屋尘螨提取液在BALB/c小鼠气道炎症中的作用

目的比较3种屋尘螨提取液(house dust mite extract,HDM)对BALB/c小鼠气道炎症表型的影响,并分析其可能的原因。方法 BALB/c小鼠于实验第0、7、14、21、28、35天进行PBS液或HDM液(100μg/50μl PBS)滴鼻。采用头体积描记法测量小鼠的气道反应性;对支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BAL)进行细胞计数和分类;ELISA法检测BAL中CXCL1、CXCL2、CCL11(eotaxin)、IL-5、IFN-γ、IL-10和IL-17的含量及血清总Ig E;对肺组织PAS染色后进行病理学观察。结果 HDM1诱导了以中性粒细胞和嗜酸性粒细胞为主的混合型气道炎症;HDM2诱导的小鼠气道炎症以中性粒细胞升高为主;HDM3仅诱导了微弱的小鼠气道炎症反应,未见中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的显著增加。3种HDM均引起BAL中CXCL1蛋白水平的升高,并伴随着高脚杯细胞增生等病理组织学改变。结论不同来源的HDM可能与不同类型的小鼠气道炎症相关。

临床微量精子标本冷冻方法的研究

目的探索一种安全、便捷、有效的用于微量精子冷冻的方法。方法选择内径130μm的玻璃剥卵针50支作为冷冻载体,进行10个周期的反复冻融,检测其完整性,计算不同冷冻周期中载体折损率。选取50例经检测合格的精液标本,将密度调整至(0.5~1)×10~6/ml,使用精子冷冻保护剂按照1∶1体积混合预平衡10 min,每份标本装载2支载杆,计算装载时间,其中1支载杆作为快速冷冻组,迅速投入液氮中冷冻保存,另1支载杆采用液氮熏蒸30 min后再投入液氮中保存,比较两种方法解冻后精子的复苏率。结果 50支冷冻载体中,其中有36支完成全部10轮的冷冻-复苏周期测试,折损率为28.0%,损坏原因中78.6%为金属镊子直接夹持导致玻璃剥卵针破裂。玻璃剥卵针至少可耐受4个周期反复冻融,但之后约4%~6%的会出现自发破损。100支冷冻载体装载精子时间为45~398 s,平均为(112.3±94.1)s。冷冻前平均精子活力为65.6%±9.9%,快速冷冻复苏后平均精子活力为36.64%±8.7%,熏蒸法冷冻复苏后平均精子活力为23.48%±6.2%。快速冷冻法精子复苏率为55.9%±11.0%,熏蒸冷冻法精子复苏率为36.3%±9.8%,两者比较,差异具有统计学意义(F=18.31,P<0.01)。结论采用剥卵针作为冷冻载体,并配合快速冷冻法,冷冻保存微量精子是一种安全、有效、简便的方法,适合临床广泛开展。

屋尘螨2种致敏方式诱导的小鼠气道炎症表型的比较分析

目的比较屋尘螨(house dust mite,HDM)2种不同致敏方式对小鼠气道炎症表型的不同影响。方法24只BALB/c小鼠随机分为3组,每组8只,PBS组和鼻滴法组小鼠于实验第1天、第7天、第14天、第21天经鼻腔分别滴注50μl PBS液或HDM液(100μg)。经腹腔注射组小鼠于实验第1、14、21天经腹腔注射50μl HDM液(40μg),于实验第26天、第27天、第28天雾化吸入HDM液(40μg)20 min。采用头体积描记法测量小鼠的气道反应性;对支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BAL)进行细胞计数和分类;ELISA法检测BAL中CXCL1、CXCL2、CCL11、IL-5、IFN-γ、IL-10和IL-17的表达及血清免疫球蛋白(HDM-Ig G1、HDM-Ig G2a、HDMIg E)的含量;对肺组织PAS染色后进行病理学观察。结果鼻滴法诱导了以中性粒细胞为主的气道炎症并伴CXCL1蛋白水平升高、血清HDM-Ig G1含量增加及肺组织高脚杯细胞增多等病理学改变,但血清HDM-Ig E的含量和气道反应性未见改变。经腹腔注射法则诱导了更加剧烈的气道炎症反应(以嗜酸性粒细胞为主)、BAL中CXCL1、IL-5蛋白水平升高、血清免疫球蛋白(HDM-Ig G1、HDM-Ig G2a、HDM-Ig E)含量增加、气道反应性下降以及肺组织病理学改变。结论 HDM鼻滴法和经腹腔注射法诱导了不同类型的小鼠气道炎症反应。

精子DNA碎片率对男性生育力评估的预测价值

目的:探讨精子DNA碎片率(DFI)对男性生育力评估方面的预测价值。方法:选择2016年1月—2018年7月于上海市第十人民医院生殖医学中心就诊的460例男性不育患者纳入观察组,同期107例正常生育男性纳入对照组。计算机辅助精液分析系统(CASA)检测精液常规,精子染色质结构分析检测精子DFI。将精液常规结果分为精液正常、少精子、弱精子和少弱精4类。比较观察组和对照组的精液常规构成比和精子DFI;比较不同年龄(<30岁,30～39岁,≥40岁)患者精子DFI水平的变化趋势及不同水平精子DFI(≤15%,15%～30%,≥30%)患者的体外受精(IVF)/胞浆内单精子注射(ICSI)的生殖结局。结果:观察组中精液正常、少精子、弱精子、少弱精所占比列分别为22.17%、13.26%、52.62%和11.95%,对照组分别为60.96%、34.59%、1.75%和2.70%。与对照组相比,观察组精液正常比例下降,少精子、弱精子和少弱精比例增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,观察组精子DFI≤15%所占比例下降,DFI≥30%比例增加,差异有统计学意义(P<0.05)。随着年龄增加,精子DFI≤15%患者所占比例下降,精子DFI(15%～30%)与精子DFI≥30%患者所占比例增加,3组间精子DFI的分布比例差异有统计学意义(P<0.05)。精子DFI≥30%来源的IVF或ICSI胚胎,其早期流产率显著升高(31%和25%,均P<0.05),但受精率、卵裂率、生化妊娠率、临床妊娠率、着床率等指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:不育男性的精子DNA碎片率更高,并且随年龄的增加而增加。DFI≥30%的精子受精的胚胎早期流产率较高,影响辅助生殖技术的妊娠结局,因此DFI对不育男性的生育力评估有实用参考价值。

3859例不孕不育患者支原体感染情况及药物敏感试验结果分析

目的探讨不孕不育患者支原体感染情况及药物敏感(简称药敏)试验特征,为临床合理用药提供科学指导。方法回顾性选择2018年1月至2021年5月就诊于该院生殖医学中心的3859例不孕不育患者为研究对象,女性采集阴道分泌物,男性采集精液作为标本进行支原体检测及药敏试验,计算不孕不育患者支原体阳性率,分析支原体阳性患者在不同年龄段的分布情况和对12种抗菌药物的敏感性,并进行统计学处理。结果3859例患者中支原体总阳性率为13.99%(540/3859),其中Uu阳性率为13.09%(505/3859),明显高于Mh的0.91%(35/3859),差异有统计学意义(P<0.05);男性患者支原体总阳性率为4.17%(101/2423),明显低于女性的30.57%(439/1436),差异有统计学意义(P<0.05)。支原体阳性患者中以>25~35岁组的支原体感染构成比最高,为70.93%(383/540)。药敏试验结果显示,对Uu敏感率最高的是交沙霉素(99.80%)和多西环素(99.80%),其次是米诺环素(99.60%)和阿奇霉素(97.62%),耐药率最高的是克林霉素(91.88%);对Mh敏感率最高的是米诺环素(100.00%)和交沙霉素(100.00%),耐药率最高的是红霉素(100.00%)和克林霉素(100.00%)。结论不孕不育患者主要感染的支原体类型为Uu,而Mh耐药性更为严重,治疗时应结合药敏结果科学给药,优先选用交沙霉素和米诺环素等敏感率高的药物。同时需加强生育健康教育,预防支原体感染。