阻断氯通道对鼻咽癌细胞凋亡和细胞增殖的影响

目的研究阻断氯通道对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞凋亡和细胞增殖的影响,探讨氯通道在CNE-2Z细胞凋亡中的作用。方法用顺铂(CDDP)诱导细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖。结果顺铂(1.5μg/ml)处理细胞48 h后可检测出凋亡峰,氯通道阻断剂NPPB(50μmol/L)阻抑顺铂诱导的细胞凋亡及细胞增殖抑制。结论氯通道参与了CNE-2Z细胞凋亡过程的调控。

氯通道在顺铂诱导的鼻咽癌细胞凋亡性容积减小中的作用

目的探讨氯通道在凋亡诱导剂诱导的鼻咽癌凋亡性细胞容积减小中的作用以及对凋亡的影响。方法用顺铂(cDDP)诱导建立CNE-2Z细胞凋亡模型,用流式细胞仪检测细胞凋亡,采用Scion Image图像分析软件控制定时拍摄固定视野活细胞图像,检测细胞容积变化。结果①cDDP诱导的细胞凋亡早期即可观察到细胞容积的减小。在连续观察的6 h中,细胞体积持续减小,6 h末细胞容积减少14.2%±2.6%。②氯通道阻断剂NPPB(100μmol/L)明显抑制cDDP诱导的凋亡性容积减小,抑制率为98.6%±1.8%。③cDDP作用CNE-2Z细胞48 h后,诱导的细胞凋亡率为23.1%±2.5%,而在NPPB的保护作用下,凋亡率下降到3.8%±0.5%,抑制率为83.5%±10.4%。结论氯通道激活引起的细胞容积减小是介导细胞凋亡的机制之一。

贵州野生天麻遗传多样性的AFLP指纹分析

目的研究野生天麻的遗传多样性,为合理利用野生天麻种质资源、为天麻的进一步系统选育研究提供一定的理论依据。方法利用AFLP技术,采用8对M+3和P+3引物组合对23份贵州野生天麻品种进行了总基因组DNA水平上的多态性检测,用NTSYSpc-2.10 s软件的UPGMA方法对检测结果进行聚类。结果共获得552条可统计的条带,其中396条呈多态性,多态性带百分率约72%。UPGMA聚类可以将贵州不同产地的野生天麻很好地区分开来。结论该实验揭示了贵州野生天麻种质丰富的遗传多样性,聚类分析结果表明多数来源地相同的天麻种质表现出较为密切的亲缘关系。

他莫昔芬对不同生长周期鼻咽癌细胞容积激活性电流的作用

目的:研究Cl-通道抑制剂他莫昔芬(tamoxifen)对G1期和S期鼻咽癌细胞容积激活性电流的抑制效应。方法:运用血清饥饿法或化学药物双阻断法分别将鼻咽癌低分化上皮细胞(CNE-2Z)同步化至G1或S期,用膜片钳技术研究不同细胞周期细胞容积激活性氯通道对阴离子的通透性及他莫昔芬对CNE-2Z细胞容积激活性电流的作用。结果:47%低渗刺激下,G1期和S期细胞产生容积激活性电流,G1期的电流密度大于S期。10-30μmol/L他莫昔芬能完全抑制G1期和S期容积激活性电流,但随浓度升高,达到完全抑制效应所需要的时间缩短。G1期或S期细胞电流被完全抑制的时间有明显差异,在相同浓度他莫昔芬作用下,G1期细胞达到最大抑制效应时间明显短于S期细胞。G1期与S期细胞容积激活性氯通道对阴离子的通透性均为I->Cl->葡萄糖酸根离子,但G1期细胞对I-的通透性高于S期,S期细胞对葡萄糖酸的通透性高于G1期。结论:CNE-2Z细胞G1期与S期的容积激活性电流密度及对阴离子的通透性有差异,G1期和S期细胞对他莫昔芬敏感性不同,提示CNE-2Z细胞对他莫昔芬敏感的容积激活性氯通道在不同生长周期中表达有差异。

高质量天麻基因组DNA的提取

以新鲜天麻块茎为试验材料,采用改良CTAB法提取天麻基因组DNA用于遗传分析和分子标记辅助育种。结果表明,改良CTAB法提取的天麻基因组DNA产量高、纯度高;PCR扩增条带清晰、明亮,无杂带和脱尾;能满足AFLP和SSR的分析要求。说明改良CTAB法能获得高质量天麻基因组DNA。

顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞氯电流为非钙激活氯电流

目的:探讨顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道电流是否为钙激活的氯电流。方法:采用膜片钳全细胞记录技术记录细胞内/外无Ca2+及钙通道阻断剂对顺铂激活氯电流的影响,并用高渗灌流液观察顺铂激活氯电流的容积敏感性。结果:去除细胞外液的Ca2+后,5μmol/L顺铂能诱发氯电流,且电流大小与细胞外有Ca2+时无明显差异,但潜伏期与达峰时间延长。细胞内外均无Ca2+对顺铂激活氯电流未产生影响。钙通道阻断剂nifedipine未能抑制顺铂诱发的氯电流。但细胞外灌流高渗液几乎可完全抑制顺铂激活的氯电流。结论:顺铂激活的氯通道开放不依赖于细胞内/外的Ca2+,该通道不是钙激活氯通道而很可能是容积敏感性氯通道。

天麻扩增酶切片段长度多态性反应体系的优化

以新鲜天麻为材料,优化天麻扩增长度多态性(AFLP)反应体系中的几个关键参数。结果表明,用100～200ng/μL的天麻DNA2.5μL,反应体系25μL,37℃酶切连接过夜,酶切连接效果最佳;预扩产物稀释20倍,TaqDNA聚合酶为1 U,Mg2+(20 mM)1.5μL、dNTP(2 mM)2μL时选扩条带最清晰。体系优化后,扩增产物稳定,条带十分清晰,无背景干扰,这为构建天麻的AFLP指纹图谱和分子标记辅助育种提供了有力支撑。

2-RRC-SPS并联机器人工作空间的研究

提出了一种并联机器人工作空间分析的解析方法,该方法以曲面分析为基础,结合并联机器人的运动特性,得到了并联机器人工作空间边界曲面的方程.以2-RRC-SPS并联机器人为例,分析计算了其工作空间.在此基础上,描绘出了并联机器人工作空间边界曲面及截面视图.分析结果表明2-RRC-SPS并联机器人的理论工作空间是一个不规则的实心球体,该机构具有几何形状规则的作业空间,是一种较为理想的能实现三维移动操作的并联机构选型,获得的结果可应用于该并联机构的设计之中.

多种教学方法在生理学《消化与吸收》中的应用与体会

生理学是一门重要的医学基础理论课程,知识点多,理论性强,内容抽象,同学们普遍反映较难以理解和记忆。作为教师,在课堂教学过程中应根据不同内容恰当使用不同的方法,帮助学生理解和记忆,并通过精心设计互动环节,加强师生交流,激发学生的学习热情,提高教学效果。以《消化与吸收》一章为例介绍了步步推理,实现知识点之间的自然过渡;从全局出发,树立整体观念;对比讲解,主动探究异同;精心设计提问,层层解疑等多种教学方法在生理学教学中的应用。

高校学生考试及格率下降原因探析

大学生考试及格率下降这一现象客观存在。本文从多个方面探讨了大学生考试及格率下降的原因,并对提高学习成绩提出了一些合理建议。

法舒地尔促进大鼠骨髓间充质干细胞分化生成的内皮细胞迁移及血管新生

本文旨在研究Rho激酶特异抑制剂法舒地尔(HA-1077)对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)分化生成的内皮细胞的迁移和血管新生的影响,及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的关系。实验用第2～3代rBMSCs,内皮细胞生长培养基EGM-2诱导10～14d,检测诱导后细胞的内皮标志。取诱导鉴定后的细胞,用跨膜趋化实验和划痕实验观察细胞的迁移率,用ECMatrixTM凝胶体外血管新生实验观察血管新生情况。结果显示,HA-1077能促进细胞迁移,其作用随浓度增高而增强,与VEGF有明显的协同效应。细胞在ECMatrixTM凝胶上37oC孵育12h,细胞定向迁移,呈多边形排列,出芽,伸出的细长突起相互连接,形成封闭的多边形和复杂的毛细血管样网络结构。HA-1077还能促进血管新生,新生毛细管总长度明显多于对照组(P<0.05)。在高浓度HA-1077(60mmol/L)组中,细胞的主要表现为原位出芽,伸出细长突起,形成网络。当HA-1077与VEGF联合应用时,细胞的表现以形成复杂的毛细血管样网络结构为主。上述结果提示,HA-1077能促进rBMSCs分化生成的内皮细胞发生迁移和血管新生,并与VEGF有一定程度的协同作用。