抗生素在急性胰腺炎的应用(文献综述)

在急性胰腺炎治疗中,全身和局部的抗感染具有重要地位.抗生素透入胰液受到多种因素的影响,而血-胰液屏障是最重要的影响因素.根据抗生素透过血-胰液屏障的浓度梯次,本文推荐在急性胰腺炎中依次选用下列抗生素:氟嗪酸、氯霉素、甲硝唑、氯林可霉素、TMP-SMZ、乙基西梭霉素、丙氟哌酸、头孢氨噻肟.

内皮素及其受体与动脉粥样硬化

近来的研究表明，内皮素及其受体在动脉粥样硬化的发生和发展中起一定的作用，冠心病临床也有迹象表明内皮素系统参与了其发病。本文对此作一综述，并探讨内皮素受体拮抗剂在冠心病治疗中具有的意义和前景。

内皮素A受体在oxLDL促血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的:研究氧化低密度脂蛋白(oxLDL)对培养血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中内皮素受体A亚型(ETRA)mRNA表达水平的影响。方法:Cu2+氧化法制备oxLDL,观察oxLDL对大鼠主动脉VSMC增殖和ETRAmRNA表达的影响。将VSMC用非肽类ETRA拮抗剂BMS-182874预处理后,加入10μg/mloxLDL温育24h。采用非核素MTS吸光度法测定细胞增殖,RNA印迹法检测ETRAmRNA水平。结果:低浓度oxLDL促进VSMC增殖,高浓度引起细胞毒作用;oxLDL升高ETRAmRNA水平;ETRA拮抗剂BMS-182874明显抑制oxLDL引起的增殖作用。结论:动脉粥样硬化形成中有ETRA参与,ETRA拮抗剂可能具有临床应用价值。

动脉粥样硬化兔主动脉内皮素A受体原位杂交研究

对动脉粥样硬化(AS)的发生机制研究是一个重要的前沿课题,尤其在内皮细胞损伤和内皮功能紊乱、脂质的异常代谢以及生长因子、细胞因子和血管活性因子的作用等方面目前又成为倍受关注的热点[1～3]。本实验通过建立兔AS模型,观察主动脉的内皮素受体A亚型(ETRA)表达改变,并初...

充血性心力衰竭患者血浆内皮素含量与升压素、心房钠尿肽无关

用放射免疫法测定８３例心脏病患者及３２例健康人的血浆内皮素（ＥＴ－１）、精氨酸升压素（ＡＶＰ和心房钠尿肽（ＡＮＰ）含量。结果显示心功能Ⅱ～Ⅳ级组血浆ＥＴ－１均明显高于正常组（Ｐ＜０．０５）。心衰组血浆ＡＶＰ和ＡＮＰ含量均明显高于正常组（Ｐ＜０．０５）。患者组ＥＴ－１含量与ＡＶＰ和ＡＮＰ含量，与有无房颤及病程长短均无明显相关。提示心衰时ＥＴ－１升高可能是独立于ＡＶＰ、ＡＮＰ之外的神经内分泌调节紊乱的重要组成部分。

心肌肌钙蛋白I基因的克隆及真核表达

目的 克隆并表达人心肌肌钙蛋白I (cTnI)cDNA ,为高效获得大量蛋白、制备抗体打下基础。方法 采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和分子生物学技术克隆人cTnI基因 ,重组构建pcDNA3 cTnI真核表达载体 ,转染人胚肾(HEK) 2 93细胞 ,并用单克隆抗体检测特异性cTnI蛋白表达。结果 克隆了cTnI的全长基因 ,构建了pcDNA3 cTnI真核表达载体并成功地在真核细胞中获得了蛋白表达。结论 所表达的蛋白证明具有正确的cTnI免疫原性 。

明胶法分离外周血单核细胞

外周血单核细胞在动脉粥样硬化(AS)形成中起着重要的作用,但人们对AS中单核细胞作用的机制仍不完全清楚,甚至有相矛盾的文献报道,这可能是由于单核细胞提纯困难的缘故。单核细胞大约占外周血单个核细胞的10%～20%[1]。以往单核细胞的提纯方法经常会造成高比例的淋巴细胞污...

成年大鼠成肌细胞的原代培养

目的 探索成年大鼠成肌细胞的原代培养方法。方法 取成年SD大鼠的胸大肌 ,利用组织块培养法培养成肌细胞。绘制生长曲线 ,并对培养细胞进行形态学研究和免疫细胞化学鉴定。结果 采用组织块培养法 ,2周后成肌细胞的密度可达 10 7/ml,免疫细胞化学分析显示 90 %以上的细胞呈骨骼肌特异的肌细胞生成素 (myogenin)抗体染色阳性。结论 利用组织块法成功培养成年大鼠原代成肌细胞 ,该方法实用性强 ,所得成肌细胞纯度高 ,为深入研究心肌梗死疤痕中成肌细胞自体移植奠定了基础。

MicroRNA与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化是心血管系统疾病中最常见的病变,也是众多心、脑血管疾病共同的病理基础,对人类健康造成严重威胁。MicroRNA(miRNA)是一类约由22个核苷酸组成内源性非编码小分子RNAs,通过抑制转录后基因表达或促进靶基因mRNA降解发挥重要的调节作用。miRNA可调节血管内皮细胞功能、调节血管平滑肌细胞的增生、迁移,通过调控靶基因表达来调节巨噬细胞等炎症细胞活动及炎症因子的分泌,从而在动脉粥样硬化的发生及发展过程中发挥重要作用。

P2Y12受体拮抗剂对裸鼠移植瘤生长的影响

目的研究P2Y12受体拮抗剂对肿瘤生长的影响。方法建立HT29结肠癌和MDA231乳腺癌两种裸鼠移植瘤模型,将其随机分为对照组、氯吡格雷组和替格瑞洛组。HT29移植瘤裸鼠对照组及氯吡格雷组各20只,替格瑞洛组19只;MDA231移植瘤裸鼠对照组、氯吡格雷组及替格瑞洛组各4只。分别使用磷酸缓冲液、氯吡格雷混悬液和替格瑞洛混悬液进行灌胃。裸鼠灌胃10 d后处死,测定肿瘤质量和体表面积,观察P2Y12受体拮抗剂对肿瘤生长的影响。结果 HT29移植瘤裸鼠中,对照组肿瘤质量(1.20±0.12)g,体表面积(233.60±20.77)mm2;氯吡格雷组肿瘤质量(0.99±0.08)g,体表面积(192.30±13.28)mm2;替格瑞洛组肿瘤质量(1.04±0.11)g,体表面积(211.10±19.21)mm2;3组间肿瘤质量及体表面积之间差异无统计学意义(P>0.05)。MDA231移植瘤裸鼠中,对照组肿瘤质量(0.65±0.17)g,体表面积(149.80±27.08)mm2;氯吡格雷组肿瘤质量(1.04±0.24)g,体表面积(183.80±30.18)mm2;替格瑞洛组肿瘤质量(1.08±0.35)g,体表面积(201.30±45.62)mm2;3组间肿瘤质量及体表面积之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 P2Y12受体拮抗剂对裸鼠移植瘤生长无明显促进或抑制作用。

大鼠心肌肥厚过程中microRNAs的表达变化

目的:分析大鼠心肌肥厚过程中microRNAs(miRNAs)的表达变化。方法:通过肾上腹主动脉缩窄(abdominal aorticconstriction,AAC)的方法建立大鼠心肌肥厚模型。实时定量PCR检测大鼠肥厚心肌中miRNAs的表达变化。结果:大鼠AAC后1周,心重/体重比以及心肌肥厚标志分子心房钠尿肽、β-重链肌球蛋白的编码基因Nppa、myh7表达明显升高,表明心肌肥厚模型建立成功;对肥厚心肌的miRNAs表达检测表明,miR-199a表达显著升高,miR-1、miR-133、miR-181a及miR-499表达显著降低。AAC后4周,miR-21、miR-24和miR-214表达显著升高,miR-181a表达显著降低,miR-23a、miR-133、miR-145、miR-199a和miR-499表达无明显改变。结论:心肌肥厚后miRNAs表达发生改变,可能在心肌肥厚病理过程中发挥着重要的调节作用。

逆转录病毒介导的对原代培养成年大鼠成肌细胞基因转染的研究

目的 探索成年大鼠成肌细胞的原代培养方法以及逆转录病毒对其的基因转染。方法 取成年SD大鼠的胸大肌 ,利用组织块法进行培养 ,并对培养细胞进行形态学研究和免疫细胞化学鉴定。以逆转录病毒为载体 ,将绿色荧光蛋白基因导入成年大鼠成肌细胞 ,利用倒置荧光显微镜及流式细胞仪对转染细胞进行观察。结果 采用组织块培养法 ,2周后成肌细胞的密度可达 10 7/ml,免疫细胞化学分析显示 90 %以上的细胞呈骨骼肌特异的myogenin抗体染色阳性。荧光显微镜和流式细胞仪检测发现eGFP基因可在成年大鼠成肌细胞中有效地表达 ,其转染效率约为 12 82 %。结论 利用组织块法成功培养成年大鼠原代成肌细胞 ,该方法实用性强 ,所得成肌细胞纯度高 ;逆转录病毒可介导成肌细胞的基因转导 ,为深入研究心肌梗死瘢痕中转基因成肌细胞自体移植奠定了基础。

microRNAs：心血管疾病重要的调控因子

微RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性19-25个核苷酸大小的非编码RNA分子,在进化中具有高度保守性,并且能够通过碱基匹配原则识别靶基因3'非翻译区的靶位点,从而抑制编码蛋白靶基因的翻译或(和)降解靶基因。目前的研究表明,miRNA在生物体发育、心血管疾病以及肿瘤发生等过程中起重要作用。本文对miRNA在心血管系统生理病理中的作用做一综述。

抗血小板多肽在大肠杆菌中的克隆和表达

设计合成了两条编码KGDX (赖 甘 天冬 X)的寡核苷酸链 ,长度为 3 6个碱基对 ,两端分别为BamHI酶和XcoI酶切位点。将该基因插入原核高效表达载体PGEX 4T 1的tac启动子下游 ,获得重组质粒PGEX 4T 1KGDX ,转化大肠杆菌DH5a,3 7℃诱导使重组子表达。GST KGDX融合蛋白具有可溶性 ,产量为3 5mg/L培养基 ,表达量占菌体总蛋白 48 0 2 %。破碎菌体上清经谷胱甘肽 琼脂糖悬珠亲和层析法获得纯度为95 %的重组蛋白。1 2 5I7E3竞争拮抗实验结果表明 ,GST无GPIIb/IIIa结合作用 ,GST KGD融合蛋白能代替 7E3竞争性地与GPIIb/IIIa受体特异性结合 ,从而抑制血小板聚集。其IC5 0值为 40 μmol/L。

精神疲劳和行为功能测定研究

本文研究和设计用微机测量人的5类8种精神行为功能,判断疲劳。具体指标有自我感觉、记忆力、视觉运动反应时、闪烁融合频率临界值和阅读能力测验。为部队制订合理的作息制度和适当劳动负荷提供科学的参考依据。在高炮部队、雷达兵部队、警卫通讯连和军医大学学员共101人的测试中,证明本测试系统设计科学、性能稳定、效果可靠、评分的客观性强,可以定性、定量地研究疲劳。

MicroRNA在血小板产生和激活中的作用

MicroRNA(miRNA)是调节蛋白表达的小分子非编码RNA在各种生理和病理过程中发挥重要作用。最近研究表明,大量的miRNAs如miR-150、miR-155、miR-146a、miR-27a等,在巨核细胞细胞核的分化成熟、巨核细胞胞浆内颗粒脱落形成血小板、血小板成熟并具有活性的过程中发挥重要作用。由于血小板中也具有功能完整的miRNA调控机制,因此某些miRNA在血小板的表达水平与血小板特异性激动以及病理状态的反应性相协调。该文对miRNA在巨核细胞分化和血小板功能中的研究进行概述。

miR-1腺病毒载体的构建及表达分析

目的构建并鉴定microRNA-1(miR-1)的腺病毒表达载体。方法 PCR扩增含大鼠miR-1前体的DNA片断,并将其克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack。pAdTrack经PmeI酶切线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183菌中进行同源重组。重组质粒pAdprecusor-miR-1线性化后,转染293A细胞,进行病毒包装,得到重组腺病毒颗粒Ad-miR-1。Ad-miR-1与Ad-GFP病毒转染培养的乳鼠心肌细胞,通过实时荧光定量PCR方法检测miR-1的表达效率。结果基因测序及酶切鉴定证实重组Adprecursor-miR-1腺病毒载体构建成功;腺病毒Ad-miR-1转染心肌细胞后,实时荧光定量PCR方法证实腺病毒Ad-miR-1能够显著提高心肌细胞内miR-1的表达水平。结论利用同源重组的方法构建的miR-1腺病毒能够提高心肌细胞内miR-1的表达水平。

MicroRNA:心肌缺血-再灌注损伤的调控者

近年来,大量实验表明microRNA(miRNA)参与并调控了心肌缺血-再灌注损伤的过程,为临床治疗心肌缺血性疾病提供了新的靶点和策略。该文简要介绍miRNA参与和调控心肌缺血-再灌注损伤的机制研究进展。

斑马鱼在血小板研究中的应用

斑马鱼是心血管生理病理研究中常用的模式生物。斑马鱼血小板与人类血小板具有高度相似性,而且斑马鱼具有体外受精、繁殖力强、胚胎透明等优点,越来越多关于血小板的研究利用斑马鱼作为模式生物,并取得了一定的进展。此文简要概述了斑马鱼血小板与人类血小板的相似性,以及利用斑马鱼作为模式生物研究血小板的一些进展。

趋化因子及其受体与动脉粥样硬化

本文概述了近几年来趋化因子及其受体的功能及结构的有关进展,讨论在动脉粥样硬化形成中趋化因子系统的参与及调节,着重论述了动脉粥样硬化中主要参与细胞的趋化因子系统的表达及其作用。