超低位直肠癌保肛手术的临床疗效及生存质量分析

目的：探讨超低位直肠癌保肛手术的可行性及临床应用价值。方法：回顾性分析我院2009年1月至2013年9月收治的226侧接受超低位直肠癌根治术患者的临床资料，并采用Pearsonx0及t检验对117例超低位直肠癌保肛手术（观察组）与109例Miles手术（对照组）的术后短期并发症、肿瘤的局部复发、远处转移、生存率及生存质量等方面进行对比分析。结果：本组病例行传统的Dixon手术108例、直肠翻转肛门内拖出切割缝合改良Dixon手术9例，Miles手术109例，整个手术进程顺利。观察组的术中出血量较对照组少，肛周湿疹发生率较对照组高（P〈0．05）；其手术时间、术中收获淋巴结数、切口感染、肛门排气时间、尿潴留及其他术后短期并发症与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），但该组患者术后生活质量较高（P〈0．05）。随访12—57个月，观察组与对照组术后肿瘤的局部复发率、远处转移率及生存率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：严格把握手术指征，超低位直肠癌保肛手术可行，能够改善患者术后的生存质量。

胰十二指肠切除术后发生胰漏的危险因素分析

目的:分析胰十二指肠切除术后发生胰漏的危险因素。方法:将74例胰十二指肠切除术病人,根据术后有无胰漏分为胰漏组和愈合组。比较两组的年龄、性别、血色素、血清白蛋白、血糖、血清胆红素、术中出血量、手术时间、胰管粗细及胰腺硬度的差异;比较捆绑式胰肠吻合术后结合肠内营养支持与套入式端端胰肠吻合及胰管对肠黏膜端侧吻合胰漏发生率的差异。结果:除血清白蛋白、血清胆红素外,其余术前指标对胰漏的发生无明显影响。胰漏组的术中出血量多于愈合组(P<0.01),胰漏组的胰管直径小于愈合组(P<0.01),胰漏组的胰腺质地较愈合组软(P<0.01),捆绑式胰肠吻合术后给予肠内营养支持病人胰漏发生率较其他吻合方式明显减低(P<0.05)。结论:胰十二指肠切除术后胰漏发生与术前的低蛋白血症、高胆红素血症、术中的出血量、胰腺的质地、胰管粗细、吻合方式以及肠内的营养支持有密切关系,捆绑式胰肠吻合结合肠内营养支持能降低胰漏的发生率。

生长抑素与大肠癌细胞凋亡及调控基因bcl-2、bax及p53关系的研究

目的 探讨生长抑素 (SS)与大肠癌细胞凋亡指数 (AI)和凋亡调控基因p5 3、bcl 2、bax的关系。方法 采用免疫组织化学SABC法和分子生物学细胞原位凋亡检测技术中的TUNEL法 ,检测 6 2例大肠癌组织中SS、p5 3、bcl 2、bax及细胞凋亡的表达情况。结果 在大肠癌组织SS高表达组、中表达组的AI明显高于SS低表达组 (P <0 .0 1) ;p5 3、bcl 2、bax阳性表达率在SS低表达组、中表达组、高表达组三组间相比较存在着明显差别 (P <0 .0 5 ) ,其中bax在SS高表达组、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组 (P <0 .0 5 ) ;bcl 2与其相反。p5 3在SS高表达组的阳性表达率明显低于低表达组 (P <0 .0 5 ) ;而p5 3在SS中表达组表达的阳性表达率低于低表达组 ,但其统计无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论 生长抑素对大肠癌细胞凋亡的调控可能与 p5 3、bcl 2。

胃泌素调控ERK信号通路在促进大肠癌CACO2细胞增殖中的作用

目的:利用RNA干扰技术探讨ERK1/2基因在胃泌素促进大肠癌细胞株CACO2增殖中的作用及分子机制。方法:通过慢病毒感染细胞构建胃泌素受体(CCK-BR)阳性的细胞稳转株CACO2,应用qRT-PCR检测大肠癌细胞株CACO2中CCK-BR的表达情况。应用RNA干扰技术沉默ERK1/2基因后,分析其总的ERK基因的蛋白表达及其磷酸化水平变化。实验共分4组:对照组、阴性干扰组、胃泌素组及质粒干扰组。使用流式细胞仪Annexin V-FITC法检测各组细胞增殖指数及Western blot检测各组细胞ERK1/2蛋白的表达和磷酸化水平。结果:慢病毒感染后,在CACO2细胞中均检测到目的条带膜蛋白,CACO2细胞存在着一定量的CCK-BR mRNA表达,扩增产物为185 bp。筛选出干扰质粒,质粒与脂质体比例在1∶2,转染效率达到40%~50%,转染干扰质粒的细胞中ERK蛋白表达水平降低,从蛋白水平说明构建的质粒沉默有效。胃泌素组细胞增殖指数明显高于质粒干扰组,也高于阴性干扰组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。4组细胞间ERK1/2的蛋白表达及磷酸化水平比较,差异有统计学意义(P<0.01)。胃泌素组ERK1/2的蛋白表达及磷酸化水平明显高于质粒干扰组,也高于阴性干扰组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:胃泌素能够通过ERK信号通路促进体外大肠癌CACO2细胞增殖。通过RNA干扰技术有效地阻断ERK信号通路下调ERK蛋白磷酸化水平,有望为胃泌素依赖型大肠癌综合治疗寻找到一条新的切入途径。

促胃液素高表达大肠癌组织中microRNA表达差异分析

目的运用基因芯片技术筛选促胃液素(GAS)高表达的大肠癌组织中差异表达的微RNA(miRNA)。方法运用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测71例大肠癌患者癌组织标本中GAS的含量,分析大肠癌组织中GAS表达水平与临床病理特征的关系。选择GAS表达强阳性(高表达组)与阴性(对照组)的患者各4例,对其癌组织进行miRNA芯片分析,并采用qPCR验证差异表达的miRNA。结果 GAS含量≥50.00pg/g(阳性表达)的患者17例(23.9%),其余54例(76.1%)GAS表达阴性。癌组织中GAS表达水平与其分化程度、Dukes分期及组织学类型有关(P均<0.05)。GAS高表达组(GAS含量>200.00pg/g)中与对照组癌组织相比发生显著变化的miRNA共236个,与对照组比较,在高表达组中表达上调的miRNA共159个,表达下调的miRNA的数目为77个。筛选出GAS高表达组中的3倍以上表达差异的miRNA 24个,其中上调17个、下调7个;分别选择表达上调和下调的miRNA各3个进行qPCR验证,验证结果与芯片分析结果基本一致。结论 GAS高表达大肠癌组织中miRNA的表达存在显著变化,差异表达miRNA可能是治疗GAS高表达大肠癌的潜在靶点。

大肠癌中胃泌素、生长抑素mRNA的表达与细胞凋亡及Bcl-2、Bax的关系

目的:探讨大肠癌组织中胃泌素(GAS)、生长抑素(SS) mRNA及蛋白的表达与大肠癌细胞凋亡指数(AI)和 Bcl-2、Bax的相关性．方法:采用巢式RT-PCR方法检测62例大肠癌组织中 GAS、SS的基因表达,用TUNEL法检测细胞凋亡情况, 大肠癌组织中GAS、SS、Bcl-2、Bax的蛋白表达采用免疫组织化学S-P法. 结果:大肠癌组织中GAS、SS mRNA的表达与其蛋白表达基本一致．在大肠癌组织SS高表达组、中表达组的AI明显高于SS低表达组(q=5．06,q=3．95, 均P<0．01);而在GAS各表达组中的AI变化与此相反 (q=:6．66,q=6．33,均P<0．01)．Bax、Bcl-2阳性表达率在SS和GAS低表达组、中表达组、高表达组三组间相比较存在着明显差别(x2=9．24,x2=6．91; x2=7．17,x2=13．83,均P<0．05),其中Bax在SS高表达组(80％,8／10)、中表达组(76．5％,13／17)的阳性表达率明显高于低表达组(40．0％,14／35)(x2=5．24,x2= 6．09,均P<0．05);Bcl-2与其相反(x2=4．71,x2=4．70,均 P<0．05)．Bcl-2在GAS高表达组(90．9％,10／11)、中表达组(86．7％,13／15)的阳性表达率明显高于低表达组 (44．4％,16／36)(x2=5．60,x2=7．69,均P<0．05);Bax 在GAS高表达组(27．3％,3／8)的阳性表达率明显低于低表达组(69．4％,25／36)(x2=4．59,P<0．05);而Bax 在GAS中表达组(46．7％,7／15)的阳性表达率低于低表达组,但其无明显差别．GAS／SS积分比值变化与 Bcl-2呈正相关(r=0．34,P<0．01),与AI、Bax呈负相关 (r=-0.546,P<0．01;r=-0．299,P<0．05)．结论:GAS、SS对大肠癌细胞凋亡的调控可能与 Bcl-2、Bax的异常表达有关．

全肠外营养与肠外联合肠内营养对老年性胃癌根治术后早期的影响

目的:探讨经不同的营养途径支持对老年胃癌术后患者的疗效分析。方法:选取皖南医学院弋矶山医院胃肠二科2014年03月至2015年11月收治的老年性胃癌患者(年龄>70岁)并行胃癌根治术手术患者60例。随机分为30例肠外联合肠内营养组(EPN)和全肠外营养组(TPN)30例。分别对比分析术后营养指标、肝功能指标、并发症和术后恢复情况。结果:EPN和TPN两组内患者术后总蛋白(TP)、总蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)较术前比较差异均有统计学意义(P<0.05),EPN组术后TP、PA较TPN组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组内患者γ-谷氨酰转肽酶(GGT)差异有统计学意义(P<0.05),余肝功能指标差异无统计学意义(P>0.05),两组术后在并发症方面差异无统计学差异(P>0.05),EPN组在术后通气时间明显少于TPN组(P<0.05)。而术后住院天数,进流质时间与住院费用差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EPN可以缩短胃肠道恢复时间,缩短住院时间,肠内营养结合肠外营养是一种更好的策略,为老年胃癌患者接受外科手术治疗提供了营养支持。

MRCP在微创技术治疗胆囊结石合并胆总管结石中的应用

目的评价MRCP在内窥镜联合腹腔镜治疗胆囊结石合并胆总管结石中的应用价值及其微创方式的选择.方法对B型超声检查未发现胆总管结石,但临床高度怀疑的65例胆囊结石病人行MRCP检查,确认胆总管有结石者行EST治疗,术后3～5 d再行LC术;如未发现结石则可先行LC术,再根据术后的随访情况决定是否进一步行ERCP+EST.结果经MRCP检查发现胆总管结石13例,均成功行EST+LC术.未发现结石的52例仅行LC术.其中,除2例术后反复出现胆道感染、黄疸,经ERCP证实胆总管残留结石行EST取石外,其余病例术后随访1月～2年均未发现异常.结论根据MRCP检查结果选择不同的微创方式治疗可疑伴有胆总管结石的胆囊结石病人是安全可行的,可使胆总管无结石的可疑病人避免有创ERCP检查所带来的痛苦,值得推广.

P38信号转导通路在胃泌素促进人大肠癌细胞SW480增殖中的作用及其机制

目的：探讨胃泌素对人大肠癌细胞株SW480增殖、凋亡的影响，以及P38-丝裂素活化蛋白激酶（ MAPK）信号转导通路的关系。方法：体外培养大肠癌SW480细胞株，将细胞分为对照组、胃泌素组、丙谷胺组和胃泌素＋丙谷胺组，对照组不加药，其余组加不同浓度的药物处理。运用MTT法观察细胞凋亡情况，确立5-肽胃泌素和丙谷胺处理SW480细胞的最佳浓度；流式细胞术检测各组细胞增殖指数的变化；qRT-PCR检测大肠癌SW480细胞株胃泌素受体／胆囊收缩素-B受体（ CCK-2R） mRNA表达情况；Western blot 检测P38蛋白表达及其磷酸化水平。采用方差分析和SNK-q检验进行统计学分析。结果：SW480细胞中存在CCK-2R mRNA表达。胃泌素在6.25～200.00 mg／L范围内能抑制大肠癌SW480细胞的凋亡，且当浓度达12.50 mg／L时为最佳浓度（ P＜0.05）；单独丙谷胺对大肠癌SW480细胞凋亡无明显影响（ P＞0.05），但丙谷胺在8.00～256.00 mg／L范围内能明显拮抗胃泌素抑制SW480细胞的凋亡作用，其最佳浓度为16.00 mg／L （ P＜0.05）。胃泌素（12.50 mg／L）组细胞增殖指数为（34.56±1.41）％，显著高于对照组的（28.74±1.61）％和胃泌素（12.50 mg／L）＋丙谷胺（16.00 mg／L）组的（28.72±1.78）％（P＜0.05），而丙谷胺（16.00 mg／L）组细胞增殖指数为（27.75±2.29）％，与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；P38蛋白及其磷酸化在胃泌素组（12.50 mg／L）中表达水平低于对照组（P＜0.01），也低于胃泌素（12.50 mg／L）＋丙谷胺（16.00 mg／L）组（ P＜0.01）。结论：胃泌素可以抑制大肠癌细胞株SW480的凋亡、促进增殖，其作用可能是通过抑制P38及其磷酸化水平来实现的，但能够被其受体拮抗剂丙谷胺抑制。

“导师负责制”模式下普通外科临床实习的教学体会

在当前特殊的医疗环境下,如何在原有教学模式的基础上引入一些新颖的教学模式,增加一些新的思路和方法,帮助医学生更好地完成临床实习这一重要的学习阶段,一直是医学教育者不断探讨的问题。文章结合自身多年的临床教学经验,从入科宣教、教学模式改进、能力培养、医德医风及医患沟通等多个方面加以阐述。

生长抑素及类似物与大肠癌细胞凋亡(文献综述)

生长抑素及类似物具有广泛的抑制效应 ,可以抑制肿瘤的生长。目前临床上已运用于多种肿瘤的治疗。近来有关生长抑素与大肠癌细胞凋亡关系越来越为人们关注。

大肠癌胃泌素、生长抑素的表达及比势与细胞周期调控基因的相关性

目的:探讨大肠癌组织中胃泌素(GAS)、生长抑素(SS)的表达及其比势与细胞周期调控蛋白P16^(INK4a)、P21^(CIP1)及细胞周期素(Cyclins)、细胞周期依赖性蛋白激酶(CDKs)表达的关系.方法:随机选择79例大肠癌患者的手术切除标本,采用免疫组化SP法检测GAS、SS、P16^(INK4a)、P21^(CIP1)、Cvclin D1、Cvclin E、Cyclin A、Cyclin B1、CDK2、CDK4的表达情况.结果:Cyclin D1、CDK2、CDK4、Cyclin A在GAS高表达组、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组;而P16^(INK4a)、P21^(CIP1)阳性表达率与此相反.cyclin E在SS低表达组的阳性表达率明显高于中表达组、高表达组;P21^(CIP1)在ss高表达组、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组;CDK2在SS低表达组的阳性表达率明显高于SS高表达组.大肠癌组织中GAS、SS表达的积分比值(GAS/SS)与Cyclin D1(r =0.252)、Cyclin E(r=0.387)、Cyclin A(r= 0.466)、CDK2(r=0.519)、CDK4(r=0.434)呈正相关(P<0.01)与P16^(INK4a)(r=-0.385)、P21^(CIP1)(r =-0.454)蛋白的表达积分呈负相关(P<0.01).结论:GAS、SS对大肠癌细胞生长的调控可能与P16^(INK4a)、P21^(CIP1)、Cvclin D1、Cvclin A、CDK2、CDK4、cvclin E基因异常表达有关.GAS对大肠癌细胞周期的调控位点可能在G1、S、G2期,SS对大肠癌细胞周期的调控位点可能在G1/S、G2/M期的交界点,即S、M期的入口.对大肠癌GAS/SS积分比值分析、可作为临床大肠癌生物学行为的重要评估指标.

乳腺癌腋淋巴结转移影响因素分析

目的:探讨乳腺癌腋淋巴结转移的相关因素,为乳腺癌的治疗与预后提供理论依据。方法:收集皖南医学院弋矶山医院经手术治疗的乳腺癌病例137例,采用Logistic回归方法分析与乳腺癌腋窝淋巴结转移的相关因素。结果:60例患者发生了淋巴结转移,发生率为43.8%。肿瘤的大小(OR=2.139,P<0.05)和P53(OR=3.094,P<0.05)是淋巴结转移的危险因素,雌激素受体(OR=0.435,P<0.05)是淋巴结转移的保护因素,年龄、孕激素受体和人类表皮生长因子受体-2与淋巴结转移之间无统计学意义。结论:乳腺癌淋巴结转移与多种因素有关,P53阳性表达、较大体积的肿瘤易促进淋巴结转移,而雌激素受体阳性表达则可能抑制淋巴结转移。

腹腔镜结直肠癌手术新进展

目前腹腔镜结肠癌手术的近、远期疗效在国际上已得到公认;而腹腔镜直肠癌手术相对满意的近期疗效也逐渐得到认可,长期随访资料也初步证实其远期预后与开腹手术无明显差异,腹腔镜结直肠癌手术因此得到广泛开展。手术机器人、单孔腹腔镜手术、经自然腔道内镜手术的应用是未来腹腔镜结直肠癌手术发展的重要方向。

胃切除术后并发上消化道大出血的诊治分析

目的:探讨胃切除术后上消化道大出血的原因、诊断和治疗。方法:对我院2006年1月～2010年12月间收治的23例胃切除术后大出血患者的临床资料进行回顾分析。结果:本组中有10例行急诊胃镜检查,4例行超选择性血管造影检查,1例通过剖腹探查而得以诊断;有6例接受手术治疗,4例行超选择性血管栓塞治疗;治愈17例(73.9%),死亡6例(26.1%)。结论:超选择性血管造影及胃镜检查,有利于明确出血的部位及原因;选择恰当的治疗方式对防止再出血非常重要。

PTP1B基因对人胃癌细胞株的增殖和迁移能力的影响

背景与目的:胃癌是我国常见的消化道恶性肿瘤,术后易复发和转移。前期研究发现,蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B)基因与胃癌肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期有关。本研究通过RNA干扰技术和基因克隆技术分别沉默和上调胃癌细胞中PTP1B基因的表达,观察PTP1B基因对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:将靶向沉默PTP1B基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列和克隆人的PTP1B cDNA基因序列分别转染MKN28和MKN45细胞,采用实时定量PCR(quantitative realtime PCR,qRT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)分别检测转染后细胞中PTP1B基因和蛋白的表达水平,使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、Transwell迁移试验和划痕试验分别观察PTP1B基因对细胞增殖和迁移能力的影响。结果:转染shRNA后,MKN28细胞中PTP1B mRNA和蛋白表达量与空白对照组、阴性对照组相比抑制显著(P<0.05)。CCK-8增殖活性实验显示,shRNA沉默PTP1B基因表达后能显著抑制胃癌MKN28细胞在48、72和96 h的增殖活性(P<0.05)。Transwell迁移试验和划痕实验显示,PTP1B表达下调后胃癌MKN28细胞的迁移能力受到显著抑制(P<0.05)。而提高PTP1B在MKN45细胞中表达后,细胞的增殖和迁移能力则显著提高(P<0.05)。结论:PTP1B基因是胃癌细胞增殖和迁移的重要调控因子。

胰腺癌Bx-PC3细胞Survivin基因ShRNA质粒表达载体的构建

目的:构建针对胰腺癌Bx-PC3细胞Survivin基因2条shRNA的质粒表达载体。方法:以Survivin基因为靶点,通过自行设计并构建包含两段短发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA),携带有各自的U6启动子和终止码、共同的绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein,EGFP)基因和Neo基因的pGene-sil-1SurvivinshRNA载体,利用脂质体介导的方法转染人胰腺癌Bx-PC3细胞,RT-PCR观察其对Bx-PC3细胞Survivin基因表达的影响。结果:HE1质粒和HE2质粒的酶切鉴定正确,质粒转化菌液HE1、HE2进行测序分析均为插入正确的克隆质粒。胰腺癌Bx-PC3细胞转染成功,转染细胞后SurvivinmRNA的表达有明显抑制。结论:实验构建针对胰腺癌细胞Survivin基因2条shRNA的质粒表达载体成功。

JNK信号通路在胃泌素促进大肠癌细胞增殖中的作用

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是广泛存在于细胞内的一组丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,分为4个亚族,c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)/应激活化蛋白激酶(stress-activated protein kinase,SAPK)就是其中的一个亚族,主要功能是将细胞外的信号传导至细胞内。胃泌素属于胃肠肽,具有营养性,其主要生理功能是营养正常的胃肠道黏膜组织,使其生长,胃泌素分泌过度还会促进胃肠道肿瘤细胞的生长。本文对JNK信号通路在胃泌素促进大肠癌细胞增殖中的作用作一概述。

结肠癌靶向治疗的研究进展

结肠癌是最常见且近年发病率逐渐升高的消化道恶性肿瘤之一，在国内的一项流行病学数据显示，结肠癌的发病率已跃居所有恶性肿瘤第4位，病死率居第5位。右半结肠（RSC）和左半结肠（LSC）有明显不同的组织学和分子生物学特征。Bufill等首次较为系统地从流行病学、病理学、细胞遗传学、分子特征、致癌机制等方面阐述了左右半结肠癌的差异，并且提出左、右半结肠癌是两种疾病。手术治疗是结肠癌最常用的治疗方法，其次是辅助治疗，包括化学药物治疗及生物药物治疗即靶向治疗。