47例多发性骨髓瘤细胞形态学及免疫表型特征分析

目的:本研究旨在探讨多发性骨髓瘤细胞形态及细胞免疫表型特点。方法:采用流式细胞仪多参数直接免疫荧光技术、CD45/SSC配合CD38++/CD138+设门,对47例多发性骨髓瘤细胞标记CD138、CD38、CD56、CD117、CD3、CD13、CD33、CD19、CD7、CD20、CD22、CD34、CD28进行检测,并结合骨髓细胞形态检查进行分析。结果:流式细胞分析应用CD45/SSC配合CD38+/CD138+设门证实多发性骨髓瘤患者可疑瘤细胞比例为9.42%-74.25%,形态学检查骨髓瘤细胞比例为11.0%-80.6%,两种方法之间有良好的正相关性(r2=0.54,P<0.001);抗原阳性表达比例分别为:CD138为74.46%,CD38为100%,CD56为57.44%,CD117为40.42%,CD13为6.38%,CD33为19.15%,CD20为8.51%,CD28为27.66%,CD22为2.12%,CD34为4.25%,CD3为0.00%,CD19为0.00%,CD7为0.00%。结论:CD45/SSC配合CD38+/CD138+设门技术可以比较准确地设定需要分析的多发性骨髓瘤细胞群,瘤细胞大多数表达CD138、CD38、CD56抗原;免疫表型分析结合细胞形态学检查,有助于多发性骨髓瘤的诊断和鉴别诊断。

血清胱抑素C、β_(2^-)微球蛋白及肌酐在多发性骨髓瘤诊断中的价值

目的探讨血清胱抑素C(cystatin C,Cys-C)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)及肌酐(creatinine,Cr)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的诊断意义。方法使用日立7600全自动生化分析仪检测2010年2月-2014年1月海南农垦那大医院及南方医院住院的43例初诊MM患者和30例健康体检者血清Cys-C、β2-MG、Cr、尿酸(uric acid,UA)及尿素的水平。应用受试工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评价Cys-C、β2-MG和Cr在MM诊断中的价值。结果 MM患者Cys-C水平(2.06±0.82)mg/L明显高于健康对照组(0.71±0.18)mg/L(P<0.01);并且与β2-MG呈明显正相关(r=0.523,P<0.05)。Durie-Salmon分期中,Ⅲ期Cys C水平(3.14±1.38)mg/L明显高于Ⅱ期(1.35±0.16)mg/L和Ⅰ期(0.97±0.18)mg/L(P<0.01);Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅱ期血清Cr和β2-MG水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。不同免疫分型中,轻链型血清Cys-C水平(2.75±1.01)mg/L明显高于不分泌型(1.49±0.53)mg/L(P<0.05);Ig A型血清β2-MG水平(7.48±4.52)mg/L明显高于不分泌型(5.37±2.64)mg/L(P<0.05)。ROC分析显示,Cys C的曲线下的面积(area under curve,AUC)及其95%置信区间(0.912,95%CI:0.891~0.960)高于β2-MG(0.853,95%CI:0.821~0.894)和Cr(0.741,95%CI:0.702~0.795),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Cys-C可以作为诊断MM患者肾功能早期损害的指标之一,且优于β2-MG和Cr,对临床分期、肿瘤负荷及判断预后有一定的帮助。

琼西地区精神分裂症患者血浆MiR-137,MiR-181b及MiR-132表达及其相关性研究

目的 探讨microRNA-137（MiR-137）,microRNA-181b（MiR-181b）及microRNA-132（MiR-132）表达水平在琼西地区精神分裂症患者抗精神病药物治疗过程的变化及相关性。方法 选取琼西地区386例精神分裂症患者（病例组）和106例健康体检者（对照组）,采用实时荧光定量PCR检测两组血浆MiR-137,MiR-181b及MiR-132表达水平。在病例组中选阳性与阴性症状量表（PANSS）分〉70分的104例患者（观察组）,于治疗前、治疗14天、治疗30天、治疗50天分别检测MiR-137,MiR-181b及MiR-132表达水平,并采用PANSS,大体评定量表（GAS）和病情严重程度量表（SI）对不同治疗阶段的临床症状及疗效进行评估。结果 与对照组比较,病例组MiR-181b及MiR-132表达水平显著上调（Z=-3.315,P=0.001; Z=-2.036,P=0.038）。观察组治疗30天和50天血浆MiR-181b及MiR-132表达水平较治疗前及治疗14天显著下调（t=8.382-12.651,P〈0.05）,且观察组治疗50天血浆MiR-181b及MiR-132表达水平较治疗30天显著下调（t=7.695-12.824,P〈0.05）。随着治疗时间延长观察组患者PANSS评分及SI评分显著降低（t=8.711-10.273,P〈0.01）,而随着治疗时间延长观察组患者GAS评分显著增高（t=7.523-12.861,P〈0.01）。相关分析显示,与治疗30天比较,治疗50天病例组MiR-181b及MiR-132表达水平下调与GAS评分呈明显正相关（r=0.537,P〈0.05; r=0.492,P〈0.05）; 治疗50d与治疗前比较,病例组MiR-181b及MiR-132表达水平的下调与PANSS评分呈明显负相关（r=-0.503,P〈0.05; r=-0.516,P〈0.05）。ROC曲线显示,MiR-181b的AUC是0.694（95%CI：0.527-0.875）,敏感度和特异度为56.8%和78.3%; MiR-132的AUC是0.627（95%CI：0.474-0.788）,敏感度和特异度分别为52.4%和71.9%。Logistic回归分析显示,MiR-181b具有显著相对危险度（OR=2.346,95%CI：1.363-4.145,P=0.026）。结论 MiR-181b及MiR-132表达水平与精神分裂症发生和病情转归有一定的相关性,MiR-181b可作为预测精神分裂症发生的危险因素。

胃嗜酸性肉芽肿15例临床分析

作者总结经病理证实为胃嗜酸性肉芽肿15例。均为术后确诊，全部施行根治性胃大部切除手术治疗，术后随访无复发。作者认为；胃出血、溃疡、恶变是其主要并发症，手术所见与胃癌有区别，勿盲目施行全胃切除，

白细胞介素-10基因多态性与子宫内膜异位症易感性关系的Meta分析

目的：利用 Meta分析方法评价白细胞介素-10（IL-10）基因多态性与子宫内膜异位症易感性的关系。方法计算机检索Pubmed，Embase，中国知网，中国生物医学和万方等数据库。收集2013年11月之前发表的IL-10基因多态性与子宫内膜异位症相关性的病例对照研究，应用 STATA9.0对采纳的数据进行 Meta分析。结果6篇文献被纳入分析，关于-819T/C多态性的文献5篇，关于-592A/C多态性的文献6篇。Meta分析计算合并值（95％可信区间）：TT/CC基因型为0.90（0.81-0.99），P＜0.05；TC/CC基因型为0.92（0.82-1.02），P＞0.05；AA/CC基因型为0.92（0.79-1.07），P＞0.05；AC/CC基因型为0.98（0.90-1.06），P＞0.05。研究结果均未发现显著发表偏倚（P值分别为0.81，0.81，0.71和0.26）。结论当前的研究支持IL-10-819位点的基因型TT是子宫内膜异位症发病的保护因素，而-819位点的基因型TC和-592位点的基因型 AA和 AC与子宫内膜异位症的发病无相关性。

白细胞介素2基因多态性与手足口病EV71脑炎患者的关联性分析

目的评价人类白细胞介素2-330T／G（IL-2—330T／G，rs2069762）基因多态性与肠道病毒EV71脑炎之间的关联。方法从5700例疑似手足LI病（HFMD）患儿中选择115名EV71型感染脑炎患儿和256名无合并症的EV71型HFMD患儿进行关联性分析。用荧光定量PCR进行Ev71型病毒的诊断。用高分辨熔解曲线技术分析和PCR—DNA测序法确定IL-2基因的多态性。结果在EV71型脑炎的患儿组中IL-2—330TT＋TG基因型的频率（93．91％）明显的高于EV71型感染的无合并症HFMD组（74．61％），两者之间存在统计学差异（P=0．000）。IL-2．330T等位基因的频率在EV71型脑炎的患儿组（70．43％）明显的高于EV71型感染的无合并症HFMD组（51．95％），是-个危险『生因素（OR=2．203，95％CI=0．127～0．756，P=0．001）。结论我们的研究结果表明，IL-2．330T等位基因是-个EV71型脑炎风险增加密切相关的因素。

乳腺浸润性微乳头状癌术后双侧甲状腺及峡部转移1例

1病例资料,患者女,67岁,因“发现颈前肿物半年,增大伴声音嘶哑1月余”于2020年9月10日入院。查体:甲状腺右叶可触及一大小约3 cm×3 cm肿块,质硬,固定,无压痛,随吞咽上下活动;右乳房缺如,右前胸可见一长约28 cm横形手术切口瘢痕,左乳房可触及一大小约5 cm×5 cm肿块,质韧、固定、乳头可见渗液。

lncRNA HOXC-AS3吸附miR-216a-5p促进非小细胞肺癌细胞增殖和迁移的机制研究

目的:探讨lncRNA HOXC-AS3对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:HOXC-AS3小干扰RNA(si-HOXC-AS3)、HOXC-AS3过表达载体(pcDNA-HOXC-AS3)或miR-216a-5p抑制剂(anti-miR-216a-5p)Western blot检测细胞增殖抗原Ki-67、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达,双荧光素酶报告系统验证lncRNA H1299、A549和GLC-12中lncRNA HOXC-AS3水平上升,miR-216a-5p水平降低(P<0.05);沉默lncRNA HOXC-AS3可抑制A549高E-cadherin蛋白表达,过表达lncRNA HOXC-AS3可促进A549细胞增殖、迁移、侵袭和EMT;lncRNA HOXC-AS3靶向吸附cRNA HOXC-AS3通过吸附miR-216a-5p促进NSCLC A549细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,是肺癌的潜在分子靶点。

血清miR-17-5p与Hcy水平联合预测急性缺血性脑卒中患者预后的价值

目的探讨血清miR-17-5p及同型半胱氨酸(Hcy)水平联合预测急性缺血性脑卒中(AIS)患者预后的价值。方法选取2016年1月至2019年3月儋州市人民医院收治的158例AIS,根据改良Rankin量表(mRS)评分将患者分为预后良好组(n=98,mRS评分≤2分)和预后不良组(n=60,mRS评分>2分),采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将患者分为轻度组(n=47,NIHSS评分<5分)、中度组(n=73,5分≤NIHSS评分≤20分)、重度组(n=38,NIHSS评分>20分)。检测各组血清miR-17-5p及Hcy水平,应用ROC曲线分析miR-17-5p联合Hcy预测AIS患者预后不良的价值。采用Pearson相关分析方法分析AIS患者血清miR-17-5p及Hcy水平与NIHSS及mRS评分的相关性。结果AIS组血清miR-17-5p〔(2.38±0.74)比(0.24±0.08)〕及Hcy〔(18.60±5.30)μmol/L比(5.70±1.15)μmol/L〕水平明显高于对照组(均P<0.01)。预后不良组血清miR-17-5p〔(3.24±1.08)比(1.56±0.63)〕及Hcy〔(23.40±6.10)μmol/L比(14.25±3.58)μmol/L〕水平明显高于预后良好组(均P<0.01)。重度组血清miR-17-5p〔分别为:(3.60±1.15)比(2.52±0.90),(3.60±1.15)比(1.20±0.47)〕及Hcy〔(28.20±6.74)μmol/L比(18.36±4.82)μmol/L,(28.20±6.74)μmol/L比(11.35±3.20)μmol/L〕水平均明显高于中度组和轻度组(P<0.01),且中度组血清miR-17-5p〔(2.52±0.90)比(1.20±0.47)〕及Hcy〔(18.36±4.82)μmol/L比(11.35±3.20)μmol/L〕水平均明显高于轻度组(P<0.01)。ROC曲线分析显示,血清miR-17-5p及Hcy水平预测AIS患者预后不良的最佳截值分别为2.06、17.62μmol/L,两项联合预测AIS患者预后不良的曲线下面积〔0.918(95%CI:0.860~0.975)〕较高,其敏感度和特异度分别为92.0%和85.3%。相关分析结果显示,预后不良组血清miR-17-5p及Hcy水平与NIHSS(分别r=0.772、0.853,P<0.01)及mRS评分(分别r=0.740、0.807,P<0.01)均呈正相关。结论血清miR-17-5p及Hcy水平升高与AIS患者神经功能缺损的严重程度及预后不良相关,且miR-17-5p联合Hcy对AIS患者预后预测具有较高的价值。

lncRNA GAS6-AS2靶向miR-125a-3p调控肺癌A549细胞紫杉醇敏感性

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)GAS6-AS2对肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭及紫杉醇(paclitaxel,PTX)敏感性的影响及其分子机制。方法:用qPCR法检测肺癌A549和A549/PTX细胞中GAS6-AS2和miR-125a-3p的表达水平。用脂质体转染技术,分别将si-NC、si-GAS6-AS2、miR-NC、miR-125a-3p、pcDNA、pcDNA-GAS6-AS2、si-GAS6-AS2+anti-miR-NC、si-GAS6-AS2+anti-miR-125a-3p等转染入A549/PTX细胞,同时用不同浓度(1、5、10、20、40 nmol/L)PTX处理A549和A549/PTX细胞,WB法检测细胞中增殖、迁移与侵袭相关蛋白cyclin D1、p21、MMP2和MMP9的表达水平,MTT法检测PTX对A549/PTX细胞的增殖抑制作用,Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力。用双荧光素酶报告基因实验验证GAS6-AS2和miR-125a-3p之间的调控关系。结果:GAS6-AS2在A549/PTX细胞中表达水平显著高于A549细胞(P<0.01),miR-125a-3p在A549/PTX细胞中表达水平显著低于A549细胞(P<0.01)。不同浓度PTX处理后A549/PTX细胞的增殖抑制率显著低于A549细胞(均P<0.01),且呈浓度依赖性。抑制GAS6-AS2或过表达miR-125a-3p联合PTX处理均可抑制A549/PTX细胞的迁移和侵袭能力,增强PTX对细胞的增殖抑制,上调p21表达量,下调cyclin D1、MMP2和MMP9表达量(均P<0.01)。GAS6-AS2靶向负调控miR-125a-3p的表达。干扰miR-125a-3p可逆转抑制GAS6-AS2对A549/PTX细胞增殖、迁移、侵袭和PTX敏感性的作用(均P<0.01)。结论:抑制GAS6-AS2通过靶向miR-125a-3p抑制肺癌A549/PTX细胞的增殖、迁移和侵袭,增强细胞PTX敏感性,GAS6-AS2是肺癌潜在的分子靶点。

血浆及单核细胞中microRNA表达水平与精神分裂症患者的相关性研究

目的探讨血浆及外周血单核细胞microRNA表达水平在精神分裂症患者中的变化及临床意义。方法选取儋州市人民医院收治的174例精神分裂症患者作为病例组和80例健康体检者作为对照组。采用实时定量荧光PCR检测两组血浆和外周血单核细胞内8种microRNA(MiR-195,MiR-346,MiR-181b,MiR-212,MiR-30e,MiR-432,MiR-7和MiR34a)的相对表达水平,并比较血浆和外周血单核细胞内microRNA的差异性。应用ROC曲线分析microRNA作为精神分裂症诊断标准的敏感度和特异度及Logistic回归分析microRNA判别精神分裂症的相对危险度。结果病例组血浆MiR-195,MiR-181b,MiR-30e及MiR-7(3.11±1.05,2.18±0.72,1.85±0.74和9.61±1.87)表达水平较对照组(4.48±1.07,2.92±0.86,3.53±1.07和11.96±2.73)显著上调(P<0.05或P<0.01);病例组外周血单核细胞MiR-181b,MiR212,MiR-30e及MiR-34a(-4.20±1.1 6,0.27±0.55,-4.83±1.05和2.64±1.08)表达水平较对照组(-3.56±0.81,0.91±0.68,-3.49±1.22和3.95±1.03)显著上调(P<0.05或P<0.01)。Logistic回归分析显示,血浆MiR-181b及MiR 30e均具有显著相对危险度(OR=2.357,95%CI:1.361~4.093;OR=2.064,95%CI:1.147~3.815),外周血单核细胞MiR-30e也具有显著相对危险度(OR=1.628,95%CI:0.914~2.926)。ROC曲线分析显示,血浆及外周血单核细胞MiR-181b的AUC及95%CI分别为0.702(0.632~0.784),0.658(0.593~0.736);血浆及外周血单核细胞MiR-30e的AUC及95%CI分别为0.775(0.706~0.857),0.758(0.686~0.839)。Spearman相关性分析显示,血浆MiR-181b与血浆MiR-30e呈明显相关(r=0.547,P=0.043)。结论 microRNA在精神分裂症患者中异常表达.血浆及外周血单核细胞MiR-181b,MiR-30e对精神分裂症患者具有较好的诊断价值。

LncRNA BCAR4调控JAK2/STAT3信号通路对食管癌细胞侵袭、迁移、炎症和凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)乳腺癌抗雌激素抵抗4(BCAR4)介导JAK激酶2/信号转导与转录因子3(JAK2/STAT3)信号通路对食管癌细胞迁移、侵袭、凋亡和炎症因子分泌的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测BCAR4在食管癌细胞中的表达。在食管癌EC9706细胞中转染BCAR4小干扰RNA(si-BCAR4),Transwell和流式细胞术分别检测细胞迁移、侵袭和凋亡,Western blot法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、磷酸化JAK2(pJAK2)、JAK2、磷酸化STAT3(pSTAT3)、STAT3表达。使用JAK2/STAT3信号通路激活剂Colivelin处理EC9706细胞,观察其在BCAR4沉默诱导的食管癌细胞迁移、侵袭、凋亡和炎症因子表达中的作用。结果:与人正常食管鳞状上皮Het-1A细胞比较,食管癌细胞TE-10、OE19、EC9706中BCAR4表达量明显升高(P<0.05)。沉默BCAR4的表达可明显降低EC9706细胞迁移数、侵袭数以及IL-1β、TNF-α、IL-6、pJAK2和pSTAT3表达,并显著提高细胞凋亡率(P<0.05),而对JAK2、STAT3蛋白水平无显著影响(P>0.05)。激活JAK2/STAT3通路逆转了BCAR4沉默对EC9706细胞迁移、侵袭和炎症因子表达的抑制和对细胞凋亡的诱导。结论:LncRNA BCAR4沉默通过调控JAK2/STAT3信号通路活性,抑制食管癌细胞的迁移、侵袭和炎症因子的分泌,并促进细胞凋亡。

p16蛋白在宫颈癌中的表达及其与患者临床特征和预后的关系

目的探讨p16蛋白在宫颈癌组织中的表达情况及其与患者临床特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测116例宫颈癌患者的宫颈癌组织标本和100例子宫肌瘤患者的正常宫颈组织标本中p16蛋白的表达情况,分析宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达情况与宫颈癌患者临床特征和预后的关系。结果宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达率明显高于正常宫颈组织(P<0.01)。不同年龄、肿瘤直径、病理类型、宫颈癌分期宫颈癌患者宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);分化程度为低分化、有淋巴结转移宫颈癌患者宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达率均高于分化程度为中高分化、无淋巴结转移的宫颈癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Log-rank检验结果显示,p16蛋白阴性表达患者的生存情况优于p16蛋白阳性表达患者(P<0.05)。结论低分化、有淋巴结转移宫颈癌患者宫颈癌组织中p16蛋白的阳性表达率较高,且p16蛋白阴性表达宫颈癌患者的生存情况更优。

miR-98调节IL-6/STAT3通路对肺癌HCC827细胞吉非替尼耐药的影响

目的:探究microRNA-98(miR-98)调节白细胞介素-6/信号传导与转录激活因子3(IL-6/STAT3)通路对肺癌HCC827细胞吉非替尼耐药(GR)的影响。方法:体外培养肺癌HCC827细胞(NC组),采用肝细胞生长因子(HGF)联合吉非替尼反复诱导肺癌HCC827细胞建立吉非替尼耐药HCC827细胞(GR组),转染miR-98 mimics/NC,分别设为mimic组和mimic-NC组,另外将亲本HCC827细胞作为对照组(Con组)。采用噻唑蓝(MTT)试剂盒检测细胞活性,流式细胞仪检查细胞凋亡情况,实时定量PCR(RT-qPCR)检测细胞miR-98、IL-6、STAT3 mRNA表达,免疫印迹(WB)检测细胞IL-6、STAT3蛋白表达。结果:随吉非替尼处理浓度增加,HCC827细胞、HCC827 GR细胞活性依次降低(P<0.05),同一浓度,HCC827 GR细胞活性高于HCC827细胞(P<0.05)。与Con组比较,NC组、mimics-NC组细胞中miR-98水平降低,而mimics组细胞中miR-98水平明显高于Con组、NC组、mimics-NC组(P<0.05);与Con组比较,NC组、mimics-NC组、mimics组细胞中IL-6、STAT3 mRNA及蛋白水平、细胞活性明显升高,而细胞凋亡率明显降低(P<0.05),且mimics组细胞中IL-6、STAT3 mRNA及蛋白水平、细胞活性明显低于NC组、mimics-NC组,而细胞凋亡率明显高于NC组、mimics-NC组(P<0.05)。结论:miR-98过表达可扭转HCC827细胞吉非替尼耐药,其作用机制可能与抑制IL-6/STAT3通路活化有关。

HIF-1α通过调控miR-544对A549肺癌细胞免疫逃逸及NCR1/NKP46通路的影响

目的探究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在A549肺癌细胞免疫逃逸中的作用,并初步探究可能作用机制。方法体外培养A549肺癌细胞,转染si-HIF-1α质粒分为Control组、si-NC组、si-HIF-1α组;转染miR-544 mimics质粒分为Control组、NC组、miR-544 mimics组。免疫印迹法检测转染后细胞中HIF-1α蛋白表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法miR-544表达;将转染后三组细胞与NK-92MI细胞以靶效比1:5共培养,Elisa法检测培养液中干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)水平;CCK8法检测NK-92MI细胞免疫杀伤率;荧光素酶活性检测HIF-1α、miR-544(miR-544、NCR1)调控关系;流式细胞术检测细胞NKP46水平。结果与Control、si-NC组相比,si-HIF-1α组A549细胞中HIF-1α表达降低,共培养组细胞IFN-γ、IL-2、TNF-ɑ水平升高,NK-92MI细胞对A549细胞免疫杀伤率升高,miR-544表达升高(P<0.05)。在HIF-1α3’UTR-Wt细胞中,与si-NC组相比,miR-544 mimics组荧光素酶活性降低(P<0.05)。与Control、NC组相比,miR-544 mimics组IFN-γ、IL-2、TNF-ɑ水平降低,NK-92MI细胞对A549肺癌细胞免疫杀伤率降低,NCR1表达、NKP46比例降低(P<0.05)。在NCR1 3’UTR-Wt细胞中,与NC组相比,miR-544 mimics组荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论体外抑制A549肺癌细胞中HIF-1α表达后能够促进NK细胞释放免疫因子,增强NK细胞免疫杀伤性,进而抑制A549细胞免疫逃逸,其作用可能与调控miR-544靶向抑制NCR1/NKP46通路实现的。

薯莨提取物通过KTN1反义RNA 1对食管癌细胞生物行为的影响

目的研究薯莨提取物是否影响食管癌细胞的生物学行为。方法自2019年1月至2020年1月,采用(10、20和30 mg/L)浓度的薯莨提取物处理食管癌Eca109细胞,分别记为薯莨-L组、薯莨-M组、薯莨-H组,另以未加薯莨提取物的Eca109细胞作为对照组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定细胞增殖,克隆形成实验分析细胞克隆能力,蛋白质印迹法检测周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)、上皮钙黏素(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达,Transwell分析细胞迁移、侵袭,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测长链非编码RNA(lncRNA)KTN1反义RNA 1(KTN1-AS1)表达。在Eca109细胞中转染KTN1-AS1小干扰RNA(si-KTN1-AS1),或转染KTN1-AS1过表达质粒(pcDNA3.1-KTN1-AS1)并使用薯莨提取物处理,观察其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果与对照组相比,薯莨-L组、薯莨-M组、薯莨-H组Eca109细胞的抑制率[(1.06±0.21)%比(19.25±1.68)%比(38.57±3.69)%比(62.14±6.06)%]、P21、E-cadherin蛋白水平明显提高,细胞的克隆形成数、迁移细胞数[(142.00±11.59)比(121.00±11.07)比(94.00±9.26)比(73.00±7.15)]、侵袭细胞数[(81.00±8.03)比(67.00±6.21)比(50.00±5.04)比(37.00±3.56)]、MMP-2蛋白表达量、KTN1-AS1表达量显著减少(P<0.05),均呈浓度依赖性。抑制KTN1-AS1明显增加Eca109细胞的抑制率[(1.04±0.17)%比(47.81±4.55)%]、E-cadherin、P21蛋白表达量,显著降低迁移细胞数[(144.00±13.52)比(85.00±8.51)]、侵袭细胞数[(80.00±8.11)比(47.00±4.36)]、克隆形成数和MMP-2蛋白水平(P<0.05)。过表达KTN1-AS1能减弱薯莨提取物对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论薯莨提取物通过下调食管癌细胞中KTN1-AS1的表达,发挥抑制细胞增殖、迁移和侵袭的作用。