基因工程菌发酵表达核苷磷酸化酶条件的优化

目的 优化苷磷酸化酶（包括嘌呤和嘧啶核苷磷酸化酶）基因工程菌的发酵表达条件。方法通过工程菌摇瓶培养，测定吸光度D值，考马斯亮蓝（Bradford）法测定蛋白，SDS—PAGE电泳和凝胶成像扫描分析表达量，优化表达条件；通过正交试验优化50L发酵罐发酵条件。结果摇瓶培养起始pH为7．0～7．2，于30℃培养4h，加入终浓度为0．4mmol／L的异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导8h后收获菌体，可得到较高的生物量和重组酶蛋白表达量。50L发酵罐的最佳条件为起始pH为7．0～7．2，于32oC培养4h，加入终浓度为0．4mm01／L的IPTG诱导9h后收获菌体，每升发酵液可得2g以上的酶蛋白。结论基因工程菌发酵表达核苷磷酸化酶产量较高，可工业化生产．为酶法合成核苷酸类似物的研究奠定了基础。

用宇佐美曲霉酸性蛋白酶水解鸡肉的研究

采用宇佐美曲霉酸性蛋白酶水解鸡肉，较详细地考察了温度、ｐＨ值、加酶量、酶解时间等因素对氨基氮浓度的影响。在本文推荐的条件下，酶解液氨基氮浓度可达５．００ｍｇ／ｍｌ。

酱香风味酵母抽提物的制备

添加香料、酱曲精进行酵母自溶制备抽提物,试验了温度、pH值、酱曲精加入量对酵母细胞自溶的影响。结果表明,当温度60℃、pH值6．5、加入酱曲精0．4%(酵母干重计)自溶24h效果较好,得浓厚酱香风味酵母抽提物。