吡柔比星通过PLCε-Bcl-2通路抑制膀胱癌细胞增殖

目的探讨吡柔比星对膀胱癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法膀胱癌细胞T24和BIU-87分别用0.4、0.8、1.6、3.2mg/L的吡柔比星处理24、48、72h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR、RT-PCR检测磷脂酶Cε(PLCε)mRNA及凋亡调控基因Bcl-2mRNA的表达,蛋白质印迹法检测PLCε蛋白的表达。将膀胱癌细胞分为空白组、吡柔比星处理组、Ad-shPLCε处理组、吡柔比星联合PLCε干扰腺病毒载体(Ad-shPLCε)处理组,检测并比较各组细胞增殖和Bcl-2蛋白的表达量。结果在膀胱癌细胞T24、BIU-87中,吡柔比星对细胞的抑制率呈浓度、时间依赖性,即随着药物浓度增加、处理时间延长,细胞抑制率升高;吡柔比星促进T24和BIU-87细胞凋亡,并且抑制PLCε和Bcl-2表达。吡柔比星处理组、Ad-shPLCε处理组、Ad-shPLCε联合吡柔比星处理组均能抑制细胞增殖和Bcl-2表达,且Ad-shPLCε联合吡柔比星处理组的抑制作用高于吡柔比星处理组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论吡柔比星能有效抑制膀胱癌细胞的增殖,可能与其抑制PLCε癌基因及下游Bcl-2基因的表达有关。

S-腺苷甲硫氨酸通过hepaCAM抑制膀胱癌细胞增殖迁移

目的:探究S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)通过hepaCAM对膀胱癌(bladder cancer,BCa)细胞增殖和迁移的影响及其可能的分子机制。方法:不同浓度SAM作用于体外培养的T24和BIU细胞,四甲基偶氮唑盐(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)法检测SAM对细胞增殖的影响。用不同浓度的SAM(0、0.8、1.6 mmol/L)处理T24和BIU细胞72 h后,Real-time PCR和Western blot法检测甲基结合蛋白-2(methyl DNA-binding domain protein,MBD2)、组蛋白去乙酰化酶-1(histone deacetylases,HDAC1)以及肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)的表达;划痕及Transwell实验检测各组细胞的迁移能力;克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成能力。结果:SAM抑制T24和BIU细胞生长且与药物浓度和作用时间呈正相关。与0 mmol/L组相比,0.8 mmol/L的SAM处理T24和BIU细胞72 h后MBD2 m RNA表达明显降低(P=0.048;P=0.038),蛋白表达明显降低(P=0.001;P=0.000);0.8 mmol/L的SAM处理T24细胞72 h后HDAC1mRNA和蛋白水平明显降低(P=0.000;P=0.001);0.8 mmol/L的SAM处理BIU细胞72 h后HDAC1 m RNA水平无统计学差异(P=0.140),蛋白表达明显降低(P=0.004);0.8 mmol/L的SAM处理T24和BIU细胞72 h后hepaCAM m RNA水平明显增加(P=0.003;P=0.008),蛋白表达无统计学差异(P=0.770;P=0.381);1.6 mmol/L的SAM处理T24和BIU细胞72 h后MBD2 m RNA水平明显降低(P=0.003;P=0.000),蛋白表达明显降低(P=0.001;P=0.000);HDAC1 m RNA水平明显降低(均P=0.000),蛋白表达明显降低(P=0.001;P=0.000);hepaCAM mRNA和蛋白表达均明显增加(均P=0.000)。划痕及Transwell实验结果显示SAM处理T24和BIU细胞72 h后迁移能力受到明显抑制(P<0.05)。克隆形成实验结果显示SAM处理T24和BIU细胞72 h后细胞克隆形成能力明显降低(P<0.05)。结论:SAM可通过MBD2/HDAC1逆转hepaCAM的表达,抑制BCa细胞的增殖及迁移能力。

肝细胞黏附分子对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响

目的利用Affymetrix基因表达谱芯片探讨肝细胞黏附分子(hepaCAM)对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响及作用的分子机制。方法运用Affymetrix Human plus 2.0全基因组芯片检测膀胱移行癌细胞株EJ细胞腺病毒-绿色荧光蛋白-hepaCAM感染组与腺病毒-绿色荧光蛋白感染组的基因表达谱,用SAM法进行差异基因分析、DAVID软件进行基因本体论分析及wikiPathway分析,并用RT-PCR和Western blot验证芯片结果。结果 hepaCAM能引起EJ细胞系基因表达谱的广泛变化,表达差异超过2倍以上的基因共2469个,其中上调基因1602个、下调基因867个。这些差异表达的基因功能主要涉及细胞周期、细胞增殖调节等方面。用RT-PCR对差异基因DNA修复蛋白,肝脏激酶B1和细胞周期蛋白D1进行验证,结果与基因芯片相符;进一步在3细胞株中用Western blot佐证DNA修复蛋白、肝脏激酶B1变化与芯片结果一致。结论 hepaCAM能够诱导EJ细胞基因表达谱的广泛变化,在基因水平通过多条通路作用于膀胱癌细胞。

氨基端PLCε基因的克隆、原核表达及抗血清的制备

目的通过在原核系统中表达人磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)基因,制备兔抗PLCε的抗血清,并验证其特异性。方法应用RT-PCR从人膀胱癌细胞的cDNA中克隆出部分PLCε基因,构建重组表达载体PGEX-6P-1/PLCε,并转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导表达GST-PLCε融合蛋白,通过GST亲和层析系统纯化重组蛋白,超滤后免疫家兔,获得家兔抗PLCε的抗血清。采用ELISA检测抗血清效价,Western blot测定其特异性。结果 RT-PCR扩增出336 bp的PLCε基因,并成功构建重组质粒PGEX-6P-1/PLCε,质粒测序结果显示,目的基因序列与GenBank中PLCε基因序列完全一致。将纯化后的GST-PLCε蛋白免疫家兔,获得抗血清;ELISA效价1∶16 000以上;Western blot结果显示,该抗血清与原核表达的GST-PLCε融合蛋白和人膀胱癌T24细胞株表达的PLCε蛋白特异性结合。结论在原核细胞中表达了PLCε蛋白,制备了家兔抗人PLCε的抗血清,可用于相关肿瘤检测,为进一步研究PLCε蛋白功能和作用机制奠定了基础。

丙型肝炎感染者肠道菌群与血清炎症因子及肝功能水平的关系

目的分析丙型肝炎感染者肠道菌群与血清炎症因子及肝功能水平的关系。方法选取2018—2019年医院收治的42例丙型肝炎感染者作为研究组,选取同期于医院进行体检的42名健康人作为对照组,检测所有受试者大便标本中双歧杆菌、大肠杆菌、乳酸杆菌、屎肠球菌水平,和血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活力和总胆红素(TBil)含量。比较两组上述肠道菌群、血清炎症因子及肝功能水平的差异,并分析丙型肝炎感染者肠道菌群指标与血清炎症因子及肝功能水平的相关性。结果研究组肠道双歧杆菌、乳酸杆菌水平低于对照组,大肠杆菌、屎肠球菌高于对照组(P值均<0.001);丙型肝炎肝纤维化组双歧杆菌、乳酸杆菌水平低于单纯丙型肝炎感染组(P值均<0.001),大肠杆菌、屎肠球菌均高于单纯丙型肝炎感染组(P值均<0.001);研究组炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α水平高于对照组,肝功能指标ALT、AST、ALP及TBil水平高于对照组,以上差异均有统计学意义(P值均<0.001)。肠道大肠杆菌、屎肠球菌与IL-6、IL-8、TNF-α、ALT、AST、ALP、TBil呈正相关(P值均<0.001),肠道双歧杆菌、乳酸杆菌与IL-6、IL-8、TNF-α、ALT、AST、ALP、TBil呈负相关(P值均<0.001)。结论丙型肝炎感染者肠道菌群、血清炎症因子、肝功能指标均呈现出异常表达,且肠道菌群与血清炎症因子、肝功能指标间关系密切,应在临床治疗工作中给予密切关注。

血清p2PSA及β2-MG和TAP水平联合检测在早期前列腺癌诊断中的应用研究

目的 探讨血清前列腺特异性抗原同源异构体2(p2PSA)、β2-微球蛋白(β2-MG)、异常糖链糖蛋白(TAP)水平联合检测在早期前列腺癌诊断中的应用价值。方法 选择2023年1至2024年1月河南省人民医院收治的68例前列腺癌患者,同时选取同期进行体检的68例男性健康体检者为研究对象,所有对象均采血进行检验,检测血清p2PSA、β2-MG、TAP间的差异;比较不同前列腺癌分期患者血清p2PSA、β2-MG、TAP水平的差异;分析p2PSA、β2-MG、TAP单独检测及联合检测的灵敏度、特异度和符合率。结果 前列腺癌组血清p2PSA、β2-MG、TAP水平高于健康体检组(P<0.05);Ⅰ-Ⅱ期患者p2PSA、β2-MG、TAP水平低于Ⅲ-Ⅳ期患者(P<0.05);p2PSA、β2-MG、TAP联合检测的灵敏度(95.59%)、特异度(89.71%)及符合率(92.65%)均高于单独检测(P<0.05)。结论 血清p2PSA、β2-MG、TAP联合检测在前列腺癌的早期诊断中具有一定的价值,有助于减少误诊、漏诊发生。

前列腺特异性抗原同源异构体2及其百分比和前列腺健康指数在鉴别良恶性前列腺疾病中的价值

目的通过实验研究前列腺特异性抗原同源异构体2(prostate-specific antigen isoform 2,p2PSA)、前列腺特异性抗原同源异构体2百分比(prostate-specific antigen isoform 2 percentage,p2PSA%)和前列腺健康指数(prostate health index,PHI)在鉴别良恶性前列腺疾病中的价值。方法以2021年3月至2023年5月河南省人民医院收治的80例经穿刺活检确诊的前列腺疾病患者为研究对象,根据病情诊断将所有前列腺疾病患者分为两组,一组为良性前列腺疾病组(良性组),共42例患者;另一组为恶性前列腺疾病,即前列腺癌组(恶性组),共38例患者。采集所有研究对象空腹时间8 h以上的静脉血液4 mL,测试血清中总前列腺特异性抗原(total prostate-specific antigen,t-PSA)、游离前列腺特异性抗原(free prostate-specific antigen,f-PSA)、p2PSA水平,并计算得到p2PSA、PHI水平,进行记录并做数据分析,评价各指标对鉴别良恶性前列腺疾病的价值。通过ROC曲线可以得知,t-PSA、f-PSA、p2PSA、p2PSA%、PHI断前列腺癌的特异性时,采用控制变量法,通过固定某几个标志物的值来判断其他标志物的比较优势或劣势。结果良性组患者血清中t-PSA、p2PSA、p2PSA%、PHI指标的水平比恶性组显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);两组之间f-PSA指标水平的差异无统计学意义。前列腺癌的AUC分别为0.64、0.58、0.75、0.83、0.86。另通过控制变量法得出p2PSA、PHI与其他指标相比,在特异性和敏感性上都有比较大的优势。由此可以看出,p2PSA%、PHI的AUC较大,在鉴别前列腺癌上更有效。结论在鉴别良恶性前列腺疾病的多种标志物中,p2PSA、p2PSA%以及PHI,尤其是PHI,比传统的PSA检测方法具有更好的效果,能够明显地提高敏感度与特异性、减少穿刺活检次数、减少误诊。p2PSA与PHI的联合检测,将为临床前列腺癌的诊断、治疗与预后提供重要参考。

心肌梗死四项的指标水平在急性心肌梗死患者血中之联合表达

目的探讨全血中心肌肌钙蛋白I(cTnI),肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB),肌红蛋白(Myo)和B型脑钠肽前体(NT-proBNP)的联合检测在急性心肌梗死诊断中的应用价值。方法选取河南省人民医院确诊为急性心肌梗死(AMI)的病人102例设为实验组,另外选取健康人102例,设为对照组。检测两组受试者全血中cTnI,Myo,CK-MB及NT-proBNP的表达,对比两组的结果,并对比联合检测和单项检测的结果。结果实验组的cTnI,Myo,CK-MB及NT-proBNP的表达均高于对照组(P<0.05),且这些指标的联合检测阳性率高于单项检测。结论急性心肌梗死的患者全血中cTnI,Myo,CK-MB及NT-proBNP的联合检测有利于提高疾病诊断的准确率,值得在临床推广。

构建MicroRNA-29a和microRNA-29c腺病毒并探讨其对膀胱癌细胞增殖能力的影响

构建miRNA-29a/c的重组腺病毒并观察其对膀胱癌T24细胞增殖能力的调控。以人全基因组DNA为模板,PCR扩增miR-29a、miR-29c,克隆至腺病毒穿梭载体pAdtrace-TO4-CMV。重组穿梭载体经pme I线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化感受态大肠杆菌BJ5183,通过同源重组获得重组腺病毒质粒pAdEasy-1-miR-29a、pAdEasy-1-miR-29c,pac I线性化后转染HEK-293细胞,进行包装和扩增。实时荧光定量PCR检测感染腺病毒的膀胱癌T24细胞中miR-29a、miR-29c的表达水平,并利用CCK-8实验检测细胞增殖能力。经DNA测序和限制性内切酶分析显示,重组腺病毒质粒pAdEasy-1-miR-29a、pAdEasy-1-miR-29c构建成功;感染腺病毒Ad-miR-29a和Ad-miR-29c后,经实时荧光定量PCR检测,膀胱癌细胞中miR-29a、miR-29c表达显著增高(P<0.01);过表达miR-29a/c后的CCK-8实验显示,细胞增殖能力明显低于对照组(P<0.05)。以上说明已成功构建miR-29a、miR-29c腺病毒,过表达miR-29a/c可抑制膀胱癌细胞的增殖。

hepaCAM基因重组腺病毒质粒的构建及鉴定

目的构建表达肝细胞黏附分子(Hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)基因的重组腺病毒质粒,并进行鉴定。方法以质粒pEGFP-N2-hepaCAM为模板,PCR扩增hepaCAM基因,克隆至腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV上,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,将重组腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV-hepaCAM经PmeⅠ线性化,转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中进行同源重组。重组腺病毒质粒pAdEasy-1-hepaCAM经PmeⅠ线性化后,转染HEK-293细胞,包装重组腺病毒AdI-hepaCAM,经大量扩增后,检测病毒滴度。RT-qPCR及Westernblot检测感染的BIU-87细胞内hepaCAM的表达。结果酶切鉴定证实重组腺病毒质粒pAdEasy-1-hepaCAM构建正确,重组腺病毒AdI-hepaCAM滴度可达1.6×1012pfu/ml,与空载体腺病毒组比较,经重组腺病毒感染的BIU-87细胞中hepaCAM mRNA及蛋白的表达均明显升高(P<0.05)。结论已成功构建携带hepaCAM的重组腺病毒载体AdI-hepaCAM,为研究hepaCAM基因对膀胱癌细胞增殖的调控提供依据。

PLCε沉默后通过Wnt/β-catenin信号通路抑制比卡鲁胺耐药的前列腺癌细胞增殖

目的:探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cε(phosphoinositide-speci c phospholipase Cε,PLCε)对前列腺癌细胞增殖和比卡鲁胺敏感性的影响及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法:采用比卡鲁胺浓度递增及间歇诱导法建立对比卡鲁胺耐药的前列腺癌B-LNCAP细胞。应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测前列腺癌LNCAP和B-LNCAP细胞中雄激素受体(androgen receptor,AR)和PLCεmRNA和蛋白的表达,CCK-8法检测LNCAP和B-LNCAP细胞对比卡鲁胺的敏感性。将干扰PLCε表达的重组慢病毒LV-shPLCε或阴性对照(negative control,NC)LV-NC感染B-LNCAP细胞(称为LVshPLCε/B-LNCAP或LV-NC/B-LNCAP),Wnt/β-catenin信号通路激活剂AZD2858处理LV-shPLCε/B-LNCAP细胞,以未进行任何干预的B-LNCAP细胞作为空白组。应用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况及对比卡鲁胺的敏感性,应用克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成能力,蛋白质印迹法检测各组细胞的细胞质和细胞核中β-catenin和AR蛋白表达水平,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞中c-myc、cyclin D1mRNA和蛋白表达水平。结果:B-LNCAP细胞中PLCε、AR mRNA和蛋白的表达水平均高于LNCAP细胞(P值均<0.05),B-LNCAP细胞对比卡鲁胺的耐药系数为132.87,成功构建前列腺癌耐药细胞B-LNCAP。LV-shPLCε/B-LNCAP细胞增殖和克隆形成能力均弱于空白组和LV-NC/B-LNCAP组(P值均<0.01),比卡鲁胺对LV-shPLCε/B-LNCAP细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值均低于空白组和LV-NC/B-LNCAP组(P值均<0.05),LV-shPLCε/B-LNCAP细胞核中β-catenin和AR蛋白表达水平明显低于空白组和LV-NC/B-LNCAP组(P值均<0.01),LVshPLCε/B-LNCAP细胞中c-myc、cyclin D1 mRNA和蛋白的表达水平均低于空白组和LV-NC/B-LNCAP组(P值均<0.01);AZD2858处理的LVshPLCε/B-LNCAP细胞增殖和克隆形成能力强于LV-shPLCε/B-LNCAP细胞(P值均<0.05),比卡鲁胺对AZD2858处理的LV-shPLCε/B-LNCAP细胞IC50值高于未处理的LV-shPLCε/B-LNCAP细胞(P<0.05),AZD2858处理的LV-shPLCε/B-LNCAP细胞核中β-catenin和AR蛋白表达水平均高于LV-shPLCε/B-LNCAP细胞(P值均<0.05),AZD2858处理的LV-shPLCε/B-LNCAP细胞中c-myc、cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平均高于LV-shPLCε/B-LNCAP细胞(P值均<0.05)。结论:PLCε下调后通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,增强前列腺癌B-LNCAP细胞对比卡鲁胺的敏感性,抑制前列腺癌B-LNCAP细胞的增殖。

shPLCε通过PPARβ/twist1抑制前列腺癌细胞的迁移和EMT过程

该研究旨在探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C epsilon(phospholipase C epsilon,PLCε)对前列腺癌细胞上皮–间充质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及迁移能力的影响。用LV-sh PLCε感染前列腺癌细胞,q-PCR和Western blot检测PLCε、过氧化物酶体增殖物激活受体β(peroxisome proliferator activated receptorβ,PPARβ)、twist1和EMT相关分子m RNA和蛋白质水平,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力。结果表明,感染LV-sh PLCε可显著下调PLCε、PPARβ和twist1的m RNA和蛋白质水平,同时降低前列腺癌细胞株PC3和DU145的迁移能力以及EMT过程。而在sh PLCε组细胞中加入PPARβ的激动剂能一定程度逆转PPARβ和twist1的下调,促进细胞的迁移能力和EMT过程;而PPARβ的抑制剂产生相反作用。该研究说明,PLCε可通过PPARβ/twist1影响前列腺癌细胞的迁移能力和EMT过程。

Sh-PLCε提高IL-2治疗肾癌疗效的研究

该实验旨在探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)是否在白介素2(interleukin 2,IL-2)治疗肾癌的过程中发挥一定的作用。采用sh-PLCε慢病毒转染肾癌细胞株786-o。MTT法检测IL-2处理肾癌细胞最适浓度,使用最适浓度IL-2处理细胞。流式细胞术检测细胞凋亡。DAPI染色观察细胞中凋亡小体。q-PCR、Western blot检测Fas/FasL以及Fas下游相关分子在基因水平以及蛋白水平的表达变化。将肿瘤细胞与淋巴细胞进行共培养,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显示,敲低PLCε后,Fas/FasL表达降低,而IL-2处理后,会逆转这种效果。检测Fas下游相关通路后发现,IL-2处理阴性对照(negative control,NC)组后,Fas下游凋亡抑制信号通路FADD/cFlip/Traf2启动,IL-2处理sh-PLCε组后,Fas下游凋亡信号通路FADD/Caspase8/Caspase3启动。共培养实验后流式细胞术结果显示,IL-2处理与sh-PLCε联用组细胞凋亡比例最高。该实验证明,sh-PLCε可以通过启动Fas下游凋亡信号通路,抑制凋亡抑制信号通路来提高IL-2治疗肾癌的疗效。

葡萄糖转运促流感病毒复制的机制研究

目的探讨流感病毒H9N2复制与葡萄糖转运之间的潜在联系。方法 H9N2感染A549细胞后,检测葡萄糖转运对其复制的影响。感染H9N2后高通量测序检测调控此生理过程的潜在miRNA。通过过表达miRNA筛选影响葡萄糖转运的miRNA。miRDB在线分析和荧光素酶报告试验鉴定miRNA底物。结果 H9N2感染A549后,A549细胞葡萄糖转运水平上升(31.2±7.1 vs 123.5±24.9,t=6.138,P<0.05)。葡萄糖转运抑制剂Phloretin处理A549后,H9N2复制水平显著下降(5.2±1.0 vs 1.6±0.2,t=6.035,P<0.05)。葡萄糖转运激动剂Insulin处理A549后,H9N2复制水平显著上升(5.6±0.9 vs 14.3±2.5,t=5.493,P<0.05)。高通量测序显示,H9N2感染后37种miRNA的表达发生显著变化。当敲低miR-345-3p时,A549细胞葡萄糖转运水平显著上升(25.4±5.3 vs 175.2±31.2 t=8.239,P<0.05),H9N2的复制水平显著上升(5.2±0.9 vs 10.6±1.6 t=4.780,P<0.05)。过表达miR-345-3p后,A549细胞葡萄糖转运水平显著下降(26.4±6.1 vs 4.7±0.2,t=6.159,P<0.05),H9N2的复制水平显著下降(5.2±0.9 vs 1.1±0.1,t=7.583,P<0.05)。miRDB在线分析显示,miR-345-3p潜在靶向74个基因。过表达miR-345-3p后,其中14个基因的表达发生6倍以上的变化。当敲低EH结构域蛋白2(EH Domain Containing 2,EHD2)时,H9N2的复制水平显著下降(4.6±0.9 vs 0.5±0.1,t=8.026,P<0.05)。过表达miR-345-3p时,EHD2的表达水平下降;敲低miR-345-3p时,EHD2的表达水平上升。此外,miR-345-3p靶向EHD2的3′端非编码区。过表达miR-345-3p后,H9N2的复制水平显著上升(5.6±0.6 vs 16.3±3.2,t=5.653,P<0.05),葡萄糖转运水平上升(35.1±7.0 vs 154.2±22.2,t=8.928,P<0.05);敲低miR-345-3p后,H9N2的复制水平显著下降(6.0±0.3 vs 0.9±0.0,t=25.78,P<0.05),葡萄糖转运水平下降(42.0±5.1 vs 11.1±3.1,t=9.208,P<0.05)。H9N2感染并敲低miR-345-3p后,EHD2和GLUT4的相互作用减弱。敲低GLUT4后,H9N2的复制水平显著下降(4.8±0.2 vs 0.9±0.1,t=26.90,P<0.05)。H9N2感染并过表达miR-345-3p后,EHD2和GLUT4的相互作用增强。敲低GLUT4的同时过表达EHD2后,H9N2的复制水平无显著变化(1.1±0.1 vs 1.1±0.0,t=0.6573,P>0.05)。结论 H9N2通过降低miR-345-3p的表达使EHD2高表达,并增强EHD2与GLUT4的相互作用以促进葡萄糖的转运,最终促进自身基因组的复制。

uf-5000在评估留置导尿管患者尿路感染中的应用价值

目的评估uf-5000全自动尿沉渣分析仪细菌计数结果在诊断住院留置导尿管患者细菌性尿路感染中的应用价值。方法收集2020年7—10月河南省人民医院部分疑似尿路感染住院患者留置导尿管尿标本225例,同时进行尿液细菌定量培养及uf-5000全自动尿沉渣分析仪检测细菌数。以尿液细菌定量培养结果为金标准,对两种检测方法的细菌计数和革兰氏分类结果进行比较,同时绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估uf-5000全自动尿沉渣分析仪细菌计数结果的诊断能力。结果225例住院患者尿标本中有71例尿细菌培养阳性(31.6%),154例阴性(68.4%)。uf-5000全自动尿沉渣分析仪尿细菌计数对尿路感染诊断价值较高,cut-off值为71个/μL时,其灵敏度和特异性分别为94.4%和90.9%,ROC曲线下面积为0.965;uf-5000全自动尿沉渣分析仪鉴定革兰氏阴性菌的符合率为82.0%,鉴定革兰氏阳性菌的符合率为61.9%。结论用uf-5000全自动尿沉渣分析仪对尿液中细菌进行准确计数对于住院留置导尿管患者的尿路感染可能有比较好的应用价值,但是关于其细菌革兰氏菌群分类的准确性有待提高。