粪肠球菌JSHY-R5对致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌的拮抗作用

以致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌为受试菌株,从采集自江苏沿海地区的健康凡纳滨对虾体内分离筛选拮抗菌株,通过形态学、生理生化及分子生物学方法进行鉴定,测定其对受试菌株的拮抗效果,并对被动保护效果进行分析。结果显示,筛选出1株对致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌有良好抑制效果的菌株JSHY-R5,经形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析鉴定该菌株为粪肠球菌。当JSHY-R5与致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌以5∶1的接种比例共培养时,JSHY-R5对致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌具有明显的抑制作用。此外,饲料添加JSHY-R5处理的凡纳滨对虾体内副溶血弧菌黏附因子(VpadF)mRNA的表达量显著下调,对虾免疫因子(Serpin、Hemocyanin、Peneidins)mRNA表达量显著升高,暴露在致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌下的5 d存活率相比投喂常规饲料的阳性组提高26%。本试验证实筛选的粪肠球菌JSHY-R5对致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌具有较好的抑制作用,可以抑制副溶血弧菌黏附因子的mRNA表达,调节免疫因子的表达,增强宿主免疫防御能力,从而提高对虾的存活率,具有应用为饲料添加剂的潜力。

南美白对虾肝肠胞虫的分离及形态学观察

为了研究江苏地区感染南美白对虾(Penaeus vannamei)的肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)的形态学特点,分析与国外报道的差异性,本研究以江苏地区感染肝肠胞虫的南美白对虾肝胰腺组织为研究材料,通过蔗糖密度梯度离心等方法进行肝肠胞虫初步分离纯化,构建一种肝肠胞虫荧光染色检测方法,显微观察肝肠胞虫的孢子形态结构。结果发现感染江苏地区南美白对虾的肝肠胞虫孢子主要分布在35%~40%浓度的蔗糖层面,可推算其密度为1.15~1.17 g/m L。荧光显微镜下可见孢子椭圆或圆形,呈亮蓝色,孢子微小但可计数,显微观察可见肝肠胞虫孢子大小约为1.7μm×0.9μm,外壁上有大量白色瘤状物,疑似胞壁蛋白,孢子表面布满细小褶皱,孢子具有一个细胞核,极丝4~6圈,细胞壁由一相对薄的电子透亮的孢子内壁和电子致密的孢子外壁组成。结论认为江苏地区南美白对虾肝肠胞虫的形态结构与国外报道的吻合,本研究建立的肝肠胞虫分离纯化、荧光染色方法以及取得的肝肠胞虫形态学资料可为其检测和研究提供参考。

异育银鲫源嗜水气单胞菌对磺胺类耐药性分析

为了解异育银鲫源嗜水气单胞菌对磺胺类药物的敏感性和磺胺类耐药基因的携带情况。采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法测定了36株受试菌株对常见4种磺胺类药物的敏感性;应用PCR法检测菌株染色体DNA和质粒DNA磺胺类Sul1、Sul2和Sul3耐药基因。试验结果表明,试验菌株对磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺异噁唑、磺胺甲噁唑的耐药率分别为83.34%、72.22%、66.66%、69.45%;36株嗜水气单胞菌的染色体和质粒中均检测到Sul1和Sul2基因,Sul1基因在染色体和质粒中的检出率分别为30.56%和25.64%,Sul2基因在染色体和质粒中的检出率分别为83.33%和91.67%,Sul3基因在染色体和质粒中均未检出。异育银鲫源嗜水气单胞菌对磺胺类药物的耐药性不容乐观,其耐药性与Sul2和Sul1基因有较大相关性。

卵黄抗体在水产疾病防治中的研究应用进展

卵黄抗体(IgY)是禽类受特异性抗原刺激后在卵黄中形成多克隆抗体,具有较强大的免疫功能。近年来,在水产动物病害防控研究方面引起了广泛关注。阐述了IgY的结构、优势、作用机理等内容,对IgY在水产动物细菌性、病毒性疾病防治中的应用进行了综述,对其研究应用做出了展望。

VPAHPND毒力蛋白PirAB的原核表达与纯化

急性肝胰腺坏死病(Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease, AHPND)是一种新型对虾病害,其病原为一类携带编码二元毒素蛋白PirAB的弧菌(VPAHPND),可感染对虾且致死率高。本研究利用GenBank公布的pirAB全基因序列设计特异性引物,通过PCR获得目的基因pirA、pirB、pirAB并克隆至表达载体pET 21b(+)中,构建BL21-pET21b-pirA、BL21-pET21b-pirB、BL21-pET21b-pirAB原核表达体系;通过对诱导剂浓度、诱导温度和诱导时间进行优化,分析重组蛋白的最佳表达条件;采用Ni磁珠对重组蛋白进行纯化,并以Western-blot方法分析其抗原性。结果表明,PirA、PirB、PirAB的重组蛋白分子质量分别约为17 kDa、50 kDa和(50+17) kDa,与预期大小一致。重组蛋白的最佳诱导条件:IPTG浓度0.01 mmol/L,PirA和PirAB 30℃诱导24 h、PirB 30℃诱导4 h,蛋白均呈现可溶性表达;纯化后的重组蛋白具有较好的反应原性,可为下一步的抗体制备和AHPND致病机理研究提供充足的实验材料。

对虾源副溶血弧菌拮抗菌的筛选与评价

随着对虾养殖产业集约化程度不断提高,对虾病害的发生越来越多,成为制约产业发展的主要因素。自江苏南部沿海滩涂沉积物中分离得到252株细菌,以14株凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死综合征致病性副溶血弧菌为指示菌,经过初筛和复筛,得到1株拮抗效果较好的菌株H0011;经形态、生理生化特性和16S rDNA基因序列鉴定,确定菌株H0011为普罗威登斯菌。利用普罗威登斯菌H0011对凡纳滨对虾进行高密度胁迫试验测试其安全性,试验期间浸浴组和投喂组对虾状态良好,无发病和死亡现象。对普罗威登斯菌H0011的生长条件优化后,最优生长温度为30℃,盐度为10,pH为8。普罗威登斯菌H00114 h进入对数生长期,20 h达到生长高峰。本研究获得了对凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死综合征具有防控作用的高效拮抗作用菌,将为对虾急性肝胰腺坏死综合征的防控提供新的思路。

虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei)的研究进展

虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)是一种专性细胞内寄生虫,主要侵染斑节对虾(Penaeus monodon)及南美白对虾(Litopenaeus vannamei)。EHP感染后对虾生长迟缓,经济损失严重,是近年来危害对虾行业发展的新型重要病原,引起了广泛关注。本文着重介绍了EHP病原学、流行病学、病理学、检测手段以及防治措施等,为进一步研究与防控虾肝肠胞虫病提供参考。

奥运场馆的科技之辉

作为奥运会资金投入最大的项目，奥运场馆不仅只是各国运动员的竞技舞台，更因为它承载了全人类的体育盛会而被载入建筑史册。而伴随着科学技术的不断进步，人们对场馆的要求越来越高。它们印着时代的辉煌与荣耀，汇聚人类追求上进、渴望和平以及超越极限的浓浓情结，百年传承。

中华绒螯蟹肝胰腺坏死综合征病因及其肝胰腺菌群的初步研究

为探究中华绒螯蟹(Eriocheie sinensis)肝胰腺坏死综合征(HPNS)的病因,利用PCR-DGGE技术分析了健康蟹、肝胰腺坏死综合征病蟹、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)感染蟹、白斑综合征病毒(WSSV)感染蟹及IHHNV-WSSV共感染蟹的肝胰腺菌群结构。结果显示,肝胰腺坏死综合征病蟹组与IHHNV-WSSV共感染蟹组首先聚类(相似度0.72),随后依次与IHHNV感染组(相似度0.69)及WSSV感染组(相似度0.62)聚类,最后与健康蟹组聚类(相似度0.56),表明肝胰腺坏死综合征病蟹的肝胰腺菌群结构与IHHNV-WSSV共感染蟹的较为一致,与健康蟹的差异明显。此外,肝胰腺坏死综合征病蟹、WSSV感染蟹、IHHNV感染蟹、IHHNV-WSSV感染蟹与健康蟹相比,肝胰腺菌群多样性降低,肝胰腺菌群中气单胞菌属、假单胞菌属等致病菌的丰度增加,鞘氨醇单胞菌属、鞘氨醇杆菌属等有益菌的丰度减少,甚至肝胰腺坏死综合征病蟹中未出现慢生根瘤菌属。初步推论,HPNS的发生可能与IHHNV-WSSV共感染有关,IHHNV-WSSV共感染改变了河蟹肝胰腺菌群结构,可能引发肝胰腺正常的生理功能下降,继而停止了摄食行为,从而逐渐发展形成HPNS初期的肝胰腺白化现象。

背角无齿蚌在低盐度环境下的适应性及摄食率初步研究

为探索背角无齿蚌(Anodonta woodiana)在不同环境条件下生理响应,对背角无齿蚌在不同温度(25℃、30℃)、盐度条件(0、2.5、5、10)下的生理活动和摄食率进行了观察与比较。实验结果发现,在25℃条件下,盐度为0、2.5、5时,背角无齿蚌成贝存活率为100%;盐度10时,24 h存活率77%,48 h存活率62%;在30℃条件下,盐度0时,24h存活率为42%,盐度2.5时,24 h存活率为29%,盐度5时,24 h存活率为0,盐度10时,24 h存活率为0,各试验盐度下48 h存活率为0。实验结果表明,在25℃条件下,各盐度组的个体存活率都显著高于30℃实验组(P 【0.05)。25℃和30℃下,随盐度升高,背角无齿蚌的摄食率呈现先增长后下降的抛物线趋势,最适盐度为2.5。且相同盐度下,25℃时蚌的摄食率比30℃高。因此,背角无齿蚌适宜生存的盐度范围为0~5,25℃时背角无齿蚌包括摄食在内的生理状态优于30℃时,盐度2.5时出现最大摄食率,背角无齿蚌受温度的影响要显著高于盐度的影响。

基于生态沟渠的凡纳滨对虾小型温棚养殖尾水净化技术效能分析

为探索经济可行的凡纳滨对虾小型温棚养殖尾水净化技术,集成固液分离、厌氧以及生态沟渠技术,开发了一种基于生态沟渠的凡纳滨对虾小型温棚养殖尾水净化技术,比较了4种不同类型的生态沟渠水系统(无植物型、互花米草型、芦苇型、水花生型)的净化效果。结果显示:通过79 d的系统运行,4种不同类型生态沟渠对凡纳滨对虾小棚养殖尾水的净化能力从高到低依次是水花生型>芦苇型>互花米草型>无植物型,其中水花生型化学需氧量(COD)降至12.05 mg·L^(-1),无机氮(DIN)降至0.14 mg·L^(-1),活性磷酸盐(PO;-P)至0.02 mg·L^(-1)。水花生、芦苇和互花米草型生态沟渠的出水水质COD都达到SC/T 9103-2007《海水养殖水排放要求》二级标准,无机氮达到一级标准;水花生、芦苇型生态沟渠的出水水质活性磷酸盐达到一级标准。研究表明,基于植物型生态沟渠的凡纳滨对虾小型温棚养殖尾水净化技术具有较好的应用前景。

先做大流量还是先探索盈利模式

“业界有观点认为，2009年视频分享网站如不能实现赢利，将面临行业困局，因此，视频网站的赢利目标都已变得更为迫切”（《巨大赢利压力下再押一注优酷牵手淘宝推视频购物》，“商业”，2009年7月5日）。

东交所摘牌事件给我们的启示

正如IDG VC中国董事长熊晓鸽所言：对于成功而言,那些失败的案例才是我们真正的财富（《东京中国第一股面临退市危机创投竟以“投对人”为投资秘籍》,“产业”,2008年8月20日）。笔者认为,亚洲互动传媒被日本人摘牌的案例对中国投资人是财富,但它也使中国企业蒙羞,甚至导致中国企业未来海外上市之路会更艰难。

民族品牌也不能完全拒绝外资并购

＂汇源案绝不会成为中国搞贸易保护主义的象征,更不会成为中国企业并购的反垄断‘魔咒＇,进一步完善并购法律的宗旨显然是立足于在制度上鼓励并购而不是限制＂（《汇源收购案的标杆意义》,＂博客＂,2009年4月20日）。

王传福与郭台铭,谁会笑得更好?

“‘在与鸿海交集的行业领域中，比亚迪与我们差距太大。’郭台铭依然瞧不上比亚迪，但局面正在悄然改变——富士康过去的高速增长已经沦为记忆，比亚迪也非昔日的‘吴下阿蒙”’（《王传福和郭台铭的江湖恩怨》，“封面故事”，2009年6月5日）。

王雷雷低调甩出三板斧 新易趣抛弃“收费”再战淘宝

本土、免费、务实营销，王雷雷版易趣蛰伏半年多再拼淘宝。三十年河东，三十年河西，TOM系的参战会帮易趣重新称王吗。

两株海洋异养好氧硝化-反硝化细菌的筛选、鉴定及能力测试

通过对近海沉积物进行微生物培养,分离鉴定了两株好氧反硝化细菌MD5和MD8,研究其在有氧条件下的反硝化能力及其相关影响因子.菌株形态、16S rRNA序列比对、系统发育分析及亚硝酸盐还原酶基因(nirS)结果显示,菌株MD5为一株盐单胞菌属Halomonas细菌,菌株MD8为一株产碱杆菌属Alcaligenesx细菌,其Gen Bank注册号分别为KM362826和KM406394.MD5和MD8在有氧条件下都具有硝化和反硝化的能力,在以NH_4^+-N作为唯一氮源的能力测试中,可分别达到81%和88.3%的去除能力;在以NO_3^--N为唯一氮源的能力测试中,可分别达到85.3%和92.1%的去除能力;在NH_4^+-N和NO_3^--N都存在的条件下,总无机氮(DIN)的去除率达到72%和76.8%.pH值、盐度和碳氮比(C/N)等因子对菌株MD5和MD8的DIN、NH_4^+-N和NO_3^--N的去除能力具有不同程度的影响.如低pH值(5.5-6.5)条件下,MD5和MD8的NH_4^+-N和NO_3^--N去除率受到显著抑制(P<0.05),其最佳pH值范围为7.5-8.5;在盐度为10-30 g/L的范围内,MD5对NH_4^+-N和NO_3^--N的去除率随着盐度的增长而增加,而MD8的最佳盐度范围稍低于MD5(20-25 g/L);在C/N低于6的条件下,MD5和MD8的NH_4^+-N和NO_3^--N的去除率都显著降低(P<0.05),但MD5比MD8表现出较低的C/N适应范围(8-10).以上研究表明,MD5和MD8在有氧培养条件下具有较强的硝化-反硝化能力,可应用于海水养殖池塘养殖废水的处理,具有良好的应用潜力.