金雀异黄素对子宫内膜细胞增殖和子宫内膜容受性影响

目的建立人子宫内膜腺上皮细胞(HEEC)原代细胞系统,研究在高、低浓度金雀异黄素对不同浓度雌激素诱导下的HEEC细胞增殖的影响及其类雌激素作用改善子宫内膜容受性的途径。方法体外培养HEEC,应用CCK-8法检测高浓度(10、25、50μmol/L)和低浓度(0.01、0.1、1μmol/L)的金雀异黄素干预HEEC细胞24、48、72 h后细胞增殖的改变;同法检测高浓度雌激素(1×10^(-6)mmol/L)、低浓度雌激素(1×10^(-8)mmol/L)诱导下,金雀异黄素对HEEC原细胞增殖的影响;对比观察氟维司群(ICI-182,780)协同金雀异黄素对HEEC细胞增殖的影响的差异;激光免疫共聚焦显微镜观察HEEC细胞在雌激素作用下金雀异黄素对ERα、ERβ的蛋白表达的影响。结果金雀异黄素在0.1~50μmol/L范围内促进HEEC细胞增殖(P<0.01),作用48 h促细胞增殖作用最为明显(P<0.01),金雀异黄素组在0.1μmol/L浓度促细胞增殖作用最为明显(P<0.01),随后其促增殖作用随着作用时间和浓度呈现下降趋势。在低浓度雌二醇诱导下,金雀异黄素促进HEEC细胞增殖(P<0.01);在高浓度雌二醇诱导下,低浓度的金雀黄素对HEEC细胞有一定促增殖作用(P<0.05),高浓度金雀异黄素抑制HEEC细胞增殖。雌激素诱导下,氟维司群协调同金雀异黄抑制HEEC细胞增殖(P>0.05)。低浓度金雀异黄素提高ERα、ERβ蛋白的表达,提高ERα/ERβ的比值(P<0.05),高浓度金雀异黄素抑制ERα、ERβ蛋白的表达,并且降低ERα/ERβ的比值(P<0.05)。结论金雀异黄素在促进HEEC细胞增殖改善子宫内膜容受性同时可有效防止子宫内膜过度增殖。

基于网络药理学联合GEO芯片探讨金雀异黄素治疗子宫内膜癌的机制

目的采用网络药理学联合GEO数据库差异基因分析的方法,探讨金雀异黄素(genistein)治疗子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)的潜在作用机制。方法依托TCMSP等8个数据库获得金雀异黄素的靶标基因,并通过Uniport蛋白质数据库进行名称规范;然后,运用GEO数据库获取子宫内膜癌GSE17025数据集,并运用R语言获取其差异表达的基因;进而,作金雀异黄素靶标基因与子宫内膜癌差异基因的映射集合,再将交集靶点提交至STRING平台获得蛋白互作网络,并采用Cytoscape 3.7.2进行网络拓扑分析,筛选重要靶点;最后,对交集靶点进行GO注释和KEGG富集分析。结果金雀异黄素作用于70个交集靶点发挥对子宫内膜癌的治疗作用,其中重要靶点有STAT3、BIRC5、MKI67等基因,主要富集在IL-17(IL-17 signaling pathways)、p53(p53 signaling pathway)、TGF-β(TGF-beta signaling pathway)等多条信号通路上。结论金雀异黄素通过多靶点、多途径治疗子宫内膜癌,其可能是通过IL-17、p53、TGF-β等信号通路发挥治疗作用。此研究为深入阐释金雀异黄素治疗子宫内膜癌的临床研究及进一步实验验证提供了思路。