两种中医体质高血压病患者的表型与α-内收蛋白基因多态性分型的关系

目的探讨高血压病患者阳亢和痰湿两种体质分类的表型,与α内收蛋白(alphaadducin,ADD1)基因多态性的分布作相关性分析。方法以收缩压(systolicbloodpressure,SBP)、舒张压(diastolicbloodpressure,DBP)、体重指数(bodymassindex,BMI)、空腹血糖(fastingbloodglucose,FBG)、肌酐(creatinine,Cr)、尿酸(uricacid,UA)、胆固醇(totalcholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)为观察指标,采用MALDITOF质谱检测技术进行ADD1Gly460Trp分型。结果207例高血压病患者按中医体质分型分为阳亢组113例,痰湿组94例;痰湿质高血压病患者在BMI、DBP、FBG、UA明显高于阳亢质高血压病患者;阳亢质和痰湿质高血压病患者ADD1基因GG型、GT型、TT型分别占29.2%、41.6%、29.2%和28.7%、48.9%、22.3%,差异无显著性(P>0.05),高血压的相关表型在3种基因分型中差异无显著性(P>0.05);TT型基因的阳亢组和痰湿组高血压病患者有4项指标差异显著,BMI(kg/m2)分别为24.11±3.04和26.20±2.30(P=0.01)、DBP(mmHg)分别为96.79±4.05和99.56±3.90(P=0.016)、FBG(mmol/L)分别为5.01±0.53和5.51±1.07(P=0.028)、UA(μmol/L)分别为302.22±71.95和358.25±88.75(P=0.028)。结论ADD1基因多态性的分布在2种不同体质的分类之间差异无显著性;带有ADD1TT型基因的痰湿质高血压病患者心脑血管危险因素更多,他们的预后可能要比阳亢质高血压病患者更差。

银杏叶提取物(EGb)对大鼠局部脑缺血及颈动脉血栓形成的保护作用

应用大鼠大脑中动脉梗塞和血栓形成导致缺血性脑卒中的实验模型，观察银杏叶提取物（ＥＧｂ）对脑缺血面积和由缺血造成的行为障碍的影响。结果表明预防或治疗性ｉｖ大剂量ＥＧｂ（２００ｍｇ·ｋｇ－１）均能显著减少脑缺血面积，明显改善大鼠脑缺血造成的行为障碍，其预防作用似优于治疗作用。预防性ｉｖ小剂量ＥＧｂ（１００ｍｇ·ｋｇ－１）也能明显减少血栓形成性脑缺血面积，改善梗塞和血栓形成性脑缺血所致的行为障碍，与阳性对照药尿激酶和尼莫地平作用相同。实验还发现ＥＧｂ有抑制大鼠电刺激颈总动脉的血栓形成的作用，且其对抗血栓形成强度具剂量依赖性。提示ＥＧｂ对缺血性脑卒中和血栓形成有预防和治疗作用。

一氧化氮缺乏与高血压以及脑肾心组织损伤的研究

目的和方法：给自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）使用一氧化氮合酶竞争性拮抗剂Ｌ－ＮＮＡ后观察一氧化氮（ＮＯ）缺乏对高血压及脑肾心组织损伤的影响。结果：饲ｌ－ＮＮＡ的ＳＨＲ血压进一步升高，脑卒中发生显著增加，卒中率７８２５％，肾心缺血性病变明显加重，大鼠存活时间显著缩短；而对照ＳＨＲ无一例发生脑卒中，同时给予ＮＯ合成底物左型精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）脑卒中发生显著少于单饲Ｌ－ＮＮＡ，卒中率为２５％，Ｐ＜００５，肾心的缺血性病变也显著减轻，大鼠存活时间显著延长。结论：提示ＮＯ在调节ＳＨＲ血管张力，保证脏器血液供应。

血管紧张素原基因多态性与高血压血尿醛固酮水平相关

目的研究血管紧张素原(Angiotensinogen,AGT)基冈5个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)及其构成的单倍型在中国汉族人群中与原发性高血压的相关性及各SNP与高血压患者血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血浆和尿醛固酮(Ald)水平的关系。方法采用MassARRAYTM系统质谱检测技术,在500例原发性高血压患者和500名正常对照者中,对AGT基因启动子区域的C-532T、A-20C、G-6A及编码区的T174M和M235T进行基因分型。用放免法检测高血压患者PRA、AngⅡ、血尿Ald水平。结果5种SNP的等位基因频率和单倍型分布在原发性高血压组和对照组中均无显著差异(P>0．05);男性高血压患者中C-532T多态CT+TT基因型个体尿Ald水平显著高于CC型个体(6．52 vs 5．19μg／d,P=0．03);女性高血压患者G-6A多态GG+ GA基因型个体血Ald水平显著高于AA型个体(78．63 vs 58．86 pg/ml,P=0．015);女性高血压患者M235T多态MM+MT基因型个体血Ald水平显著高于TT型个体(78．73 vs 58．81 pg／ml,P=0．03); A-20C多态AC+CC基因型与G-6A多态GG+GA基因型联合者尿Ald水平(P<0．05)、体重指数(P <0．01)显著高于其他联合基因型。结论AGT基因5个SNP及单倍型分布在高血压患者和正常血压对照之间无显著差异,AGT基因的SNP分布与原发性高血压患者血尿醛固酮水平有关。

α-内收蛋白基因Gly460Trp多态性与原发性高血压相关关系研究

目的：研究α－内收蛋白基因型与原发性高血压的关系。方法：用突变分离聚合酶链反应（ＭＳ－ＰＣＲ）的方法分别检测１３８ 例原发性高血压患者和１２１ 例正常血压者α－内收蛋白基因Ｇｌｙ４６０Ｔｒｐ 多态性；测定体重指数（ＢＭＩ）、空腹血糖、血浆总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、血浆尿素氮（ＢＵＮ）、肌酐（Ｃｒ）等临床指标。结果：不同α－内收蛋白基因型及基因频率在高血压组与正常组间分布无显著性差异；各基因型之间ＢＭＩ、空腹血糖、ＴＣ、ＴＧ、ＢＵＮ、Ｃｒ水平无显著性差异（Ｐ＞ ０．０５）。结论：国人α－内收蛋白基因４６０Ｔｒｐ 频率高于高加索人种而与日本人相似；在中国上海人群中。

甲磺酸多沙唑嗪对大鼠降压作用的研究

自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）分为５组作实验。对照组ｌｍｇ／ｋｇ、哌唑嗪组０．３ｍｇ／ｋｇ、ｌｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ多沙唑嗪组。灌胃给药后３个剂量多沙唑嗪对ＳＨＲ２４ｈ的血压观察显示该药降压作用迅速且持久，血压于４ｈ达最低，于８ｈ仍显著降低，与呢唑嗪降血压作用类似。连续３周降血压治疗实验，多沙唑嗪同样有明显的降血压作用，也与哌唑嗪一致。ｌｍｇ／ｋｇ多次唑嗪静脉注射使麻醉ＳＨＲ血压迅速而持久下降，对心电图、心率和呼吸率无明显影响。

地龙拮抗左旋亚硝基精氨酸的致卒中作用

地龙是祛风平痉活血中药,具降低血压,减少脑卒中危险因素发生的作用。本实验观察地龙对一氧化氮(NO)缺乏时,自发性高血压大鼠脑卒中的发生率。结果发现地龙通过增加血管内膜一氧化氮合成酶活性[即左旋亚硝基精氨酸(L-NNA)]致 NO 缺乏组是(8.63±2.80)pmol·μg·pro^(-1)·min^(-1),同时加饲地龙组上升至(10.87±2.90)pmol·μg·pro^(-1)·min^(-1),增加胸主动脉及供应脑颈内动脉一氧化氮基础释放和激动剂刺激释放(P<0.05),对防治脑卒中有益。本研究阐述了地龙防治脑卒中机制,为今后开发利用地龙提供理论依据。

血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性检测方法的研究

目的 采用三条引物法进行血管紧张素转换酶 (ACE)基因分型检测 ,并与Rigat法进行比较 ,以探讨Rigat造成DD型分型的错判率 ,并用此方法检测了中国汉族人群中ACE基因I/D基因型的分布频率以及插入 (I) /缺失 (D)多态性与高血压病 (EH)间的相关性。方法 EH患者 (EH组 ) 2 0 6例 ,用上述两种方法进行ACE基因分型 ;正常血压组 (NT组 ) 15 6例以及核心家系 2 5个共 118例 ,三条引物法进行ACE基因分型。结果 EH组Rigat法得出的DD型比例较三条引物法高。与三条引物法相比较 ,Rigat法对DD型的错判率为 13 .0 4 %。用三条引物法进行基因分型的结果如下 :( 1)在NT组 ,ACE各基因型的分布频率为 :II型 0 .5 1,ID型 0 .4 1,DD型 0 .0 8。等位基因频率为 :I 0 .71,D 0 .2 9。( 2 ) 2 5个EH家系所有成员的基因分型结果 ,完全符合孟德尔遗传规律。 ( 3 )EH与NT两组间基因型和等位基因频率无显著性差异。结论 三条引物法 1次完成ACE基因分型 ,有良好的特异性、准确性和重复性。

应用微卫星DNA基因分型技术进行双生子卵型鉴定

目的 用微卫星 DNA基因扫描和分型技术建立双生子卵型鉴定法。方法 选取 6 9对同性别双生子、6对异性别双生子和 17对同胞对 ,抽提基因组 DNA。单盲设计 ,随机编号后 ,采用 9对荧光标记的、在中国人群中具有高度杂合度的短串联重复序列 (short tandem repeat,STR)引物 ,进行基因扫描和分型分析 ,根据这 9个 STR基因型的一致性来鉴别卵型。结果 9个 STR基因型完全一致的 6 3对受检者全部为同性别双生子。 6对异性别双生子和 17对同胞对的 STR基因型均不完全一致。另有 6对同性别双生子的 STR基因型也不完全一致。经计算采用 6个或 5个 STR位点判定同性别同卵双生的可信性分别大于99.6 %和 99%。采用全部 9个位点判定同性别同卵双生的可信性大于 99.95 %。结论 STR基因扫描和分型技术为在基因组水平上直接判别双生子卵型 ,提供了一种准确、可靠的鉴定方法 ,它还有快速、简便等优点。

高血压定位区域犬尿氨酸酶基因多态性与高血压病相关

目的检测中国汉族人群高血压病定位区域2q14-q23内犬尿氨酸酶基因(kynureninase,KYNU)调控区和编码区的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)及与高血压病的相关性。方法采用直接测序法检测KYNU基因启动子区和外显子序列中的SNP。应用变性高效液相色谱分析(DHPLC)技术对位于编码区且改变氨基酸编码的Lys412Glu(A/G)多态在456例高血压病患者和430例正常对照者中进行分型和关联研究。结果共检测得KYNU基因的16个SNP,其中启动子区6个,编码区2个(均改变氨基酸编码)。Lys412Glu多态基因型分布(χ2=6·693,P=0·035)和等位基因频率分布(χ2=4·188,P=0·041)在高血压病组和正常对照组间差异均有统计学意义,Lys412Glu等位基因频率分布在男性高血压病组和正常对照组间差异有统计学意义(χ2=4·424,P=0·035)。结论中国汉族高血压病定位区域内KYNU基因Lys412Glu多态可能与高血压病相关。

苯丙氨酸阻止幼年自发性高血压大鼠血压升高机理的初步探讨

３％苯丙氨酸喂饲幼年（５～６周）自发性高血压大鼠能阻止血压随年龄的升高。喂饲６周后对照及处理大鼠血压分别为２５．８±４．４ｋＰａ（１９４／３３ｍｍＨｇ）及２２．９±３．０ｋＰａ（１７２／２２ｍｍＨｇ），差异有显著性。大鼠喂饲苯丙氨酸后血清谷丙转氨酶（ＡＳＴ），谷草转氨酶（ＡＬＴ）及尿素氮（ＢＵＮ）等指标值下降。提示长期应用苯丙氨酸对肝、肾无不良反应。喂饲苯丙氨酸的大鼠尾核酪氨酸羟化酶活性显著增高，而中枢儿茶酚胺含量不增加，。提示尾核儿茶酚胺更新加快，这种作用可能是苯丙氨酸抑制自发性高血压鼠血压升高的机理之一。

人2号染色体一个高血压病易感基因的精细定位

运用荧光标记－半自动基因扫描分型技术，在中国上海人群中对一个高血压病易感基因位点进行精细定位．结果显示：２号染色体从１５７．１６～１６２．４６ｃＭ这一５．３ｃＭ的范围内，出现了一个持续的ＬＯＤ值高峰．该范围内所有ＬＯＤ值均在２．０以上，对应Ｐ值均小于０．００１．最大ＬＯＤ值为２．２４（Ｐ＝ ０．０００６７，１６０．５２ ｃＭ）．单点分析峰值在Ｄ２Ｓ１５１（ＬＯＤ＝１．８６， ＮＰＬ Ｚ＝ ２．６０）．另外，有多个位点存在传递不平衡．最终，将该易感基因定位于３ｑ１４－ｑ２３（Ｄ２Ｓ１５１－Ｄ２Ｓ２３７０），这与Ｓｔｏｌｌ等人用比较基因组法将大鼠数量性状位点（ＱＴＬ）定位于人类基因组所得结果一致．以上结果提示，在中国上海人群中，２号染色体２ｑ１４－ｑ２３这一区域值得进一步研究．