鱼腥草挥发油羟丙基-β环糊精包合物的制备

目的制备鱼腥草挥发油羟丙基-β环糊精包合物。方法 GC法测定挥发油含有量(以甲基正壬酮为对照品),计算包合率和载药量。分别采用搅拌法、研磨法和超声法制备包合物。以挥发油与羟丙基-β环糊精比例、包合温度、搅拌速度、包合时间为影响因素,包合率和载药量为评价指标,正交试验优化制备工艺。TLC法、红外光谱法、差示扫描量热法进行表征。再通过高温、高湿、强光照试验考察包合物稳定性。结果搅拌法所得包合物的产率、包合率、载药量均最高。最佳条件为挥发油与羟丙基-β环糊精比例1∶25,包合温度50℃,搅拌速度420 r/min,包合时间80 min,包合率77.35%,载药量4.48%。所得包合物为白色粉末,质地疏松,溶解度显著增加,体外累计释放度达80.05%。其在高温(60℃)、强光照(3 000 lx)下稳定性良好,而在相对湿度大于75%时潮解结块,包合率和载药量明显降低,但复水性良好。结论鱼腥草挥发油羟丙基-β环糊精包合物不是简单的混合物,有可能生成了新物相,在储藏时应保持干燥密封。

基于PI3K/AKT信号通路探究藤茶总黄酮对2型糖尿病大鼠糖脂代谢、氧化应激损伤的干预作用

目的基于PI3K/AKT信号通路探究藤茶总黄酮对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖脂代谢、氧化应激损伤的干预作用。方法高脂高糖饲料+低剂量链脲佐菌素(STZ,60 mg/kg)建立2型糖尿病大鼠模型。动物随分为空白组、模型组、盐酸二甲双胍组、藤茶总黄酮高剂量组、藤茶总黄酮低剂量组。空白组除外,其余动物给予相应药物灌胃,1次/d,均给药6周。酶联免疫吸附分析(Elisa)检测各组动物血清中空腹血糖(FPG)、胰岛素(INS)、胰岛素抗体(IAA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX);取动物全血及血浆,血流变监测仪检测动物全血黏度、血浆黏度、红细胞压积、血沉值;取肝脏组织检测肝糖原(GL)、葡萄糖激酶(Gc K)、葡萄糖-6-磷酸激酶(G-6-Pase)含量;实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-q PCR)法检测大鼠肝脏胰岛素受体底物2(IRS2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT2)、叉头框蛋白O1(Fox O1)的mRNA表达量;取胰腺、肝脏组织,HE染色观察病理组织变化。结果与模型组比较,藤茶总黄酮各剂量组均可不同程度降低模型动物血清中FPG、IAA、TC、TG、LDL-C、MDA及肝脏组织中Fox O1 mRNA表达量,升高模型动物血清中INS、HDL-C、SOD、T-AOC、GSH-PX及肝脏组织中IRS2、PI3K、AKT mRNA表达量,改善胰腺及肝脏病理损伤,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论藤茶总黄酮对2型糖尿病大鼠糖脂代谢、氧化应激损伤具有一定干预作用,改善胰腺及肝脏病理变化,其机制可能与上调IRS2、PI3K、AKT及下调Fox O1 mRNA表达有关。

基于生物信息学筛选尿毒症差异基因及中药预测

目的:运用生物信息学方法分析尿毒症(uremia)基因芯片数据,筛选差异表达基因及主要通路,预测关键基因的潜在治疗中药,为其治疗提供新的靶点和药物。方法:从GEO数据库下载尿毒症与健康人的基因芯片数据,筛选差异表达基因(DEGs),通过STRING数据库构建DEGs的蛋白互作网络,采用筛选Cytoscape软件筛选关键基因,并对关键基因进行GO与KEGG富集分析,最终结合CMap数据平台,预测对尿毒症具有潜在治疗效果的中药。结果:共筛选出571个DEGs,包括526个下调基因和45个上调基因;对15个关键基因进行GO分析表明主要参与K48蛋白连接泛素化、细胞对热反应的调节、细胞生长的负调控、蛋白结合、泛素结合酶活性等生物过程;KEGG通路分析主要富集于PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、细胞周期、FoxO信号通路等信号通路;潜在治疗尿毒症的中药有黄芪、钩藤、黄芩、人参、积雪草等。结论:本研究通过基因芯片数据筛选尿毒症关键基因,并预测了潜在治疗中药,为尿毒症在中药方面的新药开发提供了潜在基因靶点与研发思路。

LC-MS/MS同时测定芪桂苓合剂中7个成分

目的:建立UPLC-MS/MS法快速测定芪桂苓合剂中黄芪甲苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸、橙皮苷、柴胡皂苷a的含量。方法:采用Kinetex C_(18) 100A色谱柱(50 mm×2.1 mm,2.6μm);流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-5 mmol·L^(-1)乙酸铵甲醇(B),梯度洗脱;流速为0.3 mL·min^(-1)。结果:黄芪甲苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸、橙皮苷、柴胡皂苷a的质量浓度分别在0.09798~4.899、0.03164~1.582、0.03212~1.606、0.052~2.6、0.06075~3.0375、0.30654~15.327、0.024~1.2 mg·L^(-1)内与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为95.4%~105.0%。4个批次样品中,7个成分的质量浓度依次为1.0744~1.104、0.2799~0.2887、0.5195~0.5455、0.4378~0.4786、0.5703~0.6543、1.1234~1.3636、0.5673~0.5974 g·L^(-1)。结论:该方法快速、灵敏、准确,可为芪桂苓合剂的质量评价提供参考。

正交试验-多指标权重分析法优选芪苓益肾颗粒的提取工艺

目的优选芪苓益肾颗粒的提取工艺。方法以黄芪甲苷得率、总多糖得率、干膏得率的综合评分为评价指标,采用层次分析法(AHP)确定这3个指标权重系数,设计L9(34)正交试验筛选最佳加水量、提取次数和提取时间,并进行验证试验。结果以AHP法确定的权重系数合理有效。筛选的最优提取工艺为加8倍量水,提取3次,每次1 h。3次验证试验结果显示,黄芪甲苷、总多糖、干膏得率的平均值分别为0.10%、2.51%、43.09%;平均综合评分为99.88,RSD值为0.03%。结论正交试验设计结合AHP确定的多指标权重系数法可较好地优化芪苓益肾颗粒的提取工艺。