研精覃思,掇菁撷华

承蒙广大国内眼科同道的青睐,复旦大学附属眼耳鼻喉科医院临床病例讨论会已成功走过16个年头,并有幸成为一年一度专业人士满心期盼的盛事。每一届大会,我们都会收到来自全国各地的精彩病例,每一个案例都承载着医学的温度和责任。通过这些案例的分享与讨论。

双眼脉络膜骨瘤1例

资料 患者女性，37岁，因双眼视力下降2年于2012年8月6日就诊。

试题与答案

1．下列有关先天性眼黑变病的描述不正确的是： A．葡萄膜内扁平状、弥漫性或局限性黑色素细胞增生； B．增生的黑色素细胞类似正常黑色素细胞或体积稍大； c．增生的黑色素细胞胞核较小，胞质丰富，含有大量黑色素颗粒，无明显细胞异型性； D．本病不易伴发先天性青光眼、葡萄膜黑色素瘤、中枢神经细胞黑色素瘤。

药物缓释系统应用于玻璃体视网膜疾病的研究进展

玻璃体视网膜疾病如增殖性玻璃体视网膜增殖性疾病、视网膜色素变性、青光眼等是常见的致盲性慢性眼病,其治疗方法的研究一直是科学界的难点。利用药物缓释系统行眼内局部药物治疗是实现高效、持久、低毒药物治疗的有效手段。

老年痴呆生物标志物的转化医学研究

老年性痴呆（Alzheimer’Sdisease，AD）在我国目前约有600万患者，随着人口老龄化的问题日益加剧，我国老年性痴呆患者还将明显增加，给国家、社会和家庭带来沉重的负担。但AD的发病机理和早期诊断仍是基础和临床上的难题。因而生物标志物的研究成为解决以上问题的一个重要研究方向。由于患者组织标本取材困难；动物模型与临床病人差距较大，难以反映人类疾病的真实情况。因而，用动物模型开展的研究虽然较多，但对临床的指导意义不大。如何将基础研究与临床研究结合，有利于疾病的诊断、治疗及新药评价意义重大。

云南省临沧市小学生近视现况调查

目的了解云南省临沧市小学生近视现状,分析近视的相关影响因素,为当地近视防控提供初步的参考依据。方法横断面研究。采用随机分层抽样方法,于2019年6月随机抽取云南省临沧市4所小学的一年级至六年级小学生共666名,对调查的小学生进行电脑验光,问卷调查学生的一般情况、每天近距离学习用眼时间、每天电子产品使用时间、每天户外活动时间、近视是否配镜治疗。采用χ^(2)检验比较性别、年龄、年级、民族、每天学习用眼时间、每天电子产品使用时间、每天户外活动时间不同的近视患病率差异,二项logistic回归分析近视的相关影响因素。结果本次调查小学生平均年龄(9.5±1.6)岁,其中男性343名、女性323名。近视学生人数达277名,近视患病率高达41.6%,而佩戴眼镜者仅占近视学生的18.4%。χ^(2)检验结果显示,女生近视患病率高于男生(χ^(2)=4.617,P=0.032);年龄越大患病率越高(χ^(2)=17.848,P<0.001),年级越高患病率越高(χ^(2)=32.514,P<0.001);每天学习用眼时间越长患病率越高(χ^(2)=6.515,P=0.038),每天电子产品使用时间越久患病率越高(χ^(2)=15.369,P<0.001),每天户外活动时间越久患病率越低(χ^(2)=29.448,P<0.001)。不同民族间的近视患病率差异无统计学意义(χ^(2)=6.679,P=0.246)。二项logistic回归分析结果显示,小学生近视与否与性别、年龄、年级、每天学习用眼时间、每天电子产品使用时间、每天户外活动时间具有相关性(P均<0.05)。结论云南省临沧市小学生近视患病率高达41.6%,而佩戴眼镜者仅占近视学生的18.4%,是不容忽视的公共健康问题。近视与小学生的性别、年龄和年级相关,同时与小学生的用眼行为密切相关。

探讨一种新型Wnt替代蛋白激活脑血管Wnt信号通路对血脑屏障的保护作用

目的探讨一种新型Wnt替代蛋白(Wnt-S)对人脑血管内皮细胞中Wnt/β-catenin信号通路的作用,可能提供一种保护血脑屏障的新途径。方法用分子克隆技术构建Wnt-S in pcDNA3. 1(+)质粒,在HEK293F细胞中瞬时转染该质粒,表达纯化Wnt-S蛋白; Western blot检测含5x His-tag的Wnt-S蛋白;免疫荧光染色检测人源脑血管内皮细胞(hCMEC/D3)标记物CD31、VE-cadherin、GLUT1和MFSD2A;实时荧光定量PCR检测HEK293和hCMEC/D3细胞的Wnt蛋白受体FZD1-10和LRP5/6的表达情况,检测加药处理后HEK293和hCMEC/D3细胞中Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因AXIN2的表达情况。结果核酸电泳结果显示Wnt-S质粒构建完成; Western blot结果显示检测到了Wnt-S蛋白; HEK293中FZD1-7和LRP6高表达,hCMEC/D3中FZD2,4,6和LRP6高表达,FZD1,3低表达;实时荧光定量PCR结果显示,加Wnt-S蛋白处理后,HEK293和hCMEC/D3细胞中AXIN2基因表达水平显著上调(P <0. 001),说明Wnt-S蛋白有生物活性,并且激活了Wnt/β-catenin信号通路。结论 Wnt-S蛋白具有与天然Wnt3a蛋白类似的生物功能,能够激活人脑血管内皮细胞中的经典Wnt信号通路,以保护血脑屏障。

左眼葡萄膜炎-青光眼-前房积血综合征1例

51岁女性,因"左眼反复视力下降2年,加重1年"就诊。2年前因左眼反复视力下降,外院诊断为左眼玻璃体积血,予左眼玻璃体切除术,术后症状未见改善。此次就诊左眼裸眼视力0.1,矫正无助,眼压有波动,最高到32.4 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),症状在活动时更明显。裂隙灯检查见角膜色素性KP(+),前房Tyndall(+++),前房细胞(+++),颞上方虹膜基质萎缩伴透照缺损,瞳孔欠圆,直径约4 mm,对光反应迟钝,人工晶状体(IOL)倾斜,玻璃体混浊,眼底糊。5年前曾行双眼白内障摘除联合IOL植入术,双眼高度近视病史。诊断为葡萄膜炎-青光眼-前房积血综合征(UGH),需要与白内障术后的非感染性葡萄膜炎、迟发性感染性眼内炎相鉴别。给予巩膜层间缝线固定IOL置换术,术中房角镜下见前房角色素沉着,送检房水病原菌检测阴性,房水涂片见红细胞。术后1年内随访患者眼压稳定,玻璃体混浊消退,视力提高明显。讨论体会:白内障术后远期出现的反复视力下降伴眼压升高,反复前房炎症反应在考虑UGH时,应首先排除迟发性感染性炎症的可能性。无缝线巩膜固定三片式IOL(如Yamane方法)在高度近视患者中需谨慎使用。

基于环介导等温扩增方法高效检测模拟眼内液中铜绿假单胞菌的研究

目的建立一个稳定、高效检测眼内液中铜绿假单胞菌的体系。方法采用环介导等温扩增(LAMP)技术,由0.1~0.2 mL眼内平衡盐溶液(BSS)模拟眼内房水或玻璃体,利用铜绿假单胞菌gbca基因,特异性设计5组LAMP引物,并对扩增方法进行关键试剂的优化,检测眼内液中铜绿假单胞菌。结果该扩增方法经过优化后,最低可以检出100 fg/μL纯基因组DNA,接近荧光定量灵敏度,具有很好的重现性。此外该方法在检测眼内液中混合的菌落时呈现出良好的检测效果,可以检测出2.1×10^2 CFU/mL,极具应用价值。结论建立了一个稳定、高效、灵敏的恒温扩增体系,可以应用于眼内液中铜绿假单胞菌的检测。

衷心的感谢

特别感谢来自全国各地的眼科专家在年底繁忙的会议季如约线上点评或主持参会:北京大学人民医院赵明威教授,北京同仁医院魏文斌教授、彭晓燕教授、潘志强教授、李树宁教授、张丰菊教授,北京协和医院陈有信教授,广州中山眼科中心杨华胜教授、丁小燕教授,天津医科大学眼科医院赵少贞教授、张伟教授,浙江大学医学院附属第一医院沈晔教授、童剑萍教授,四川大学华西医院张美霞教授,中南大学湘雅二医院江冰教授,江苏省徐州市第一人民医院李甦雁教授等。

促红细胞生成素缓释微球玻璃体腔注射对视网膜神经节细胞的保护作用

目的 探讨乳酸/羟基乙酸共聚物（PLGA）装载的促红细胞生成素（EPO）缓释微球（EPO-PLGA微球）经玻璃体腔注射对大鼠视神经挫伤模型中受损视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用.方法 选取成年SD大鼠,建立视神经挫伤模型.建模后分别经玻璃体腔内注射含10 IU EPO的PLGA微球（EPO-PLGA组）、10 IU EPO（EPO组）、5 μl空白PLGA（PLGA组）、5 μl PBS（PBS组）,另设未治疗组不予玻璃体腔注药.术后5 d和2周,做视网膜切片,对各组RGC凋亡情况行TUNEL检测;术后23 d,DiI上丘逆标RGC,并于术后4周处死大鼠,视网膜铺片观察各组RGC存活情况;每组各个时间点分别处死6只SD大鼠.采用方差分析对结果进行比较.结果 TUNEL检测显示,术后5 d和2周,各组均可见TUNEL阳性细胞,其中EPO-PLGA组和EPO组TUNEL阳性细胞显著减少,其细胞凋亡率明显少于PLGA组、PBS组及未治疗组.术后4周,视网膜铺片RGC计数显示,正常SD大鼠RGC密度为（2387.7±164.9）个/mm^2,未治疗组为（748.3±58.8）个/mm^2,EPO-PLGA组为（1296.7±157.6）个/mm^2,EPO组为（1418.5±154.9）个/mm^2,PLGA组为（821.7±52.1）个/mm^2,PBS组为（804.4±86.4）个/mm^2;可见EPO-PLGA组和EPO组较未治疗组细胞密度显著增高,具有明显的RGC保护作用（P均＜0.01）,而EPO-PLGA组和EPO组间差异无统计学意义（P=0.065）.结论 EPO-PLGA缓释微球与EPO具有等效的RGC保护作用,这为进一步观察EPO-PLGA缓释微球的长效神经保护作用奠定了基础.

表观遗传学在眼科的研究进展

表观遗传学（epigenetics）是指DNA序列不发生变化但基因表达的水平和功能发生了可遗传的改变,主要包括DNA甲基化、组蛋白共价修饰、非编码RNA调控、基因印记等.这种调控机制的基因型未变而表型改变,并在细胞的分裂、增生及之后的发育过程中均能稳定地传递下去,并可引起相应的病理生理变化.本文重点讨论DNA甲基化和组蛋白质修饰、非编码RNA调控,并就其在眼球发育、眼科疾病的发病和潜在的治疗机制研究进展进行综述.

银杏内酯B通过抑制视网膜神经节细胞凋亡促进其轴突生长

青光眼、视神经炎等疾病的一个共同病理特征是视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的持续、不可逆性凋亡。银杏内酯B对脑组织神经元有很好的保护作用,并对神经元突起的生长和突触形成起重要作用。本文旨在观察银杏叶提取物(EGB761)和银杏内酯B对RGCs轴突生长的影响。采用三维立体培养系统进行视网膜植片培养,观察RCGs轴突数目和长度的变化,并对生长出的轴突进行免疫荧光染色鉴定,培养的视网膜植片用TUNEL法检测RGCs的凋亡,并进行免疫染色观察Caspase-3激活的情况。结果显示,与阴性对照组相比,EGB761或银杏内酯B处理的视网膜植片中轴突数量和长度明显增加。免疫荧光染色证实生长出的突起为RGCs轴突。相对阴性对照组,银杏内酯B处理的RGCs凋亡减少,Caspase-3的激活也被抑制。以上结果提示,银杏内酯B能够促进RGCs轴突的生长,主要机制是抑制RGCs凋亡。

阿尔茨海默病生物标记物的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)又称早老性痴呆,是老年人常见的神经退行性疾病之一,其病理特征包括:老年斑、神经元纤维缠结和神经元丢失。生物标记物是指一些可供客观测定和评价的普通生理、病理或治疗过程中的特征性指标,经典的AD的生物标记物如Aβ和磷酸化tau蛋白已被广泛用于AD病人的临床诊断。近年来,由于蛋白组学、基因组学、神经影像等新技术新方法的不断引入,生物标记物的应用范围由疾病的早期诊断拓展到病程的监控以及药物疗效的评价。本文就阿尔茨海默病生物标记物的研究进展进行综述。