利用“微创刷”法获得抗草甘膦转基因大豆

以发芽3 d的大豆成熟种子胚尖生长点为作用点,利用"微创刷"法将抗草甘膦基因(EPSPS)转入绥农22中,对转化植株T1代进行草甘膦筛选,对筛选后的抗性植株进行PCR检测,得到抗草甘膦转基因大豆。同时研究了不同浓度草甘膦对野生型绥农22与抗草甘膦转基因绥农22大豆植株的影响。结果表明:绥农22 T0代成株率为97.38%,对T1代具有草甘膦抗性的植株进行PCR检测,初步证明EPSPS基因成功转入大豆中,T1代转化效率为6.20%;对野生型绥农22与"微创刷"法获得的转基因绥农22大豆在不同浓度草甘膦进行相关生理指标测定,抗草甘膦转基因绥农22大豆在不同浓度草甘膦作用下叶片叶绿素含量指数、光合速率高于野生型绥农22大豆,莽草酸含量低于野生型绥农22大豆,进一步证明了大豆抗性植株对草甘膦的抗性。

玉米氰化物解毒基因β-CAS和NIT在非生物胁迫下的表达与生物学效应

氰化物(cyanide)对生物有机体和环境都有剧毒.在非生物胁迫条件下,植物细胞内会产生大量的氰化物,这些氰化物对细胞具有毒害作用,基因β-CAS和NIT是玉米细胞氰化物解毒途径上的重要基因.本研究分别以200,mmol/L Na Cl胁迫条件下第2,h、8,h、24,h和48,h的天塔5号(F1)及其亲本三叶期的幼苗作为实验材料,对其光合速率、生长势、叶片氰化物含量及氰化物解毒途径重要相关基因β-CAS和NIT的表达量进行了检测和统计学分析.研究结果表明,F1代的根长显著长于亲本;在盐胁迫处理下,三系叶片的光合速率均发生下调,其中F1的光合速率和母本没有显著差异,但是显著高于父本;F1叶片的氰化物含量比母本和父本更早发生下降;三系的基因β-CAS表达量均上调,上调幅度从大到小的顺序依次是母本、F1和父本;F1和母本的NIT基因表达量下调,父本则发生上调.

LmAPX基因在大肠杆菌和酵母菌中的表达研究

目的:研究枸杞抗坏血酸过氧化物酶基因(ascorbate peroxidase,LmAPX)在原核中的表达和酶学特性以及在酵母菌中的抗氧化能力,为进一步研究逆境诱导的抗氧化胁迫的作用机理奠定理论基础。方法:将LmAPX转入大肠杆菌BL21中进行异源表达,采用Ni2+亲和层析,纯化重组蛋白,并对不同温度和pH值下的酶活进行研究,Lineweaver-Burk双倒数作图法测定该酶的Km和Vmax值。将LmAPX转入酵母菌株W303中进行H2O2和NaCl氧化胁迫处理。结果:该酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和6.5。当抗坏血酸(Ascorbic acid,AsA)浓度过量时,对H2O2的Km和Vmax分别是0.17±0.02 mmol/L和11.78±1.88 mmol/min·mg;当H2O2浓度过量时,对AsA的Km和Vmax分别是2.19±0.40 mmol/L和58.82±3.51 mmol/min·mg。含有LmAPX基因的酵母菌株,在半乳糖的诱导下在8 mmol/L H2O2和100 mmol/L NaCl的培养基上的生长都明显优于对照组。结论:LmAPX蛋白具有很好的抗氧化性和耐盐性。

望远镜

1608年，荷兰小镇的一家眼镜店的主人利伯希为检查磨制出来的透镜质量，把一块凸透镜和一块凹透镜排成一条线，通过透镜看过去，发现远处的教堂塔尖好像变大拉近了。