他克莫司联合激素在重症肌无力患者中的效果及对IFN-γIL-4和TGF-β的影响

目的探讨他克莫司联合激素在重症肌无力(MG)患者中的治疗效果及对干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)及转化生长因子-β(TGF-β)的影响。方法选取2022-05—2023-09郑州大学第一附属医院的MG患者96例为对象,信封法分为2组各48例。对照组采用激素治疗,观察组采用他克莫司联合激素治疗,2组患者均完成4周治疗,比较2组重症肌无力日常生活量表(MG-ADL)、重症肌无力定量评分体系(QMGS评分)、生化指标水平及安全性。结果干预后MG-ADL评分观察组(2.95±0.79)低于对照组(4.59±1.12,P<0.05),QMGS评分观察组(8.51±1.69)低于对照组(12.69±2.24,P<0.05),2组干预后日常生活及肌力均得到提高,疲劳耐受性增强,观察组较对照组改善更明显。2组干预后生化指标得到改善,干预后观察组IFN-γ水平(43.96±3.18)低于对照组(52.58±3.63,P<0.05),观察组IL-4水平(36.89±6.39)高于对照组(31.11±6.42,P<0.05),观察组TGF-β水平高于对照组(41.43±3.91,P<0.05)。不良反应发生率观察组(10.42%)较对照组(6.25%)无统计学差异(P>0.05)。结论他克莫司联合激素治疗MG患者效果显著,能提高日常生活质量,降低MG-ADL及QMGS评分,改善生化指标水平,且治疗安全性较高。

脑脊液细胞因子在中枢神经系统感染诊断中的价值

目的探讨脑脊液细胞因子在中枢神经系统感染患者诊断中的价值。方法收集郑州大学第一附属医院2023-01—2024-04中枢神经系统感染的患者55例为感染组,非中枢神经系统感染者56例为非感染组,比较2组临床资料,脑脊液细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A、IL-22、TNF-α、IFN-γ水平的差异。结果患者高龄,脑脊液细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A、IL-22、TNF-α、IFN-γ水平增高,均与发生中枢神经系统感染有相关性,P<0.05;Logistic回归分析提示脑脊液IL-6(OR=1.003,95%CI 1.001~1.005)是中枢神经系统感染的独立危险因素;ROC曲线分析显示脑脊液IL-6的AUC=0.912(95%CI:0.859~0.965,P<0.001),敏感度为96.4%。结论脑脊液细胞因子IL-6是中枢神经系统感染的独立危险因素,可作为中枢神经系统感染诊断的参考指标。

根皮素对神经酰胺诱导小鼠神经元parthanatos的影响

目的:探讨根皮素对神经酰胺诱导小鼠神经元parthanatos的影响。方法:分离培养C57BL/6J胎鼠原代皮层神经元,分为对照组、神经酰胺组、根皮素组和根皮素+神经酰胺组。神经酰胺组和根皮素组分别用终浓度为20μmol/L的神经酰胺和根皮素处理24 h;根皮素+神经酰胺组先用终浓度为20μmol/L的根皮素处理24 h后,再用终浓度为20μmol/L的神经酰胺处理24 h;对照组用等体积的DMSO处理。采用CCK-8检测神经元活力,Hoechst33342/PI双染检测神经元的死亡,DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot检测多腺苷二磷酸核糖(PAR)聚合物和DNA损伤标志物γH2AX表达水平,彗星实验检测DNA损伤,细胞免疫荧光法检测细胞凋亡诱导因子(AIF)核转位。结果:神经酰胺处理后,神经元活力降低,神经元死亡率和ROS水平升高;根皮素+神经酰胺处理后,神经元活力升高,神经元死亡率和ROS水平降低(P<0.05);神经酰胺处理后,γH2AX蛋白表达水平升高,神经元拖尾长度和拖尾中的DNA百分比升高;根皮素+神经酰胺处理后,γH2AX蛋白表达水平降低,神经元拖尾长度和拖尾中的DNA百分比降低(P<0.05)。神经酰胺处理后,PAR蛋白表达水平升高,AIF发生核转位;根皮素+神经酰胺处理后,PAR蛋白表达水平降低,AIF核转位受到抑制(P<0.05)。结论:根皮素可能通过抑制氧化应激,进而抑制神经酰胺诱导的神经元发生parthanatos。

NLRP3、IL-1β与视神经脊髓炎谱系障碍严重程度的相关性

目的 通过检测视神经脊髓炎谱系障碍(NMOSD)患者及非炎症性神经系统疾病(NND)患者脑脊液中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、白介素1β(IL-1β)水平,探索NMOSD组患者脑脊液中NLRP3、IL-1β水平与疾病严重程度的相关性。方法 收集2021年10月至2022年10月于郑州大学第一附属医院神经内科住院或课题生物样本库的35例NMOSD首发患者和20例NND患者,将其分为NMOSD组和对照组。分析两组患者临床资料,包括年龄、性别、临床症状、影像学资料和脑脊液检测指标等。并采用扩展残疾状态量表(EDSS)评分对NMOSD组患者入院时疾病严重程度进行评估。采取酶联免疫吸附试验检测脑脊液中NLRP3、IL-1β水平,并分析其水平与EDSS评分之间的相关性。结果 与对照组相比,NMOSD患者脑脊液NLRP3、IL-1β水平显著升高。此外,脑脊液中NLRP3、IL-1β水平与EDSS得分呈正相关。结论 NLRP3、IL-1β可作为NMOSD患者严重程度的生物标志物和治疗NMOSD的潜在靶点。

α-synuclein(A53T)蛋白调控自噬诱导神经元凋亡

目的探讨α-synuclein(A53T)突变蛋白诱导神经元凋亡的具体机制。方法将EGFP-N1、EGFP-α-synuclein(WT)及EGFP-α-synuclein(A53T)质粒转染SH-SY5Y细胞,Western blot检测Beclin 1及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平;MDC染色检测细胞自噬空泡的变化;PI/Annexin-V-FITC检测细胞凋亡率;MTT法测定细胞相对活力。结果过表达EGFP-α-synuclein(A53T)上调细胞内源性Beclin 1蛋白的水平,差异具有统计学意义(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。过表达EGFP-α-synuclein(A53T)诱导SH-SY5Y细胞自噬空泡聚集增加,免疫荧光检测示LC3呈现胞浆聚集。过表达EGFP-α-synucle-in(A53T)上调SH-SY5Y细胞凋亡率,差异具有统计学意义(P<0.01);抑制了细胞相对活力,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 EGFP-α-synuclein(A53T)突变蛋白上调巨自噬水平,诱导神经元凋亡。

黄连解毒汤和不同组方部位群的指纹图谱研究

目的：建立黄连解毒汤及各拆方部位群有效成分的高效液相色谱指纹图谱研究方法。方法：制备黄连解毒汤全方、各拆方部位群及单味药的供试品溶液;采用Agilent TC-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱;乙腈（A）-0.2%磷酸水（B）为流动相;线性梯度洗脱程序：0~20 min,2%~22%A;20~80 min,22%~24%A;检测波长为260 nm;流速为1.0 m L/min;进样量为10μL;柱温为40℃。结果：建立了含有27个色谱峰的高效液相色谱图,并对特征峰进行了归属。结论：全方中并未产生明显的新特征峰,基本为各单味药的特征峰加和;各拆方与全方比较,差别较大。

应用生物传感器筛选黄连解毒汤抗内毒素的有效组分

目的:筛选黄连解毒汤抗内毒素的有效组分群。方法:以Lipid A为靶点,采用生物传感器技术,测定黄连解毒汤各组分群与Lipid A的亲和力。结果:黄连解毒汤各组分群与Lipid A亲和力从高到低依次为沉淀水洗、上清液醇洗、沉淀醇洗、全方固体、上清、沉淀、上清液水洗。结论:应用生物传感器技术可以快速、方便、准确地筛选黄连解毒汤抗内毒素的有效组分群,为中药拮抗内毒素活性成分的筛选提供可行的方法。

rhG-CSF对大鼠缺血缺氧神经元巨自噬水平的影响

目的:探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对缺血缺氧神经元巨自噬水平的影响及意义。方法:采取氧糖剥夺法制作细胞缺氧模型,Western blot法检测0、100、200μg/L rhG-CSF干预下细胞巨自噬标志微管相关蛋白轻链3膜型和胞质型比值(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)的变化,单丹磺酰戊二胺(MDC)法荧光观察巨自噬空泡变化,MTT法检测细胞活力。应用改良线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型,rhG-CSF干预前及干预7 d后进行改良的神经功能缺损评分评定,Western blot法检测干预7 d后大鼠皮层神经元LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,免疫组化法检测LC3蛋白的表达。结果:随着rhG-CSF给药剂量的增加,细胞缺氧模型LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和巨自噬空泡数量逐渐增加(F=288.686,154.698,P<0.001),细胞活力也相应增强(F=74.456 P<0.001)。动物实验中,干预7 d后,rhG-CSF组大鼠缺血神经元LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(F=573.085,P<0.001)及LC3阳性细胞数(F=88.945,P<0.001)分别较假手术组及模型组上调,大鼠的神经功能缺损评分较干预前明显降低(F组间=20.403,F时间=19.193,F交互=33.415,P<0.001)。结论:局灶性脑缺血后rhG-CSF可能通过上调巨自噬水平参与神经元的保护。

rhG-CSF对缺氧SH-SY5Y细胞及大鼠缺血脑组织中LAMP-2a和HSC-70蛋白表达的影响

目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对缺氧人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞及大鼠缺血脑组织中分子伴侣介导自噬(CMA)的标志性蛋白LAMP-2a及HSC-70表达的影响,探讨rhG-CSF抑制缺血缺氧后神经元损伤的机制。方法:制备SH-SY5Y细胞缺氧模型,分别给予0、100、200μg/L的rhG-CSF孵育48h,Westernblot检测各组细胞LAMP-2a及HSC-70的表达。将54只SD大鼠随机分为3组,每组18只;假手术组仅行颈部手术不栓塞大脑中动脉,模型组及实验组制备大脑中动脉栓塞模型,实验组给予rhG-CSF(50μg·kg-1·d-1)注射5d,假手术组及模型组给予等量生理盐水。Westernblot检测脑缺血周边区组织LAMP-2a及HSC-70的表达。参照改良神经功能缺损评分对3组大鼠进行神经功能评价。结果:随rhG-CSF浓度的增加,缺氧SH-SY5Y细胞HSC-70及LAMP-2a的表达逐渐升高(F=31.574、3.943,P<0.001)。3组大鼠HSC-70及LAMP-2a的表达水平差异有统计学意义(F=503.658、859.985,P<0.001),且实验组及模型组大鼠HSC-70、LAMP-2a的表达水平高于假手术组,实验组高于模型组(P<0.05)。实验组大鼠神经功能改善程度优于模型组(t=6.322,P<0.001)。结论:脑缺血中rhG-CSF可能通过上调CMA发挥神经元保护作用。

动脉瘤性蛛网膜下腔出血首日凝血功能研究

目的动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aneurysmal subarachnoid hemorrhage,aSAH)后凝血功能异常影响患者预后。探讨aSAH首日患者凝血功能变化,并分析其与反映意识障碍程度的相关性。为重症aSAH患者首日精细化管理提供参考。方法40例发病24 h内入住神经重症监护室的aSAH患者,与20例年龄、性别相匹配的健康对照组进行比较。对血栓弹力图(thrombelastography,TEG)结果、GCS评分进行分析;根据入院时GCS评分进行亚组分析,比较GCS≤7和GCS>7亚组TEG各项结果;并分析其与GCS的相关性。结果与对照组比较,aSAH患者首日反应凝血因子功能的TEG-R值明显降低(4.18±1.54 vs 6.61±0.95,P=0.001);纤溶系统(LY30、EPL)和其他指标(MA、K、Angel)、常规凝血功能差异无统计学意义(P>0.05)。GCS≤7亚组较GCS>7亚组TEG-R值也明显降低(3.32±1.04 vs 5.24±1.41,P<0.001),且TEG-R与GCS评分具有相关性(r=0.551,P<0.001)。结论aSAH首日患者凝血因子功能增强的高凝状态,尤其是GCS≤7的患者,且与GCS高度相关;但纤溶系统无明显变化。

脑死亡判定精细化质控管理规范(2022版)

基于《全球脑死亡建议案:脑死亡/神经病学标准死亡的判定(2020年)》,国家卫生健康委员会脑损伤质控评价中心将质控重心转向脑死亡判定精细化管理。《脑死亡判定精细化质控管理规范(2022年)》包括质控体系、质控任务、质控流程、质控指标、质控技术、质控意见反馈、质控保密原则、病历记录规范、表单和报告单填写规范、质控管理指导共10个部分,使质控工作更加精准、严谨、系统和有序,确保脑死亡判定更加安全、可靠。

1-甲基-4-苯基吡啶离子调控线粒体自噬对线粒体氧化应激损伤的影响

目的探讨1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导线粒体自噬在帕金森病(PD)发病机制中的作用。方法将细胞分为MPP+(0 mmol/L)对照组、MPP+(1 mmol/L)处理组和MPP+(2 mmol/L)处理组,共同转染EGFP-LC3和RFP-MI-TO后加入MPP+处理48 h。Western blot检测细胞自噬水平的变化,甲丹磺酸尸胺(MDC)检测自噬空泡聚集,免疫荧光法检测EGFP-LC3和RFP-MITO亚细胞共定位,流式技术检测线粒体膜电位及活性氧。结果 MPP+1 mmol/L及MPP+2 mmol/L组LAMP2 A、Beclin1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的灰度值与对照组相比均上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,MPP+处理组自噬水平增加,自噬空泡增加,外源性LC3表达上调,EGFP-LC3和RFP-MITO存在亚细胞共定位。MPP+1 mmol/L及MPP+2 mmol/L组线粒体膜电位较对照组降低;MPP+1 mmol/L及MPP+2 mmol/L组线粒体活性氧较对照组增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MPP+通过调控线粒体自噬水平致线粒体氧化应激损伤。

HPLC法测定黄连解毒汤及其有效组分群中5种化学成分含量

目的:建立测定黄连解毒汤及其有效组分群中栀子苷、药根碱、黄芩苷、巴马汀和小檗碱含量的高效液相色谱方法。方法:采用Agilent TC-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水(B);线性梯度洗脱程序:0~10min,10%~22%A;10~40min,22%~23%A;40~45min,23%~24%A;45~60min,24%A;检测波长:260nm;体积流量:1.0mL·min^(-1);进样量:10μL;柱温:25℃。结果及结论:该方法简单、可靠,其精密度、准确度、线性均符合要求,可用于黄连解毒汤及其有效组分群中有效成分的含量测定。

Numb蛋白对α-synuclein蛋白寡泛素化水平的调控

目的探索Numb蛋白对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)寡泛素化水平的调控。方法分别将EGFP-N1或EGFP-Numb与HA-α-syn共同转染SH-SY5Y细胞;采用细胞免疫荧光法检测α-syn蛋白和Numb蛋白的亚细胞共定位;使用免疫共沉淀的方法检测Numb蛋白与α-syn蛋白的相互结合;利用Western blot检测Numb蛋白对α-syn蛋白寡泛素水平的调控;在MPP+细胞模型中利用细胞免疫荧光检测Numb对α-syn包涵体形成的影响。结果 Numb与α-syn在细胞质中存在亚细胞共定位;Numb蛋白上调α-syn寡泛素化水平;Numb蛋白通过上调α-syn寡泛素水平促进MPP+诱导α-syn阳性包涵体形成。结论 Numb蛋白上调α-syn蛋白寡泛素水平并促进α-syn包涵体形成。

从《赵氏孤儿》看中国式思维

《赵氏孤儿》使用了众多的画面来阐述报仇的前因和后果,并表现出不同人物的内心世界,一个情节并不复杂的故事铺展于历史的长河中如此之久,能够与各个时代的人产生精神共鸣而不衰竭,它便不再是一个简单的故事,而是一种让观众值得思考的中国文化。

The Tragic Effects of “Blood” in Macbeth

As one of the four great tragedies of Shakespeare, Macbeth is known for its complexity, not in plot, but in the reversals of the characters'fortune and mentality. This paper analyses how the blood signs, especially"bloody hands", signify the reversal of the character of Macbeth and Lady Macbeth as well as appealing the readers'emotion of fear and pity, thus enhancing the tragic effects of the play.

蛛网膜下腔出血合并低T3综合征与GOS的关系

目的探讨蛛网膜下腔出血合并低T3综合征与患者格拉斯哥结局评分(GOS)之间的关系。方法选取郑州大学第一附属医院2017-05-2018-05收治的97例蛛网膜下腔出血合并低T3综合征患者,依据GOS分为预后良好组59例,预后较差组38例。随访记录患者的一般资料,分析影响蛛网膜下腔出血合并低T3综合征患者预后的主要因素。结果 (1)2组年龄、性别比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)2组烟酒史、糖尿病史、高血压史、情绪控制、意识水平、就诊时间、血压控制、大便平均时间间隔等因素比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)2组再出血、脑积水、局灶体征、脑膜刺激征、癫痫样发作、脑血管痉挛、颅内动脉瘤、CT-Fisher分级、Hunt-Hess分级等因素比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)情绪控制、意识水平、血压控制、再出血、Hunt-Hess分级是影响蛛网膜下腔出血合并低T3综合征患者预后主要因素。结论控制情绪的稳定、维持正常的血压水平等,一定程度上可改善蛛网膜下腔出血合并低T3综合征患者的预后,可采取早期相关措施进行干预,降低不良预后事件的发生率。

过表达GBA诱导SH-SY5Y细胞自噬和降低α-synuclein的表达

目的探讨葡萄糖脑苷脂酶(GBA)对SH-SY5Y细胞自噬及α-突触核蛋白(α-synuclein)表达水平的影响。方法将EGFP-N1、EGFP-GBA质粒转染SH-SY5Y细胞,Western blot检测Beclin 1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及α-synuclein蛋白的表达,荧光显微镜观察自噬泡的形成及LC3与GBA在细胞内的共定位。结果与转染EGFP-N1组相比,转染EGFP-GBA组上调Beclin 1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达水平(P<0.05),而α-synuclein表达水平则下降(P<0.05);与转染EGFP-N1组相比,转染EGFP-GBA组自噬空泡数目明显增加,外源性LC3免疫荧光表达明显增强,且GBA与LC3存在共定位。结论GBA上调自噬水平,降低α-synuclein蛋白的表达。

黄连解毒汤抗内毒素血症的体内活性研究

目的对黄连解毒汤(HJT)及其活性成分进行体内活性研究,探究HJT抗内毒素血症的药效物质。方法 BALB/c小鼠尾静脉注射LPS建立内毒素血症模型,并用HJT及其活性成分进行干预,观察小鼠死亡率,分别采用显色基质鲎试剂法和ELISA法测定体内LPS、TNF-α和IL-6水平,并对小鼠各脏器组织进行病理研究。结果 HJT全方及其活性成分黄芩苷、小檗碱、巴马汀、栀子苷对ETM模型小鼠的死亡率、体内细胞因子水平及各脏器损伤内具有较好的改善作用。结论 HJT中黄酮类成分、生物碱类成分、环烯醚萜类成分是其抗内毒素的物质基础,为抗内毒素血症的研究奠定基础及提供技术支持。

烛毒素A抗脓毒症潜在靶点的筛选与鉴定

目的研究烛毒素A的分子特性,筛选并鉴定烛毒素A抗脓毒症的潜在靶点。方法通过TCMSP数据库分析烛毒素A的药理参数和分子特性;通过Swiss Targetprediction和DRAR-CPI软件筛选烛毒素A抗脓毒症的潜在靶点;通过OMIM、CTD和TTD数据库中已报道的与抗脓毒症相关疾病靶标进行筛选烛毒素A抗脓毒症的靶点,进一步通过分子对接软件鉴定烛毒素A抗脓毒症的潜在靶点。结果烛毒素A口服生物利用度(OB)为31.81%,药物相似度(DL)为0.69,具有很好的成药性;通过Swiss Targetprediction和DRAR-CPI软件共筛选到96个潜在靶点,其中与脓毒症直接相关的靶点有4个,经分子对接软件鉴定S100A9和MAPK1为烛毒素A抗脓毒症的潜在靶点。结论烛毒素A可通过与筛选的靶标结合,调控MAPK1减少炎症反应;调节S100A9抑制TNF-α等促炎因子的释放,减少脓毒症的炎症反应。