抗氧化剂抗氧化活性到促氧化作用的转变

本文总结了近年各类常见抗氧化剂在高剂量下发现促氧化作用的研究报道,旨在探索不同剂量水平下各类抗氧化剂所体现出的两面性是否为该类物质的一般特性,对进一步深入认识氧化应激和抗氧化机制具有重要意义,同时为该类物质的安全使用提供参考。

5-羟甲基糠醛的急性毒性和细胞毒性研究

目的考察5-羟甲基糠醛(5-HMF)对ICR小鼠的急性毒性及其对肥大细胞模型RBL-2H3和P815细胞的毒性。方法用8种不同剂量的5-HMF溶液对ICR小鼠进行尾静脉给药,每日观察小鼠行为情况,测定小鼠体重,记录死亡数,并计算半数致死量(LD50),观察期结束进行病理学检查;采用MTT法测定5-HMF溶液对RBL-2H3细胞和P815细胞的毒性影响,并计算IC_(50)。结果小鼠尾静脉给药后低剂量出现共济失调、强直性抽搐等现象,随着剂量升高,出现以上现象频率升高;在体重方面,最高剂量雄性给药后d1到恢复期结束d14,与对照组相比体重显著降低(P<0.01),雌鼠给药后d1~d14,体重比对照组显著降低(P<0.01),次高剂量雌鼠给药后d1、d11、d14体重有所减低(P<0.05),d4~d7显著降低(P<0.01);存活动物组织病理学检查结果提示5-HMF组诊断为慢性进行性肾病,利用Bliss法计算小鼠ICR急性毒性LD50为871.12 mg·kg^(-1);利用MTT法测定5-HMF对于肥大细胞RBL-2H3和P815的IC50分别为4.96 mM和7.43 mM。结论 5-HMF具有一定的急性毒性,LD50为871.12 mg·kg^(-1),毒性靶器官为肾脏。对两种细胞的IC_(50)分别为4.96 mM和7.43 mM,上述结果为该物质的安全应用及其对肥大细胞的脱颗粒作用深入研究提供了参考数据。

不同周龄SHR、Wistar大鼠血压及心电图背景数据的建立

目的建立不同周龄SHR、Wistar大鼠血压及心电图背景数据参考值。方法分别选用12只SHR、Wistar大鼠,从6周龄开始对其体质量、血压及心电图各指标进行了为期17周的连续监测。结果 SHR大鼠6周龄开始,体质量增长缓于Wistar;血压指标包括心率、收缩压、舒张压、平均压均高于Wistar大鼠,并从10周龄开始血压趋于稳定;心电图指标,SHR、Wistar大鼠除部分间期如QT间期、ST间期指标6到9周龄数据偏低,其余指标均较稳定,其中RR间期、QT间期指标,SHR大鼠有高于Wistar大鼠的趋势。结论初步建立了6到22周龄的SHR、Wistar大鼠心血管系统的背景数据参考值,为其进一步应用提供了参考。

注射用重组人凝血因子Ⅷ食蟹猴单次及反复给药毒性研究

目的通过单次及30天重复给予食蟹猴静脉注射重组人凝血因子Ⅷ,观察可能出现的毒性反应性质和程度,为临床安全用药提供参考资料。方法急性毒性实验采用致死剂量法,一次静脉给药后,观察食蟹猴可能出现的急性毒性反应。长期毒性实验中连续给药30天,停药后恢复期观察4周,期间观察食蟹猴各项指标变化。结果急性毒性实验除61 250 IU·kg^(-1)组动物给药后第14天乳酸脱氢酶(LDH)与药前相比升高外,其他均未见明显异常。30天连续给药实验中,出现与凝血因子Ⅷ抗体和抑制物相关的临床症状,未发现与给药明确相关的毒性病理改变。结论食蟹猴单次静脉注射用重组人凝血因子Ⅷ的最大耐受剂量大于61 250 IU·kg^(-1);30天重复给药未见明显毒性反应剂量(NOAEL)为250 IU·kg^(-1)。

抗过敏药物临床应用研究进展

过敏类疾病作为一种慢性疾病,包括过敏反应和类过敏反应,严重影响着患者身体健康和生活质量。目前,抗过敏药物主要包括抗组胺药物、白三烯受体拮抗剂、肥大细胞膜稳定药、糖皮质激素以及钙通道阻断剂。随着相关研究的不断深入,发现一些中药、天然产物及生物制品在治疗过敏类疾病方面也显示良好的效果。本文对抗过敏药物进行梳理,对各种药物的疗效、作用机制及不良反应进行总结,并对未来抗过敏药物可能的发展方向进行展望,以期为后续抗过敏药物研究工作提供参考。

5-羟甲基糠醛及其二聚体OMBF引发Ⅰ型超敏反应毒性评价与机制初探

目的对5-羟甲基糠醛及其二聚体OMBF是否引发I型超敏反应进行评价,并初步探索其作用机制。方法分为体内实验和体外实验。体内实验选取雄性BN大鼠,随机分为7组:生理盐水对照组(NS),佐剂对照组(Adj.),模型组,5-HMF低、高剂量组,OMBF低、高剂量组。各组大鼠分别给予生理盐水、佐剂或相应浓度的药物佐剂混悬液,30 min后腹主动脉采血,测定血清中IgE、IgG和IL-4含量。体外实验采用RBL-2H3细胞系,分组同体内实验。采用甲苯胺蓝染色观察给药前后细胞脱颗粒情况;测定药物作用后细胞上清中β-HEX、His的释放率。通过Western blot技术初步探索5-HMF及其二聚体OMBF诱导Ⅰ型超敏反应的作用机制。结果体内实验显示,血清中各指标除5-HMF低剂量作用下IgG未见明显差异外,其余均显著性升高。体外实验研究表明,低、高剂量组均出现了细胞脱颗粒现象,测定的β-HEX和His释放量均出现了不同程度的升高。结论5-HMF及其二聚体OMBF作为小分子过敏原可诱导I型超敏反应的发生,且发挥免疫毒性可能与MAPK家族磷酸化蛋白的上调水平有关。

幼年巴马小型猪背景数据的建立和结果分析

目的建立不同日龄幼年巴马小型猪体重、体长、体温、心电指标、血液学指标、血液生化指标、凝血指标、免疫学指标、尿液学指标、胫骨长度、脏器重量、脏器系数等参数的背景数据。方法 30只幼年巴马小型猪(15雌,15雄),对其进行正常饲养管理,36日龄和64日龄分别剖杀18只(9雌,9雄)和12只(6雌,6雄)。检查指标为,8日龄~64日龄体重、体长、体温,7日龄、35日龄、63日龄心电图,36日龄和64日龄血液学指标、血液生化指标、凝血指标、T细胞亚群、胫骨长度、部分脏器脏器重量和脏器系数,使用SPSS统计软件计算各项指标均值和标准差。结果及结论初步建立了不同日龄巴马小型猪各项生理指标的背景数据库,为幼年巴马小型猪在非临床安全性评价的应用提供参考。

HPLC梯度洗脱法同时测定保安万灵丹中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的含量

目的：建立同时测定保安万灵丹中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素含量的方法。方法：采用高效液相梯度洗脱法,色谱柱为C18色谱柱（200 mm×4.6 mm,5μm）,流动相A为甲醇-乙腈（2∶1）,流动相B为0.1%磷酸水溶液,体积流量1.0 m L·min-1,检测波长分别为254 nm（升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷）、203 nm（茅术醇和β-桉叶醇）和340 nm（苍术素）。结果：5种成分线性范围分别为升麻素苷4.30~86.00μg·m L-1（r=0.9994）、5-O-甲基维斯阿米醇苷5.85~117.00μg·m L-1（r=0.9997）、茅术醇16.42~328.40μg·m L-1（r=0.9993）、β-桉叶醇15.16~303.20μg·m L-1（r=0.9999）、苍术素12.78~255.60μg·m L-1（r=0.9995）;精密度、重复性及稳定性试验RSD〈2.0%;平均加样回收率（n=6）分别为升麻素苷97.49%（RSD为1.45%）、5-O-甲基维斯阿米醇苷96.81%（RSD为0.94%）、茅术醇98.60%（RSD为1.65%）、β-桉叶醇97.96%（RSD为1.38%）、苍术素99.22%（RSD为1.24%）。结论：该方法操作简便,结果准确,重复性好,可作为保安万灵丹的含量控制方法。

小鼠腘窝淋巴结模型评价3种中药注射液的潜在免疫毒性

目的:利用小鼠直接腘窝淋巴结(D-PLNA)和报告抗原腘窝淋巴结(RA-PLNA)对脉络宁、生脉、丹香冠心3种中药注射液的免疫毒性进行评价。方法:D-PLNA模型中设脉络宁、生脉、丹香冠心3种中药注射液,生理盐水对照组和阳性药物苯妥英钠对照组;RA-PLNA模型中上述各组分别加入报告抗原三硝基苯基聚蔗糖(TNP-Ficoll)和三硝基苯基卵蛋白(TNP-OVA),每组8只BALB/c小鼠,于左足趾部给药50μL。第7天处死小鼠分离腘窝淋巴结,研磨制备淋巴单细胞悬液并进行细胞计数,计算细胞指数;将细胞悬液培养于96孔板中,加入刺激剂共孵育后,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞上清液中免疫球蛋白Ig E和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量。结果:与生理盐水对照组比较,小鼠D-PLNA模型中,仅丹香冠心注射液组腘窝淋巴结细胞数显著增加(P<0.05);小鼠RA-PLNA模型中,各给药组与TNP-Ficoll作用时,细胞数目和MCP-1浓度均显著升高(P<0.05),各给药组与TNP-OVA作用时,脉络宁注射液能显著刺激IgE分泌,同时丹香冠心注射液IgE和MCP-1含量均显著升高(P均<0.05)。结论:脉络宁和生脉注射液仅在加入报告抗原后引起小鼠淋巴结阳性反应,说明两者中可能存在作为半抗原的小分子物质诱发Ⅰ型超敏反应,而丹香冠心注射液成分复杂,可能直接诱导Ⅰ型超敏反应,也可能存在新的抗原或表位诱发免疫反应。

十三味马钱子丸中士的宁和马钱子碱的HPLC测定

目的：建立一种同时测定十三味马钱子丸中士的宁和马钱子碱的高效液相色谱法。方法：采用高效液相法在同一色谱条件，Dikma C18（4.6 mm×250 mm，5μm）色谱柱；流动相为乙腈-0.01 mol/L庚烷磺酸钠与0.02 mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值2.8）（10：90）；检测波长为260 nm；柱温为30℃；流速为1.0 mL/min；对十三味马钱子丸中两种成分同时进行测定。结果：士的宁、马钱子碱分别在0.262～1.310μg（r=0.9998）、0.172～0.860μg（r=0.9995）线性关系良好。两者的平均回收率分别为97.96%（RSD为1.95%）、98.06%（RSD为2.01%）。结论：所建立的方法简便、专属、重复性好，可用于十三味马钱子丸的质量控制。

中药注射剂过敏类反应研究新思路

中药注射剂（traditional chinese medicine injection,TCMI）引发的药物不良反应是限制其使用的重要因素,据统计,被列入中国国家基本药物目录（2004版）中的33种TCMI均有临床不良反应事件发生,其中过敏反应占75%,具体表现为皮肤瘙痒,各种过敏性皮疹,粘膜水肿等,且具有不良反应发生时间较早,累及多器官,涉及多品种的特点[1]。

中国药品非临床研究质量管理规范发展情况的回顾与展望（英文）

《药品非临床研究质量管理规范》(GLP)在药物临床前研究中发挥重要作用,同时也是药物研发过程中的重要环节。中国有关GLP的相关工作起步于上世纪90年代末期。经历近20年的飞速发展,我国已经完成了GLP体系的初步建设工作。本文首先回顾了该领域GLP机构的基本情况,介绍了中国GLP机构的年增长数及总数的变化情况、现有GLP机构类型及其具体服务能力,而后选择"十一五"、"十二五"期间受到新药重大专项支持的部分机构进行了重点介绍。虽然我国GLP机构在硬件和软件的建设中都取得了重大进展,但仍存有一些问题,如创新能力不足,故我国GLP的建设仍需进一步完善和发展。

注射用重组人凝血因子Ⅷ大鼠单次与反复给药毒性研究

目的进行注射用重组人凝血因子Ⅷ的大鼠药物安全性评价,为临床安全用药提供参考信息。方法急性毒性试验对SD大鼠采用最大给药剂量法(66 460 IU/kg·bw),观察给药后大鼠出现的毒性反应。反复给药毒性试验设50、250和1 250 IU/kg·bw 3个给药组(分别相当于临床剂量的1、5和25倍)及溶剂对照组,连续给药30 d,停药后恢复期观察4周。结果急性毒性试验,动物临床观察结果、体重、大体解剖结果,给药组与对照组相比未见任何显著性差异。30 d连续给药试验中,出现与凝血因子Ⅷ抑制物相关的临床症状,如APTT延长、出血和A/G降低等,未发现与给药明确相关的毒性病理改变,未见明显与给药相关的延迟或蓄积毒性。结论 SD大鼠单次静脉注射注射用重组人凝血因子Ⅷ的最大耐受剂量大于66 460 IU/kg·bw;30 d重复给药未见明显毒性反应剂量(NOAEL)为1 250 IU/kg·bw。本试验结果为该品的临床应用提供了参考数据。

多波长HPLC梯度洗脱法同时测定保安万灵丹中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的含量

目的：建立同时测定保安万灵丹中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素含量的方法。方法：采用多波长HPLC梯度洗脱法：色谱柱为C18柱（200mm×4.6mm,5μm）;流动相A为甲醇-乙腈（2：1）,流动相B为0.1%磷酸水溶液,流速为1.0mL·min-1;进样量为20μL;检测波长分别为254nm（用于升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷）、203nm（用于茅术醇和β-桉叶醇）和340nm（用于苍术素）。结果：升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的线性范围分别为4.30-86.00mg·L^-1（r=0.9994）、5.85-117.00mg·L^-1（r=0.9997）、16.42-328.40mg·L^-1（r=0.9993）、15.16-303.20mg·L^-1（r=0.9999）和12.78-255.60mg·L^-1（r=0.9995）;精密度、重复性及稳定性试验中所测各目标组分峰面积的RSD均小于2.0%;升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、茅术醇、β-桉叶醇和苍术素的平均加样回收率/RSD（n=6）分别为97.49%/1.45%、96.81%/0.94%、98.60%/1.65%、97.96%/1.38%和99.22%/1.24%。结论：本法操作简便、结果准确、重复性好,可用作保安万灵丹的质量控制方法。

脾肾双补丸质量控制方法的研究

目的对脾肾双补丸的质量控制方法进行研究。方法对脾肾双补丸处方中的陈皮采用薄层色谱法进行定性鉴别,对牡丹皮中的丹皮酚采用高效液相色谱法进行含量测定。结果薄层鉴别中,橙皮苷斑点清晰,且阴性无干扰;含量测定中,丹皮酚在4.64~16.24μg/mL范围内,峰面积与对照品质量浓度呈良好的线性关系;平均回收率为102.4%,RSD=1.80%（n=6）。结论所建立的方法操作简单,专属性强,重现性良好,可作为该制剂的质量控制方法。