超声介导下犬股动脉与股静脉穿刺置管技术初探

实时超声介导穿刺技术是利用超声设备对血管进行定位,并在可视化的条件下进行穿刺置管,其在医学临床上是一种成熟、安全、有效的操作,一次性成功率高,给患者造成的伤害较小[1-2]。国外兽医临床已有超声介导下血管穿刺置管的报道[3],而国内血管穿刺置管多是通过触诊盲穿和分离血管完成[4-6],罕见超声介导下血管穿刺置管的试验。本文以比格犬为实验动物,进行超声介导下股动脉与股静脉穿刺置管,探索穿刺置管过程中的技巧,评估该技术的可行性,为该技术在兽医临床的应用提供参考。

TNF-α诱导酮病奶牛脂肪组织脂解和胰岛素抵抗

选择15头健康奶牛与15头酮病奶牛,采集血液与脂肪组织。检测两组奶牛血清中非酯化脂肪酸(nonestesterified fatty acid,NEFA)、β-羟基丁酸(BHBA)、葡萄糖(glucose)含量。利用Western blot检测脂肪组织中脂解酶HSL的磷酸化水平以及ATGL蛋白表达,胰岛素信号通路关键分子IR和Akt的磷酸化水平;利用qRT-PCR检测脂肪组织中TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平。随后从1日龄健康荷斯坦奶牛腹膜网膜和肠系膜脂肪组织分离培养原代脂肪细胞,在分化成熟的脂肪细胞中添加0、0.1、1.0、10.0μg/L的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)处理3 h,检测IR和Akt的磷酸化水平以及培养基上清中甘油(GC)含量。结果显示,与健康奶牛相比,酮病奶牛脂肪组织HSL磷酸化水平增加、ATGL蛋白表达量增加、IR和Akt的磷酸化水平降低,炎性因子TNF-α和IL-1βmRNA表达水平明显升高。此外,体外添加TNF-α显著增加HSL的磷酸化水平、ATGL的蛋白表达和培养基上清中GC含量,显著抑制IR和Akt的磷酸化水平。结果表明,TNF-α导致酮病奶牛脂肪组织脂解加剧并降低胰岛素敏感性。

Ⅰ型和Ⅱ型酮病奶牛系统性炎症和肝损伤状态的分析与比较

通过比较Ⅰ、Ⅱ型酮病奶牛血液中炎性因子和肝损伤等相关指标的差异,为奶牛不同类型酮病的诊断和防治提供数据支持。本研究选取Ⅰ、Ⅱ型酮病奶牛和健康奶牛各20头,采血后分离血浆或血清,分别检测炎性以及肝损伤相关指标。结果显示,Ⅰ、Ⅱ型酮病奶牛血液非酯化脂肪酸(NEFA)含量,促炎因子如白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量均显著高于健康奶牛,且Ⅱ型酮病奶牛血液促炎因子含量高于Ⅰ型酮病奶牛。同时,Ⅰ、Ⅱ型酮病奶牛中肝损伤标志物丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性也显著高于健康奶牛,且Ⅱ型酮病奶牛ALT和AST的酶活显著高于Ⅰ型酮病奶牛。结果表明,Ⅰ、Ⅱ型酮病奶牛均存在系统性炎症和肝损伤,且Ⅱ型酮病奶牛更加严重,本试验为奶牛酮病的综合防治奠定理论基础。

GPR120对奶牛脂肪细胞脂代谢的调节作用

为研究GPR120对奶牛脂肪细胞脂合成和脂分解的影响,缓解围产期奶牛出现的脂代谢紊乱问题,在体外培养的奶牛脂肪细胞中分别沉默GPR120和激活GPR120,采用Western Blot、qRT-PCR等技术检测脂代谢基因变化。结果表明:沉默GPR120组奶牛脂肪细胞脂合成关键酶、脂滴包被蛋白(PLIN1)和甘油三酯(TG)含量显著降低;添加GPR120激动剂组奶牛脂肪细胞脂合成关键酶和TG含量升高,激素敏感酯酶(HSL)基因表达量降低。这说明,GPR120在体外培养的奶牛脂肪细胞中能促进脂肪细胞的脂合成,抑制脂肪细胞的脂分解。