基于N6-甲基腺苷修饰与免疫细胞浸润的结直肠癌预后模型构建及验证

目的探讨N6-甲基腺苷(m^(6)A)修饰相关基因和免疫细胞浸润在结直肠癌(CRC)中的预后价值并构建相应风险模型预测患者临床结局。方法从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)下载CRC患者的肿瘤组织转录组数据及匹配临床信息,通过共识聚类及单样本基因组富集分析明确m^(6)A修饰相关基因及免疫细胞浸润在CRC中的预后价值。基于加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选与两者相关的预后基因,运用Lasso回归分析构建多基因风险模型,并在基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库中对筛选出的预后基因进行表达差异分析。通过Kaplan-Meier生存分析明确风险模型在不同亚组及外部验证队列中的预测效能。结果基于21个m^(6)A修饰相关基因及24个免疫细胞浸润的特征表型均可以显著区分TCGA队列中CRC患者预后。CRC组织中多数m^(6)A修饰相关基因与免疫细胞浸润显著相关。WGCNA及Lasso回归分析筛选出4个预后基因,分别为内凝集蛋白1、淋巴细胞抗原6复合位点G6D、无调性同族体1和基质金属蛋白酶28。在结直肠癌组织中,淋巴细胞抗原6复合位点G6D和基质金属蛋白酶28的表达与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P<0.05)。基于上述预后基因构建的风险模型能够在TCGA队列的不同临床亚组及GEO验证队列中有效识别预后不良的潜在风险人群。结论基于m^(6)A修饰及免疫细胞浸润构建风险模型能够有效预测CRC患者的临床结局,相关预后基因有望成为抗CRC的潜在分子靶点。

脱氧核糖核酸拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1与肿瘤的研究进展

脱氧核糖核酸(DNA)损伤应答(DDR)是维持内稳态及肿瘤发展重要机制之一。DNA拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1(TopBP1)在维持基因组稳定性及调控DDR相关信号通路中扮演着关键角色。最新研究发现,TopBP1通过多种分子机制促进肿瘤细胞的生长、转移及耐药,并且与肿瘤发病风险及预后显著相关。本文对TopBP1在乳腺及妇科、呼吸及消化系统肿瘤中的最新研究进展进行综述,以期深入了解TopBP1在不同肿瘤中的作用机制,推动其转化为临床标志物或药物干预靶点,并为基于DDR的抗癌策略提供新思路。

糖皮质激素对免疫检查点抑制剂治疗非小细胞肺癌临床效果的影响

目的 评估糖皮质激素(GC)对免疫检查点抑制剂(ICI)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)临床效果的影响。方法 回顾性分析扬州大学附属医院接受ICI治疗的131例晚期NSCLC患者的临床资料,根据患者在ICI治疗前后3个月内是否使用GC类药物(≥10 mg/d泼尼松或等效GC)分为GC组(n=79)与Non-GC组(n=52)。GC组根据GC用途不同分为非肿瘤症状相关组、肿瘤症状相关组、免疫相关不良事件(irAEs)组及化疗前预处理组。分析GC使用与患者一般临床特征的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线分析GC使用对患者总生存期(OS)及无进展生存期(PFS)的影响。采用单因素和多因素Cox风险比例回归模型分析GC使用是否为NSCLC患者预后的影响因素。结果 卡方检验分析显示,GC使用与患者年龄(χ^(2)=0.180,P=0.672)、性别(χ^(2)=3.179,P=0.075)、吸烟(χ^(2)=0.579,P=0.447)、病理类型(χ^(2)=0.628,P=0.428)、美国东部肿瘤协作组(ECOG)评分(χ^(2)=0.074,P=0.785)、治疗线数(χ^(2)=1.853,P=0.173)无相关性,与治疗策略有相关性(χ^(2)=3.998,P=0.046)。GC组的OS及PFS短于Non-GC组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,使用GC是晚期NSCLC免疫治疗患者OS(HR=1.82,P=0.026)和PFS(HR=1.76,P=0.012)的独立影响因素。亚组分析表明,相比于非肿瘤相关症状、irAEs、预处理,肿瘤相关症状患者采用GC治疗的OS(P=0.006)及PFS(P=0.011)较短。多因素Cox回归分析表明,GC用于治疗肿瘤相关症状是影响ICI治疗晚期NSCLC患者OS(P=0.001)及PFS(P=0.005)的独立危险因素。结论 GC的使用与ICI治疗晚期NSCLC的临床疗效呈负相关,特别是GC用于肿瘤相关症状时ICI疗效明显降低,因此接受ICI治疗的晚期NSCLC患者应慎重使用GC。

HOOK1在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨HOOK1在结直肠癌中的表达水平及其与患者临床病理特征的关系。方法结合前期生信分析结果,运用GEPIA数据库预测HOOK1在结直肠癌组织和正常结直肠组织中的表达差异及其对预后的影响。收集2021-10—2022-10在扬州大学附属医院行手术治疗的93例结直肠癌患者的癌组织及对应的癌旁组织标本,通过免疫组化方法检测结直肠癌组织及癌旁组织中HOOK1蛋白的表达量,分析其在结直肠癌中的表达水平及其与患者临床病理特征的关系。结果数据库预测结果显示,HOOK1在结直肠癌组织中的表达水平较正常结直肠组织显著升高,且HOOK1高表达组患者的生存率高于低表达组患者(P<0.05)。免疫组化染色结果提示,HOOK1主要表达于细胞质,在结直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);HOOK1在不同年龄、性别、发生部位、肿瘤大小、TNM分期、脉管侵犯及神经侵犯患者中表达差异无统计学意义(P>0.05);结直肠癌中HOOK1表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、分化程度密切相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HOOK1在结直肠癌组织中呈高表达,且HOOK1高表达的患者总体预后较好,提示HOOK1可作为结直肠癌诊疗的一项潜在肿瘤标记物。

MOB2敲低表达调控NDR1/2-YAP对肝癌细胞迁移和细胞自噬的研究

以肝癌细胞SMMC-7721和SK-HEP1为研究对象,构建慢病毒介导的单极纺锤体1结合蛋白2 (MOB2)稳定干扰表达的细胞模型;应用RT-qPCR和Western blotting方法检测相关基因的表达水平;利用Transwell细胞迁移试验和自噬流试验检测MOB2敲低表达对细胞迁移和细胞自噬的影响。结果表明:MOB2敲低表达可抑制肝癌细胞SMMC-7721和SK-HEP1的迁移,促进细胞自噬;MOB2敲低表达可上调NDR1/2的磷酸化水平(pT444/442)和YAP的磷酸化水平(pS127YAP),下调受YAP转录调控的下游靶基因CTGF和CYR61的表达;MOB2敲低表达可上调ULK1、LC3BII,下调SQSTM1/p62,促进细胞自噬流的形成。这一研究说明MOB2敲低表达可通过促进NDR1/2的磷酸化而负调控YAP的转录激活活性,调控下游与细胞迁移和自噬相关基因的表达,影响肝癌细胞的迁移和细胞自噬过程。

具核梭杆菌介导的上皮细胞间质转化对结直肠癌干细胞恶性潜能的影响

目的通过体外内实验明确具核梭杆菌(F_(n))对结直肠肿瘤干细胞(CSCs)恶性潜能的影响并初步探讨相关分子机制。方法采用流式细胞术检测结直肠癌细胞系HCT-116、HT-29、LOVO、SW480和SW620中CD133^(+)CD44^(+)细胞亚群比例,并选择比例最高的细胞系进行筛选。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、克隆形成及Transwell实验分别检测F_(n)干预后CD133^(+)CD44^(+)细胞亚群增殖、克隆形成、侵袭及迁移能力的改变。将裸鼠随机分为F_(n)干预组和对照组,构建裸鼠皮下移植瘤模型,明确F_(n)干预后CD133^(+)CD44^(+)细胞亚群体内成瘤能力的改变。采用蛋白质印迹法检测F_(n)干预后CD133^(+)CD44^(+)细胞亚群中上皮标志物、间质标志物及细胞增殖指标的表达水平。结果流式细胞术检测发现HCT-116细胞系中CD133^(+)CD44^(+)细胞亚群所占比例最高,为(87.59±0.37)%,因此选择该细胞系用于后续实验。CCK-8实验结果表明,F_(n)干预(F_(组别)=156.53,P_(组别)<0.001)及生长天数(F_(天数)=410.79,P_(天数)<0.001)的主效应差异有统计学意义,且两者联合有协同交互作用(F_(组别×天数)=19.83,P_(组别×天数)<0.001)。F_(n)干预组的克隆形成数目多于对照组,t=19.11,P<0.001。F_(n)干预组的细胞侵袭和迁移数量分别为(115.67±8.14)和(131.00±6.56)个,均高于对照组,均P<0.05。F_(n)干预组及对照组的皮下移植瘤体积分别为(1.66±0.57)和(0.69±0.23)cm^(3),重量分别为(1.66±0.40)和(0.58±0.24)g,均P<0.05。免疫组化实验结果显示,F_(n)干预组皮下移植瘤中Ki-67染色阳性率〔(80.60±5.86)%〕高于对照组〔(60.40±11.99)%〕,t=3.39,P=0.016。蛋白质印迹实验显示,F_(n)干预组较对照组E-cadherin表达水平下调,而N-cadherin、Snail及增殖细胞核抗原的表达水平上调。结论F_(n)通过调控上皮细胞间质转化促进CD133^(+)CD44^(+)结直肠癌细胞亚群的体内外恶性潜能,因此,靶向F_(n)有望成为抑制结直肠CSCs进而预防肿瘤复发转移的新策略。