呋喃丹降解菌的研究进展

呋喃丹是一种高残留、高毒性、难降解的有机杀虫剂,目前在我国的广泛使用,常造成环境污染和人畜中毒。近几十年来,国内外在呋喃丹的毒性危害和降解方面,尤其是细菌降解方面做了大量的研究工作,本文对呋喃丹的毒害、降解菌的筛选、降解机理、降解酶、构建基因工程菌等方面进行了综述。

呋喃丹降解菌CF-14的筛选及降解条件研究

呋喃丹是一种高残留、高毒性、难降解的有机杀虫剂,目前在我国的广泛使用,常造成人畜中毒和环境污染。采用富集分离的方法从常年使用呋喃丹的土壤中分离得到一株呋喃丹降解菌CF-14,根据其生理生化特征及16 S rDNA分子生物学鉴定,该菌属于无色杆菌属。CF-14降解呋喃丹的初选培养条件为温度30℃,pH 7.0,接种量为10%,转速达到200 r/min时,3 d对浓度为100 mg/L的呋喃丹降解率为95%。

变异黄芪内生真菌FEL1A菌株固体培养条件优化

对变异黄芪中分离得到的内生真菌FEL1A菌株进行了固体优化培养条件的探索,在不同温度、碳源、氮源,初始pH条件下,检测FEL1A的生长情况。结果表明,FEL1A生长的最适温度为20℃,初始pH为7.0;以燕麦片作为碳源时FEL1A生长最快,培养20 d后菌落大小为13.32 mm±0.77 mm;蛋白胨作为氮源时FEL1A生长最快,培养20 d后菌落增至18.14 mm±0.64 mm。

苦马豆素抑制α-甘露糖苷酶的剂量效应关系

根据苦马豆素(Sw)抑制α-甘露糖苷酶(AMA)的特点,建立了SW抑制AMA的剂量效应关系曲线和酶法测定SW溶液浓度的方法。SW溶液浓度范围在5×10-8mol/L^5×10-6mol/L时,SW溶液浓度的负对数与其抑制AMA活性百分比呈线性关系,线性方程Y=0.026X+5.167 4,R2=0.994 7。建立了酶法测定SW溶液浓度的方法,为疯草的进一步研究提供技术支持。

埃里格孢菌FEL3产SW发酵培养条件的优化

【目的】对埃里格孢菌（Undifilim oxytropis）FEL3产苦马豆素（SW）的发酵条件进行优化。【方法】在不同碳源（葡萄糖、蔗糖、乳糖、燕麦片、可溶性淀粉）、氮源（豆粉、酵母膏、牛肉膏、蛋白胨、硝酸钠、氯化铵、硫酸铵）、无机盐（MgSO4.7H2O,FeSO4.H2O,ZnSO4.H2O,CaCl2.2H2O,CuSO4.5H2O,KH2PO4）、初始pH（4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5）和接种量（体积分数2%,4%,6%,8%,10%）培养条件下,将埃里格孢菌FEL3接种到液体培养基中,培养15 d后,测定菌丝湿、干质量浓度和菌液中SW浓度,选择最佳培养条件。【结果】当碳源为燕麦片、氮源为豆粉、无机盐为CuSO4.5H2O、培养基初始pH为6.57.0、接种量为体积分数8%时,埃里格孢菌FEL3菌丝湿、干质量浓度和菌液中SW浓度均较高。【结论】得到了埃里格孢菌FEL3产SW的最佳培养条件,为用埃里格孢菌FEL3大量生产SW奠定了基础。

疯草内生真菌FEL3生产SW培养基的最佳碳氮比优化

为探讨碳氮比对甘肃棘豆(Oxytropis kansuensis)内生真菌FEL3产苦马豆素(Swainsonine,SW)的影响,利用单因素试验对最佳碳源和氮源进行了筛选。结果表明:蔗糖和蛋白胨分别是理想的碳源和氮源;采用中心组合设计(Central Composite Design,CCD)考察液体培养基中蔗糖和蛋白胨的比率对内生真菌FEL3产SW的影响,并利用Design-Expert 7.1.6软件模拟得到二次多项式回归方程的预测模型;当蔗糖为1.47 g.L-1,蛋白胨为0.29 g.L-1时,SW浓度达到最大值6.71×10-4mol.L-1。试验结果将为利用疯草内生真菌FEL3批量生产SW提供技术支持。

山羊溶酶体α-AMA基因的克隆、生物信息学及组织表达谱分析

本研究旨在对山羊溶酶体α-甘露糖苷酶(α-AMA)基因进行组织表达谱和生物信息学分析。参考牛α-AMA基因序列设计引物,采用PCR技术克隆山羊α-AMA基因序列,并利用荧光定量RT-PCR进行组织表达谱分析以及进行生物信息学预测。首次获得了山羊α-AMA基因,含有完整CDS编码区3 000bp,编码999个氨基酸,其中前50个氨基酸为信号肽序列。其编码区的核苷酸序列和预测氨基酸序列与牛的α-AMA相似性最高,分别为95.93%和94.79%。组织表达谱分析表明α-AMA在山羊各组织均不同程度的表达,其中在肺脏、肝脏、小脑表达量较高。生物信息学预测发现,α-AMA蛋白属于糖苷水解酶38家族成员,有2个保守的结构域,存在9个N-糖基化位点。SWISS-MODEL同源建模山羊α-AMA具有良好的可信度。本研究为探讨酶的作用机理及疯草解毒剂的研制提供了理论依据。

饮水中添加葡萄糖氧化酶对肉鸡生长性能的影响

【目的】探讨饮水中添加葡萄糖氧化酶对肉鸡生长性能的影响。【方法】试验选取1日龄健康ROSS-308肉鸡7.6万羽,随机分成2个组,每个组2个重复,每个重复1.9万只。其中,对照组饮水中不加葡萄糖氧化酶,试验组在鸡只1～21日龄时饮水中加100 U/L葡萄糖氧化酶,在22～42日龄时饮水中加150 U/L的葡萄糖氧化酶,试验全期共42d。【结果】在1～21日龄,试验组比对照组平均日增重提高2.8 g,提高了6.9%;在22-42日龄,试验组比对照组平均日增重降低2.6 g,降低了3.2%;整个试验期42d,试验组比对照组料肉比降低0.08,降低了5.3%;试验组成活率比对照组提高了0.7%;经济效益分析,试验组比对照组多盈利0.6元/只。【结论】推荐肉鸡饮水中全程按100 U/L添加葡萄糖氧化酶,可提高肉鸡的生长性能,增加养殖经济效益。

GOX与抗生素对不同来源大肠杆菌的抑制效果研究

【目的】试验探索葡萄糖氧化酶(GOX)与抗生素对不同来源大肠杆菌的抑制效果。【方法】试验1:将不同来源的大肠杆菌,在含有抗生素和GOX的LB液体培养基中培养24 h,观察大肠杆菌的生长情况;试验2:将不同来源的大肠杆菌,分别加入到含有抗生素、GOX、抗生素和GOX三种成分的LB液体培养基中,培养24h,观察大肠杆菌的生长情况;【结果】试验1:养殖现场来源的大肠杆菌对抗生素表现出非常强的耐药性,对GOX不表现耐药性;试验2:在抗生素中添加GOX之后,养殖现场来源的大肠杆菌耐药性消除。【结论】GOX能够解除致病菌的耐药性,提高抗生素对大肠杆菌的抑制效果。

葡萄糖氧化酶协同抗生素抑菌效果的研究

试验探索葡萄糖氧化酶(GOX)在提高抗生素抑制致病菌生长方面的作用效果。试验一,在LB琼脂平板中涂布不同浓度的GOX,培养24 h,观察致病菌生长情况;试验二,在含有抗生素的LB琼脂平板中,分别添加和不添加GOX,培养24 h,观察致病菌的生长情况;试验三,在含有抗生素的LB液体培养基中,分别添加和不添加GOX,培养24 h,观察致病菌的生长情况;试验四,在含有抗生素的LB液体培养基中,同时添加不同浓度的GOX和葡萄糖,培养24 h,观察致病菌的生长情况。试验一,GOX对致病菌的生长有抑制作用:添加量越高,抑菌圈越大;试验二,与对照组相比,添加有GOX的试验组,抑菌圈更大;试验三,与对照组相比,添加有GOX的试验组,抑菌率更高;试验四,不同浓度的GOX和葡萄糖均可以影响抗生素的抑菌效果。当GOX最小浓度为50 ppm,葡萄糖最小浓度为0.1%时,GOX提高抗生素抑菌效果明显。在有葡萄糖存在的情况下,GOX能够提高抗生素对致病菌的抑制作用。

不同复合酶在山东817肉鸡养殖中的应用效果研究

为探究在玉米-杂粕日粮中添加不同来源的肉鸡复合酶对817肉鸡生产性能和经济效益的影响,在每个处理添加不同来源和剂量的复合酶,测定试验组与对照组肉鸡日增重、成活率、料肉比等指标,并评估经济效益。结果表明,试验全期内,与对照组相比,试验1组和试验2组的鸡只日采食量提高3.45%和1.60%;日增重提高3.62%和3.15%;出栏重提高3.53%和3.06%;成活率提高3.4%和2.6%;料肉比降低0.002和0.024;效益方面,试验1组和试验2组鸡利润增加0.1元/只和0.3元/只。复合酶Ⅱ的使用效果优于复合酶I;其中复合酶Ⅱ的添加量为600 g/t时,所产生的经济效益最高。