T-淋巴瘤细胞的超微结构

为了研究T细胞淋巴瘤患者骨髓中恶性T细胞(malignantTcell,MTC)的超微结构,用流式细胞术分析13例T细胞淋巴瘤患者骨髓浸润MTC抗原表达,电子显微镜观察MTC的形态结构。结果发现所有患者MTC大小不等,6/13例细胞大小轻度不均,7例显著不均,直径范围在12-28μm之间。所有患者MTC核异染色质少于正常淋巴细胞,核仁范围在2-8μm之间;10/13例细胞核不规则。8/13例MTC胞浆丰富;7/13例细胞表面有丰富的突起或伪足。5/13例Golgi体、分泌泡、致密颗粒和微丝较丰富;8/13例MTC线粒体肿胀明显。结论骨髓MTC体积普遍不均匀增大;细胞核折叠、切迹、扭曲与核旁微丝增加相关。患者MTC表面突起/绒毛与胞浆Golgi体、分泌泡、致密颗粒及中间微丝呈明显同步发育,大部分患者MTC线粒体明显水肿。

11例急性巨核系白血病患者巨核细胞的超微结构分析

为了研究急性巨核细胞白血病患者骨髓中幼稚巨核细胞的超微结构特点,根据电子显微镜观察结果,回顾性分析11例急性巨核白血病患者骨髓巨核细胞的形态结构和血小板过氧化物酶(PPO)表达情况。结果表明:11例中7例例巨核细胞直径在20μm以内,其中2例细胞直径10-15μm,PPO阳性率50%以上,大部分细胞外形规则,大小均匀,表面突起少,核不规则,核质比大,胞浆颗粒细小,分界膜发育不完全,管道排列无规律;5例巨核细胞直径20μm左右,PPO阳性率在8%-22%之间,核呈圆形或马蹄形,异染色质不等,其中3例无幼稚分界膜和致密颗粒,2例偶见。11例中5例细胞直径在20-40μm之间,PPO阳性率16%-80%,大细胞表面有不规则突起,核质比不等,核不规则,异染色质多,核仁不明显,胞质有成熟分界膜结构、管道系统和成熟α-颗粒。结论:大部分患者巨核细胞以Ⅰ期分化阶段为主,少数病例伴有少量Ⅱ、Ⅲ期细胞;相同或不同患者骨髓中未成熟巨核细胞的发育程度存在差异。

先天性红细胞生成障碍贫血I型的超微结构特征

本研究探讨Ⅰ型先天性红细胞生成不良性贫血(CDA-Ⅰ型)的超微病理特点和电镜诊断要点。用透射电子显微镜分析2例儿童患者骨髓有核红细胞的超微结构。结果表明:2例CDA-Ⅰ型患者骨髓幼红细胞比例增加,各阶段细胞存在不同程度巨幼样变;原红细胞核不规则,早幼或中幼红细胞可见奶酪核,约半数晚幼红细胞有核溶解和破碎现象,晚幼红细胞核损伤有时伴胞质溶解,细胞间染色质桥少见;各阶段红细胞核膜和内质网同时出现不同程度溶解。结论:CDA-Ⅰ型的主要超微结构特点为幼红细胞巨幼样增生,其次是中幼阶段核膜损伤和晚幼阶段的核溶解和核碎裂,生物膜系统广泛破坏是CDA-Ⅰ型主病理机制。

电镜观察骨髓有核细胞对非霍奇金淋巴瘤的诊断价值

目的总结透射电子显微镜观察骨髓有核细胞形态结构对非霍奇金淋巴瘤(NHL)诊断和鉴别诊断的作用。方法电镜观察骨髓有核细胞形态结构,根据中幼稚细胞种类和分化程度对患者进行诊断,回顾分析48例NHL患者的电镜和临床诊断符合率。结果48例患者中,电镜发现41例患者骨髓液中存在幼稚淋巴细胞(85.4%),21例电镜诊断NHL,9例提示急性淋巴细胞白血病(ALL),2例提示毛细胞白血病(HCL),2例提示慢性淋巴细胞白血病(CLL),1例浆细胞白血病(PL),6例淋系增殖疾病(LPD)未进行分类。7例患者电镜观察未发现或明确幼稚淋巴细胞,1例提示急性髓系白血病(AML),2例描述发现异常细胞,但未定性,2例提示病态造血;2例无提示。48例NHL患者中,发现病态造血28例。结论电子显微镜观察骨髓有核细胞对NHL、尤其是原发部位不明的NHL具有重要诊断价值。其次,电镜能够评价NHL诱导的骨髓病理反应。

中医药防治肺间质纤维化的实验研究进展

肺纤维化(Phlmonary Fibrosis,PF)发病率近年显著上升,尤其是2003年亚洲大面积爆发严重急性肺损伤综合征(SARS)后,人们对肺间质炎症所致的PF更加重视.现代医学证明各种引起肺部炎性损伤的因素(包括肺泡炎和肺间质炎)都可以导致PF,其病理机制包括血管内皮和肺上皮细胞损伤,氧自由基释放,凝血系统激活,免疫反应,微循环障碍等[1].

肺纤维化形成的病理机制

肺纤维化形成的病理机制茹永新１张华梅２综述刘杰文审校天津中国协和医科大学中国医学科学院血研所１（３０００２０）包头包钢职工医院２根据肺纤维化（ＰＦ）的病因和病理特点，其病理过程大致分为三个阶段，首先是致病因子对血管内皮细胞和肺泡上皮细胞的弥漫性损害，...

复方虎桃合剂对大鼠肺纤维化形成影响的研究

目的:研究大鼠肺纤维化(PF)的病理过程及复方虎桃合剂(HT)对其治疗作用。方法:应用电子显微镜,网状纤维染色和 ELISA 方法检测大鼠肺纤维化的病理过程和胶原含量的改变。结果:模型组肺泡I型上皮细胞数目减少,Ⅱ型细胞增多且处于活化状态,含有大量活性物质的板层小体被释放到肺泡腔,大部分肺泡腔和小支气管塌陷,白细胞数目增多,同时血管内皮细胞损伤收缩;Ⅰ、Ⅲ型胶原含量逐渐升高。HT治疗组上述病理变化明显轻于模型组,Ⅰ、Ⅲ型胶原含量降低。结论:HT 合剂可能通过保护血管内皮细胞和肺泡上皮细胞以及抑制胶原生物合成起到对肺纤维化的防治作用。

血液病骨髓间质超微病理——附13例病例分析

目的:研究血液病患者骨髓间质超微病理特点。方法:透射电子显微镜观察13例血液病患者骨髓活检组织。结果:所有患者髓窦、造血岛和血管关系紊乱,成纤维细胞增多;部分患者出现成纤维细胞活化和肌成纤维细胞转化,与胶原积聚和不定形细胞外基质增多相关。白血病患者骨髓同时存在白血病细胞增生和破坏;骨髓增生异常综合征粒、红细胞凋亡显著,嗜酸粒细胞增多;真性红细胞增多症骨髓晚幼红裸核增多,巨噬细胞吞噬活跃;原发性骨髓纤维化骨髓嗜酸粒细胞和巨核细胞释放大量致密颗粒。结论:血液病患者骨髓结构紊乱,成纤维细胞不同程度增生,成纤维细胞活化和肌成纤维细胞转化与细胞外基质积聚相关;纤维细胞的多克隆增生和纤维化可能继发于大量血细胞破坏和活性物质释放引起的炎性反应。

CT扫描在博莱霉素诱导的大鼠肺损伤研究中的应用

目的观察博莱霉素(BLM)诱导的大鼠肺损伤和甲基强的松龙(MPD)治疗后的双肺病理变化,研究CT扫描在大鼠肺损伤实验中的应用。方法将48只Wistar大鼠分为对照组(control)、BLM组和MPD组,control组一次性支气管内注入生理盐水02ml/100g体重;其他两组大鼠注入等容积BLM5mg/kg体重,MPD组按125mg/(kgd)MPD腹腔注射给药。三组动物分别在第3、28天取8只进行双肺CT扫描,然后做动脉血气分析,测定肺系数、肺通透指数和肺胶原含量,对肺组织进行HE染色。结果第3天BLM组肺湿重和肺系数增加,肺通透指数增高,肺组织严重水肿和充血;MPD组水肿和实变较BLM组轻;CT扫描显示BLM组大鼠肺门周围阴影密度增高,MPD组阴影的范围较小、密度减低。第28天BLM组肺组织形成肉芽肿样实变,MPD组的实变面积小于BLM组,CT扫描显示BLM组大鼠肺组织呈现致密网状/蜂窝状高密度阴影,为典型纤维化改变;MPD组的阴影密度和范围轻于BLM组。结论CT影像可以区别肺组织炎性实变和纤维化性增生,而且可以用于大鼠实验性肺损伤程度的评价。

Cariporide对肿瘤细胞增殖和血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨特异性抑制剂Cariporide通过抑制钠氢离子交换蛋白1(NHE1)功能而阻止肿瘤细胞增殖的机制。方法:应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Cariporide对细胞增殖的抑制率,共聚焦荧光显微镜测算双羧乙基碳氧荧光素四乙酰氧甲酯(BCECF-AM)的荧光强度,检验其下调细胞内pH值,ELISA试剂盒测定其对体外培养细胞表达和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,观测其对动物体内肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果:随着Cariporide的剂量增加或作用时间延长,HeLa细胞内pH值逐渐降低,肿瘤细胞表达VEGF减少。伴随着细胞内pH值降低,VEGF分泌水平逐渐下降,两者之间呈显著相关性(P<0.05)。另外,Cariporide能抑制动物体内的肿瘤增殖。结论:Cariporide能够减少肿瘤细胞表达和分泌VEGF,抑制动物体内肿瘤增殖。

抑制钠氢交换蛋白下调IL-8表达和促进p38磷酸化

我们前期的研究证明,抑制钠氢交换蛋白1(NHE1)可以减少VEGF表达从而抑制K562细胞诱导的血管生成。本研究探讨抑制NHE1后其他可能的血管生成因子变化及相关机制。用NHE1特异性抑制剂卡立泊来德10μmol/L处理K562细胞;蛋白芯片筛选NHE1抑制后血管生成因子的表达变化,实时定量PCR验证卡立泊来德处理后白介素-8(IL-8)的表达水平;构建K562稳定干扰NHE1细胞株,实时定量PCR验证干扰NHE1后IL-8的表达变化,Western blot检测卡立泊来德处理后细胞内p38磷酸化水平;p38抑制剂SB203580处理K562细胞,实时定量检测IL-8表达变化。蛋白芯片筛选结果显示,卡立泊来德处理后K562细胞中IL-8表达显著下调;实时定量结果进一步验证了这种抑制效应;卡立泊来德处理后p38磷酸化水平显著上调;卡立泊来德处理后加入SB203580抑制p38,IL-8表达可以部分恢复。结论:抑制NHE1可能通过促进p38磷酸化,下调促血管生成因子IL-8的表达。

再生障碍性贫血的骨髓和细胞病理

目的:研究再生障碍性贫血(AA)患者骨髓组织病理及有核细胞的超微结构变化。方法:光镜观察20例AA患者骨髓活检病理,透射电镜分析骨髓有核细胞超微结构。结果:光镜下所有患者骨髓脂肪组织增多,造血面积减小,大部分存在血浆渗出、出血和纤维细胞局灶性增生,血窦血管结构紊乱。电镜观察显示原始和早幼红细胞代偿性不典型增生,中晚幼红细胞核损伤。粒细胞呈活化和损伤状态;巨核细胞显著减少,胞浆灶性坏死;单核细胞异常增生、活化、吞噬和坏死。淋巴细胞大部分结构正常。结论:AA患者骨髓造血细胞减少和炎症反应同时存在,单核巨噬细胞活化和吞噬反应与造血细胞损伤相关。

212例血液病贫血患者红细胞参数特点和相关性分析

目的研究血液病性贫血患者红细胞参数的分布规律和相互关系。方法用Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪测定212例不同血液病导致的贫血患者静脉血,分析红细胞平均体积、红细胞体积分布宽度,网织红细胞和有核红细胞比例在不同类型疾病中的分布特点和相互关系。结果不同血液病中,IMF、MM、NHL、PKD患者MCV平均值在正常范围,HS、MA、EVENSI、TP、HA、PNH、AA、CML、MDS、AL患者MCV平均值大于正常,并与RDW和RET同步增高,IDA减小。各种血液病外周有核红细胞平均值增高,增高程度和MCV、RDW和RET相关。结论血液病性贫血患者红细胞参数、有核红及网织红比例变化的同步性强;外周有核红细胞比例增高与疾病和贫血的严重程度有关。

红景天对博莱霉素致大鼠肺损伤治疗作用的研究

目的:通过对博莱霉素诱导的大鼠模型高分辨率CT图像和病理结果的对照分析,研究中药红景天对肺损伤不同时期炎症和纤维化过程的干预作用。方法:实验用大鼠分为四组即正常对照组、博莱霉素组、博莱霉素+红景天组、博莱霉素+激素组,实验组用博莱霉素(5mg/kg)经支气管灌注诱导形成大鼠肺损伤模型,在预设的时间点取一组大鼠进行HRCT扫描、肺Heitzman法固定及HE染色和胶原纤维VanGieson染色。结果:对处理组大鼠的HRCT连续观察发现博莱霉素组肺内病变呈明显的进行性发展,与病理切片的表现相一致;而博莱霉素+红景天组第3、7天影像改变轻于模型组,而第28天与模型组区别不大,病理显示第3天的病理改变明显轻于模型组,其他时间点红景天组病理改变与模型组接近。结论:红景天对博莱霉素致肺损伤早期急性炎症反应引起的急性肺水肿和出血有一定的抑制作用。

酶联免疫斑点技术在肿瘤研究中的应用

酶联免疫斑点技术(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)广泛应用在肿瘤疫苗开发、疗效评价和肿瘤病因研究方面,本文就ELISPOT技术的历史、原理、一般步骤、在肿瘤研究中的应用及优缺点做一综述。

红细胞生成素诱导小鼠骨髓纤维化模型的实验研究

本研究旨在利用大剂量人重组红细胞生长素(rhEPO)诱导骨髓纤维化(M F)小鼠模型。60只昆明小鼠分为正常对照和EPO诱导组,分别用生理盐水和rhEPO进行腹腔注射,在实验第6、30、60、90、120和150天每组分别处死5只鼠。用细胞分析仪测定外周血白细胞数、血红蛋白(Hb)水平、红细胞平均体积(MCV)、红细胞分布宽度(RDW)和血小板量;用流式细胞术检测骨髓CD34阳性细胞率,称重肝、脾,计算肝、脾系数,利用HE和网状纤维染色分析肝、脾、股骨病理变化;应用高清CT测定股骨皮质厚度、髓腔直径和腰椎密度。结果表明,与正常对照组相比,EPO组各阶段白细胞轻度增高,但无统计学差异(p>0.05);Hb和RDW在第6和30天增高显著(p<0.05);MCV在第6天增高显著(p<0.05);各阶段血小板数降低,在第120和150天差异显著(p<0.05)。EPO组第60天肝肿大明显,肝系数差异显著(p<0.05);各阶段脾肿大,脾系数差异显著(p<0.05)。EPO组各阶段骨髓CD43阳性细胞率显著增高(p<0.05),第150天CT显示股骨皮质增厚,髓腔变窄,密度不均,腰椎密度增高。病理检查显示,EPO组小鼠肝脂肪化和空泡化,脾脏巨核细胞增多,股骨硬化和骨髓纤维组织增多。结论:大剂量rhEPO可诱导小鼠出现M F特有临床和病理特点。本研究对建立新的M F模型和病理研究有重要意义。

再生障碍性贫血的幼红细胞超微病理

目的:研究再生障碍性贫血患者(AA)幼红细胞病理特点。方法:透射电子显微镜观察和分析16例AA患者骨髓有核红细胞。结果:16例AA患者中,6例为急性再生障碍性贫血(SAA),10例为慢性再生障碍性贫血(CAA)。2例SAA和9例CAA幼红细胞形状不规则,见指状突起和切迹,部分细胞的细胞质空泡化。3例SAA和6例CAA的幼红细胞巨幼样改变明显,细胞核不规则。3例SAA和6例CAA幼红细胞核损伤显著,其中各2例有奶酪样核幼红细胞,共3例幼红细胞出现凋亡。3例CAA患者双核幼红细胞多见。5例SAA和5例CAA患者骨髓含大量单核/巨噬细胞激活和噬血细胞。结论:AA骨髓幼红细胞核与细胞质存在不同形式损伤,单核/巨噬细胞激活和吞噬活跃;红细胞自身发育障碍和单核吞噬激活损伤共同参与了AA病理过程。

5'-核苷酸酶在白血病中的分布特点

目的:研究5'-核苷酸酶(5'-NT)在不同类型白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)、非白血病患者和正常人中的分布特点。方法:分离100例不同白血病、3例MDS患者、9例非白血病患者和6例正常人骨髓有核细胞,以5'-单磷酸胞嘧啶核苷(5'-CMP)为底物进行细胞组织化学反应,电镜半定量分析5'-NT阳性细胞率和阳性指数。结果:5'-NT阳性反应产物主要位于有核细胞胞膜。急性髓系白血病(AML)M1、M2a、t(8;21)、t(15;17)各组细胞阳性率和阳性指数依次降低,阳性率组间差异有统计学意义(P<0.01),阳性指数差异无统计学意义;M1、M2a、t(8;21)、t(15;17)和M5患者5'-NT阳性细胞率和阳性指数均显著高于MDS、非白血病患者和正常人,差异有统计学意义(P<0.01);急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者5'-NT阳性细胞率和阳性指数高于慢性淋巴细胞白血病(CLL),差异有统计学意义(P<0.05);CLL、MDS、非白血病患者和正常人的5'-NT阳性细胞率和阳性指数低,组间及两两比较差异无统计学意义。结论:不同白血病患者胞膜5'-NT表达与白血病细胞分化程度负相关。