壳寡糖对过氧化氢诱导肝细胞损伤的改善作用及机制

目的:评估壳寡糖(chitooligosaccharides,COS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导肝细胞损伤的改善作用。方法:通过H_(2)O_(2)建立L-02细胞氧化应激损伤模型,对活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位以及IL-6、TNF-α等病程相关基因水平进行分析。结果:COS可改善H_(2)O_(2)损伤L-02细胞的增殖活力、抑制线粒体膜电位下降和ROS水平升高(P<0.05)。单细胞纳米生化分析结果显示,COS处理可以平衡H_(2)O_(2)损伤L-02细胞的ROS水平波动幅度。另外,COS改善了炎症(IL-6、TNF-α)、凋亡(Caspase 3、Caspase 9、Bax、Bcl-2)及氧化应激(Nrf2、HO-1)相关基因转录水平,表现出抗凋亡和抗氧化应激的作用。结论:COS对H_(2)O_(2)损伤的L-02细胞具有保护作用,本实验可为COS的应用开发提供理论参考。

异菝葜皂苷元对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响

目的:探讨菝葜皂苷元对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响及机制。方法:采用MPP+处理人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞构建体外PD细胞模型。取对数生长期的SH-SY5Y细胞分为四组:Control组(正常对照组),MPP+组(模型组),异菝葜皂苷元组(10μM),MPP++异菝葜皂苷元组(3 m M,10μM)。首先采用细胞增殖实验(CCK-8)检测异菝葜皂苷元作用的最佳浓度及对SH-SY5Y细胞活力的影响。采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测异菝葜皂苷元对SH-SY5Y细胞凋亡率的影响,采用蛋白免疫印迹实验检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的蛋白表达。结果:细胞活力实验确定10μM/m L的异菝葜皂苷元作为后续试验的添加浓度。与对照组相比,MPP+组细胞活力显著降低(P<0.001),细胞凋亡率显著升高(P<0.001),凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2表达显著升高(P<0.01)。相较于MPP+组,MPP++异菝葜皂苷元组细胞活力显著升高(P<0.001),细胞凋亡率显著降低(P<0.01),凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2表达显著升高降低(P<0.01)。结论:异菝葜皂苷元可以抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,可能与其调节抗凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的蛋白表达有关。