法对本院2015年12月收治的1例罕见的胃肠道恶性神经外胚层肿瘤进行分析并复习相关文献,观察其组织学形态及免疫组化标记结果,并采用FISH检测EWSR1基因融合情况。结果肿瘤位于小肠,呈浸润性生长,浸润小肠壁全层,肿瘤细胞圆形,短梭形,上皮样,排列成片状,巢状,并可见散在破骨细胞样多核巨细胞。核泡状,核仁明显,核分裂象易见,胞浆丰富,嗜酸性。免疫组化显示,肿瘤细胞S-100和Vimentin弥漫强阳性,CD99、CD56和Syn部分肿瘤细胞阳性,CR少许肿瘤弱阳性,Ki-67约30%阳性。荧光原位杂交结果显示EWSR1基因重排。结论胃肠道恶性神经外胚层肿瘤是一种特殊并罕见类型肿瘤,具有高度侵袭性,预后差。对该肿瘤的确诊需依靠组织学形态和免疫组化,需与其他恶性肿瘤进行鉴别。EWSR1融合基因检测有助于确诊及鉴别诊断。

鼻咽血管纤维瘤摘除术的手术配合

目的探讨鼻咽血管纤维瘤摘除术的手术配合。方法熟悉手术方法,充分准备物品器械,有条不紊、准确无误地配合等。结果圆满地完成了手术配合。结论术前充分地准备,术中快速准确地配合是手术配合成功的关键。