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基于CNKI期刊的分子生物学教学研究文献计量与可视化分析
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作者 高进涛 莫之婧 +1 位作者 陈莉 李贤成 《华夏医学》 CAS 2024年第2期231-237,共7页
采用CiteSpace文献计量软件对2003—2022年中国知网(CNKI)收录的分子生物学教学研究文献1683篇进行可视化知识图谱分析,探究国内分子生物学教学研究的发展现状、研究热点及未来趋势。研究结果表明,分子生物教学研究整体呈上升趋势;研究... 采用CiteSpace文献计量软件对2003—2022年中国知网(CNKI)收录的分子生物学教学研究文献1683篇进行可视化知识图谱分析,探究国内分子生物学教学研究的发展现状、研究热点及未来趋势。研究结果表明,分子生物教学研究整体呈上升趋势;研究者和机构已初具规模,有核心作者群出现,但相互之间合作仍需加强;研究热点主题主要集中在教学改革、实验教学和教学质量等方面;翻转课堂、虚拟仿真、雨课堂、课程思政是近年来研究的重要热点,并有望成为近期持续关注的热点。研究结果有助于了解此领域的研究现状和未来趋势,对我国分子生物学教学研究与实践探索具有借鉴意义。 展开更多
关键词 分子生物学 文献计量 发展现状 研究热点 未来趋势
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肝细胞癌中UBE2S互作蛋白的筛选及预后模型构建
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作者 王小燕 张豪 +2 位作者 郭泽皓 曹骏 莫之婧 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期168-177,共10页
目的:筛选泛素结合酶E2S (UBE2S)互作蛋白并构建肝细胞癌(HCC)基于UBE2S互作蛋白的预后模型(UIPM),分析UIPM评估HCC患者预后的价值。方法:采用免疫共沉淀(Co-IP)技术筛选与Flag-UBE2S结合的蛋白复合体,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶... 目的:筛选泛素结合酶E2S (UBE2S)互作蛋白并构建肝细胞癌(HCC)基于UBE2S互作蛋白的预后模型(UIPM),分析UIPM评估HCC患者预后的价值。方法:采用免疫共沉淀(Co-IP)技术筛选与Flag-UBE2S结合的蛋白复合体,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和Western blotting法验证后,采用液相色谱-质谱联用仪(LC-MS)分析鉴定UBE2S互作蛋白,并对互作蛋白进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。采用R软件survival包筛选癌症基因组图谱(TGGA)中HCC预后相关蛋白与UBE2S互作蛋白取交集,通过LASSO回归分析从交集蛋白中获取关键蛋白构建UIPM,并建立预后模型风险评分公式,按照风险评分的中位值将TGGA中HCC患者分为高风险组和低风险组,通过受试者工作特征曲线(ROC)评估UIPM的预测准确性,并采用国际癌症基因组联盟(ICGC)数据库对UIPM预测准确性进行再次验证。采用单因素和多因素Cox回归分析评估UIPM风险评分是否为HCC的预后独立危险因素,并进一步构建列线图模型。结果:Co-IP联合LC-MS分析得到97个UBE2S互作蛋白。GO功能和KEGG信号通路富集分析,互作蛋白主要与半胱氨酸型内肽酶活性、氧化应激和细胞死亡有密切关联。TCGA筛选出5 163个HCC预后相关蛋白,与UBE2S互作蛋白取交集,获得40个预后相关互作蛋白,LASSO回归分析得到7个关键蛋白,包括UBE2S、热休克蛋白家族A成员8(HSPA8)、异质性胞核核糖核蛋白H1(HNRNPH1)、含TCP1伴侣蛋白亚基3 (CCT3)、真核翻译起始因子2亚基1 (EIF2S1)、活化蛋白C激酶1受体(RACK1)和肌动蛋白相关蛋白2/3复合体亚基4(ARPC4),并构建了UIPM,高和低风险组HCC患者生存率存比较差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线,UIPM预测HCC患者1、2和3年UIPM风险评分的ROC曲线下面积(AUC)值均大于0.7,表明预测模型准确度较高。ICGC数据库数据也证实UIPM预测准确度较高。单因素和多因素Cox回归分析,UIPM风险评分是HCC患者的独立预后危险因素(P<0.05)。列线图预测HCC患者生存率与实际生存率之间有较好的一致性。结论:97个互作蛋白与UBE2S相互作用,可能通过氧化应激和铁死亡相关通路的失调促进HCC发生发展。UIPM风险评分是HCC预后的独立危险因素,可以用于预测HCC患者预后。而UBE2S、HSPA8、HNRNPH1、CCT3、EIF2S1、RACK1和ARPC4有望成为HCC新的生物标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 泛素结合酶E2S 肝细胞癌 免疫共沉淀 液相色谱-质谱联用仪 预后分析
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基于DNA损伤应答的肝细胞癌预后基因筛选和预后模型构建
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作者 曹骏 张豪 +3 位作者 郭泽皓 王小燕 李康智 莫之婧 《右江民族医学院学报》 2024年第1期24-31,共8页
目的筛选差异表达的DDR相关基因(differential expressed-DNA damage response associated genes,DEDDR)构建肝细胞癌(HCC)预后模型。方法使用limma R软件包从TCGA-LIHC数据集中筛选HCC样本和正常样本之间的差异表达基因(DEGs),将其与27... 目的筛选差异表达的DDR相关基因(differential expressed-DNA damage response associated genes,DEDDR)构建肝细胞癌(HCC)预后模型。方法使用limma R软件包从TCGA-LIHC数据集中筛选HCC样本和正常样本之间的差异表达基因(DEGs),将其与276个DDR基因取交集获得差异表达DEDDR。通过单因素Cox分析和Lasso回归分析以确定DEDDR预后模型,ROC曲线评估模型的准确性。单因素、多因素Cox回归分析DEDDR预后模型风险评分是否为HCC的预后独立危险因素,并采用国际癌症基因组联盟(ICGC)中LIHC数据作为外部数据进行验证。最后对low-DEDDR组和high-DEDDR组进行GSEA和免疫浸润分析。结果1361个DEGs与276个DDR基因取交集获得25个DEDDR,Lasso回归分析得到4个DEDDR(TTK、NSMCE2、NUDT1、NEIL3)用于构建预后模型。low-DEDDR组比high-DEDDR组患者具有更高的生存率。ROC曲线显示该模型预测HCC患者1年、2年和3年生存率的AUC值分别为0.77、0.70和0.68;单因素和多因素Cox回归分析结果显示DEDDR预后模型风险评分是HCC患者的独立预后危险因素,且其AUC值高于其他临床病理特征,ICGC中LIHC数据进一步验证了该模型的准确性和临床适用性较好。GSEA分析显示high-DEDDR组主要富集细胞周期、细胞衰老、DNA复制等信号通路,此外high-DEDDR组中2型辅助性T细胞(Th2)丰度更高,而嗜酸性粒细胞丰度更低。结论DEDDR预后模型在预测HCC患者的预后方面具有较好的表现,可为评估HCC患者预后、识别高危患者提供参考。 展开更多
关键词 DNA损伤 肝肿瘤 预后
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创新创业融合专业教育对生物医学工程专业学生自我效能感的影响
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作者 杨干清 莫之婧 李思婧 《科技风》 2024年第5期58-60,共3页
目的:探讨创新创业融合专业教育对生物医学工程专业学生自我效能感的影响。方法:选择60名桂林医学院智能医学与生物技术学院2022级本科生随机等分为对照组30名和实验组30名,实验组采用创新创业融合专业教育模式,对照组采用传统教育模式... 目的:探讨创新创业融合专业教育对生物医学工程专业学生自我效能感的影响。方法:选择60名桂林医学院智能医学与生物技术学院2022级本科生随机等分为对照组30名和实验组30名,实验组采用创新创业融合专业教育模式,对照组采用传统教育模式,采用一般自我效能感量表进行测量和分析,在进行教学实验前后分别对学生的一般自我效能感进行测量,比较两组学生的一般自我效能感变化情况。结果:干预后,实验组学生一般自我效能感平均为(30.43±1.60)分,对照组为(25.10±2.98)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:创新创业融合专业教育对学生自我效能感的提升具有积极影响,通过创新创业融合专业教育指导学生进行实践活动,学生能够提高自己的创新思维和实际认知能力,增强对自我能力的信心和认同。 展开更多
关键词 创新创业 生物医学工程 自我效能感
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“生物医学+创新创业”相融合的探索与实践--以开展生物医学科教营为例
5
作者 李康智 莫之婧 《科技视界》 2023年第7期83-86,共4页
基于双创教育与生物医学专业教育融合的视角,结合生物医学专业特征,基于学生受益于创新创业教育以及助力应用型人才培养的目标,构建了"生物医学科教营"教育模式,将"生物医学+创新创业"相融合。其主讲团队在科教营... 基于双创教育与生物医学专业教育融合的视角,结合生物医学专业特征,基于学生受益于创新创业教育以及助力应用型人才培养的目标,构建了"生物医学科教营"教育模式,将"生物医学+创新创业"相融合。其主讲团队在科教营项目中培养能够结合应用基本理论知识攻克具体难题,把科学结论转换为具体的项目方法,或转化至公益科普项目方面的技能。参营者也能通过科教营活动接触生物医学知识,提升实践能力和培养科学思维方式。 展开更多
关键词 生物医学 创新创业 生物医学科教营
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肝癌细胞中VIPR1互作蛋白质谱分析及肝癌预后模型的构建
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作者 王小燕 张豪 +1 位作者 郭泽皓 莫之婧 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第17期3176-3182,共7页
目的:寻找与血管活性肠肽受体1(vasoactive intestinal peptide receptor 1,VIPR1)相互作用的蛋白并构建肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后模型。方法:采用免疫共沉淀技术(Co-immunoprecipitation,Co-IP)筛选Flag标签抗体... 目的:寻找与血管活性肠肽受体1(vasoactive intestinal peptide receptor 1,VIPR1)相互作用的蛋白并构建肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后模型。方法:采用免疫共沉淀技术(Co-immunoprecipitation,Co-IP)筛选Flag标签抗体结合的蛋白复合体,采用SDS-PAGE银染实验和Western blot进行验证,采用质谱分析(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)获得VIPR1的互作蛋白,采用生物信息学软件和癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas project,TCGA)数据库筛选hub互作蛋白、富集分析、构建HCC预后模型并采用国际癌症基因组联盟(International Cancer Genome Consortium,ICGC)中LIHC数据和GSE14520数据集作为外部数据对其预测准确性进行验证。结果:得到196个VIPR1的互作蛋白,筛选出8个关键模块共104个hub互作蛋白,主要与细胞骨架、核糖体的功能和细胞免疫密切相关,获得7个关键蛋白并构建了HCC预后Lasso回归模型,随后在两个外部数据集中验证了该模型在预测HCC预后方面具有可接受的准确性及临床适用性。结论:VIPR1的互作蛋白可促进HCC发生发展,其中关键蛋白构建的HCC预后模型有良好的准确性。 展开更多
关键词 VIPR1 HCC 免疫共沉淀 质谱 预后
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亲磷脂酸磷脂酶A1基因沉默降低MIN6细胞胰岛素分泌水平 被引量:5
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作者 莫之婧 苏何玲 +5 位作者 朱华 李红岩 杨易 史云龙 黄海霞 刘永明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第18期2872-2875,共4页
目的:探讨亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因沉默对小鼠分泌胰岛素细胞MIN6分泌功能的影响。方法:根据GenBank中小鼠PA-PLA1基因mRNA序列构建siRNA表达载体(pGPU6-PA-PLA1)并转染MIN6,实时荧光定量PCR和Western blot筛选有效干扰载体。将... 目的:探讨亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因沉默对小鼠分泌胰岛素细胞MIN6分泌功能的影响。方法:根据GenBank中小鼠PA-PLA1基因mRNA序列构建siRNA表达载体(pGPU6-PA-PLA1)并转染MIN6,实时荧光定量PCR和Western blot筛选有效干扰载体。将获得的有效干扰载体转染MIN6细胞48 h后进行葡萄糖刺激实验,检测其胰岛素分泌的变化。结果:酶切及测序证实成功构建了4个靶向PA-PLA1的siRNA表达载体。实时荧光定量PCR和Western blot分析显示siRNA表达载体pGPU6-PA-PLA1-1885具有较高的干扰效率,其转染的MIN6细胞PA-PLA1 mRNA水平降至对照组的46.3%,PA-PLA1蛋白水平降至对照组的33.9%,同时胰岛素分泌水平降至对照组的65.0%(P<0.05)。结论:PA-PLA1基因沉默可降低MIN6的胰岛素分泌水平。 展开更多
关键词 亲磷脂酸磷脂酶A1 SIRNA 基因沉默 胰岛素分泌
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CpG位点选择对焦磷酸测序法检测肝癌SMP30启动子甲基化的影响 被引量:1
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作者 莫之婧 郑顺心 周素芳 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第9期1-4,共4页
目的选择适宜的CpG位点用于焦磷酸测序法检测肝癌衰老标记蛋白30(SMP30)启动子甲基化。方法提取人肝癌细胞系SMCC-7721和BEL-7404的基因组DNA,设计针对SMP30基因序列1和序列2的扩增和测序引物,焦磷酸测序法检测SMP30基因序列1和序列2中... 目的选择适宜的CpG位点用于焦磷酸测序法检测肝癌衰老标记蛋白30(SMP30)启动子甲基化。方法提取人肝癌细胞系SMCC-7721和BEL-7404的基因组DNA,设计针对SMP30基因序列1和序列2的扩增和测序引物,焦磷酸测序法检测SMP30基因序列1和序列2中的CpG位点甲基化程度,并用Sanger测序法验证序列2中出现的SNP位点。结果 SMCC-7721和BEL-7404细胞系中,SMP30基因序列1中6个CpG位点低甲基化,与SMP30基因低表达不符,且测序结果质量评估均为失败。SMP30基因序列2中6个CpG位点高甲基化,与SMP30基因低表达相符,前2个CpG位点均为通过,而后4个CpG位点均为失败。去除第5和第6个CpG位点,只检测SMP30基因序列2中poly(T)结构前4个CpG位点,SMCC-7721细胞系中甲基化程度分别为100%、90%、100%和80%;BEL-7404细胞系中甲基化程度分别为100%、92%、100%和77%。除第3个CpG位点为失败,其余CpG位点均为通过。Sanger测序显示SMCC-7721和BEL-7404细胞系在第3个CpG位点前存在SNP位点,且均为A。结论焦磷酸测序时选择靠近基因转录起始点上游且在poly(T)结构之前的CpG位点,测得的SMP30启动子甲基化值较准确。 展开更多
关键词 肝癌 衰老标记蛋白30 甲基化 焦磷酸测序
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桂林地区乙肝患者HBV核苷类似物耐药位点分析 被引量:5
9
作者 苏何玲 班亚珂 +5 位作者 左晓臣 徐东平 朱华 莫之婧 刘青波 刘永明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第19期3189-3191,共3页
目的:检测桂林地区乙型肝炎患者体内HBV逆转录酶基因的耐药突变情况,为制订合理的治疗方案提供依据。方法:提取乙肝患者血清中HBV DNA,巢式PCR扩增其逆转录酶基因后测序,Vector NTI Suite 8.0及chromaslite201分析测序结果,Mega4.0进行... 目的:检测桂林地区乙型肝炎患者体内HBV逆转录酶基因的耐药突变情况,为制订合理的治疗方案提供依据。方法:提取乙肝患者血清中HBV DNA,巢式PCR扩增其逆转录酶基因后测序,Vector NTI Suite 8.0及chromaslite201分析测序结果,Mega4.0进行基因分型。结果:171例患者测序结果中18例发现有基因耐药突变,其中rtA181位点突变7例,占突变总数的38.9%。多药耐药基因突变12例,点突变总数的66.7%。B基因型患者耐药突变率为10.4%,C基因型患者耐药突变率为10.8%,两基因型分布比率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:桂林乙肝患者HBV逆转录酶基因耐药突变组合较为复杂,多药耐药基因突变比率较高。耐药突变的HBV基因型分布比率在所检测患者中无明显差异。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 HBV 核苷类似物 耐药突变
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分子生物学实验多媒体教程的构建与应用 被引量:3
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作者 朱华 苏何玲 +5 位作者 刘青波 莫之婧 马义丽 金荣仲 陈莉 刘永明 《中国高等医学教育》 2013年第4期113-114,共2页
分子生物学是一门实践性很强的学科,其实验教学对该学科的学习具有非常重要的意义。采用多媒体技术制作由多媒体课件、Flash动画、实验技术视频三大模块相结合的分子生物学实验多媒体教程,经多年的应用,获得了显著的教学效果。
关键词 分子生物学 实验 多媒体教程
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等位基因特异性PCR检测脂联素基因SNP位点方法的建立 被引量:1
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作者 胡春萍 苏何玲 +5 位作者 莫之婧 陈莉 朱华 刘青波 李康智 刘永明 《华夏医学》 CAS 2011年第4期403-406,共4页
目的:建立等位基因特异性PCR检测脂联素基因与2型糖尿病相关SNP位点的方法。方法:针对脂联素基因G531A,G545C,G11963T,T12194G和T13320C5个SNP位点设计野生型和突变型特异性引物,第一轮PCR的上游引物或下游引物与等位基因特异性引物进... 目的:建立等位基因特异性PCR检测脂联素基因与2型糖尿病相关SNP位点的方法。方法:针对脂联素基因G531A,G545C,G11963T,T12194G和T13320C5个SNP位点设计野生型和突变型特异性引物,第一轮PCR的上游引物或下游引物与等位基因特异性引物进行半巢式PCR。在同一SNP位点如果野生型引物出现扩增产物而突变型引物未出现扩增产物,则判定该位点为野生型,反之,为突变型;如两引物均出现扩增产物则为杂合子。DNA测序证实等位基因特异性PCR检测结果。结果:该等位基因特异性PCR检测方法对研究样本均有扩增,且每个SNP位点均检出相应的野生型、突变型和混合型个体。测序结果与等位基因特异性PCR检测结果吻合。结论:建立的等位基因特异性PCR检测脂联素基因SNP的方法灵敏可靠,可快速检测与2型糖尿病相关的5个SNP位点。 展开更多
关键词 等位基因特异性PCR 脂联素 SNP 2型糖尿病
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医学院校《生物化学与分子生物学》精品课程建设初探 被引量:1
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作者 马义丽 陈莉 +4 位作者 朱华 刘青波 苏何玲 莫之婧 黄健 《辽宁医学院学报(社会科学版)》 2012年第4期22-24,共3页
从教师队伍、教学内容、教学方法、教学管理和教材建设等几个方面的分析入手,结合本校实际情况,找到医学院校《生物化学与分子生物学》精品课程建设的突破口——优化课程内容、强化实验教学并改革教学方法。让学生在操作过程中巩固所学... 从教师队伍、教学内容、教学方法、教学管理和教材建设等几个方面的分析入手,结合本校实际情况,找到医学院校《生物化学与分子生物学》精品课程建设的突破口——优化课程内容、强化实验教学并改革教学方法。让学生在操作过程中巩固所学的知识要点,是精品课程建设的重中之重。 展开更多
关键词 生物化学与分子生物学 医学院校 精品课程
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基于GEO数据挖掘分析肝硬化-肝癌的演变机制
13
作者 陈燕 刘军 莫之婧 《华夏医学》 CAS 2022年第6期1-5,共5页
目的:应用生物信息学方法挖掘肝硬化-肝癌演变的关键基因,并探究其机制。方法:使用GEO2R,从数据集GSE6764中筛选出在肝硬化组织和极早期肝癌组织中差异表达的基因,随后进行GO和KEGG分析;构建蛋白质-蛋白质相互作用网络后通过Cytoscape... 目的:应用生物信息学方法挖掘肝硬化-肝癌演变的关键基因,并探究其机制。方法:使用GEO2R,从数据集GSE6764中筛选出在肝硬化组织和极早期肝癌组织中差异表达的基因,随后进行GO和KEGG分析;构建蛋白质-蛋白质相互作用网络后通过Cytoscape软件中的MCODE插件检测网络中最显著模块所含关键基因;对关键基因进行聚类分析和预后分析。结果:共筛选出169个差异表达基因,其中表达上调和下调的基因数目分别为19个和150个。MCODE筛选后获得16个关键基因,主要与细胞因子和免疫等因素相关,其中关键基因MPEG1与肝癌患者无病生存期相关。结论:本研究发现的关键基因,有助于认识肝硬化-肝癌的演变机制,并可作为早期肝癌防治的潜在标志物。 展开更多
关键词 肝硬化 肝癌 生物信息学
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MIN6细胞中亲磷酸酯酶A1基因表达与胰岛素分泌关系的初步研究 被引量:5
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作者 于婕 苏何玲 +6 位作者 莫之婧 刘青波 陈莉 朱华 胡春萍 李康智 刘永明 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第21期2576-2580,2583,共6页
目的研究亲磷酸酯酶A1(PA-PLA1)基因在小鼠分泌胰岛素细胞株M IN 6中的表达及其与胰岛素分泌的关系。方法对M IN 6细胞进行不同浓度和不同时间的葡萄糖刺激胰岛素分泌的实验,酶联免疫吸附法测定细胞上清液中胰岛素分泌量,实时荧光定量P... 目的研究亲磷酸酯酶A1(PA-PLA1)基因在小鼠分泌胰岛素细胞株M IN 6中的表达及其与胰岛素分泌的关系。方法对M IN 6细胞进行不同浓度和不同时间的葡萄糖刺激胰岛素分泌的实验,酶联免疫吸附法测定细胞上清液中胰岛素分泌量,实时荧光定量PC R检测相应条件下PA-PLA1 m R N A的表达水平,线性相关分析PA-PLA1 m R N A表达水平与胰岛素分泌的相关性。结果在一定葡萄糖浓度范围内,PA-PLA1m R N A水平随着葡萄糖浓度的升高和刺激时间的延长而升高,并与细胞胰岛素分泌量呈明显的正相关。不同葡萄糖浓度和不同刺激时间的PA-PLA1 m R N A水平与胰岛素水平的相关系数r分别为0.89(P<0.01)和0.98(P<0.01)。结论小鼠分泌胰岛素细胞株M IN 6中PA-PLA1基因的表达与胰岛素分泌之间具有高度的正相关性。 展开更多
关键词 亲磷酸酯酶A1 基因表达 胰岛素分泌 相关性
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乙型肝炎病毒X蛋白对autotaxin表达的影响及其意义 被引量:2
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作者 肖雅伦 苏何玲 +5 位作者 谭燕莲 梁斌 谷云艳 莫之婧 黄红丽 刘永明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第13期2088-2092,共5页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)对autotaxin(ATX)表达的影响及其意义。方法构建重组HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx和重组ATX启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-ATX,共转染HepG2细胞检测HBx对ATX基因启动子的作用。构建稳定表达HBx... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)对autotaxin(ATX)表达的影响及其意义。方法构建重组HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx和重组ATX启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-ATX,共转染HepG2细胞检测HBx对ATX基因启动子的作用。构建稳定表达HBx的HepG2.HBx细胞,Western blot检测HBx对ATX蛋白表达的影响。结果共转染检测显示,pcDNA3.1(+)-HBx和pGL3-ATX共转染组的荧光素酶活性是空载体pcDNA3.1(+)和pGL3-ATX共转染组的1.47倍(P<0.000)。Westernblot检测显示,HepG2.HBx细胞ATX蛋白表达显著升高,为HepG2细胞的1.75倍(P<0.05)。结论 HBx可激活ATX基因启动子,上调ATX的表达,提示HBV感染可增强ATX/溶血磷脂酸的信号转导。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 X蛋白 AUTOTAXIN 基因表达 Autotaxin/溶血磷脂酸信号转导
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VIPR1启动子甲基化促进转录因子AP-2α下调VIPR1的表达并促进肝细胞癌的生长 被引量:1
16
作者 宁诗雨 何春梅 +2 位作者 郭泽皓 张豪 莫之婧 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期957-965,共9页
目的探讨血管活性肠肽受体1(VIPR1)在肝细胞癌(HCC)组织中低表达的转录调控机制和生物学功能。方法肝癌细胞系Hep3B和Huh7常规培养,实验分为VIPR1启动子野生型组、启动子突变载体1组、启动子突变载体2组和启动子突变载体1+2组。双荧光... 目的探讨血管活性肠肽受体1(VIPR1)在肝细胞癌(HCC)组织中低表达的转录调控机制和生物学功能。方法肝癌细胞系Hep3B和Huh7常规培养,实验分为VIPR1启动子野生型组、启动子突变载体1组、启动子突变载体2组和启动子突变载体1+2组。双荧光素酶报告基因实验检测AP-2α表达对VIPR1启动子活性的影响;DNA甲基化转移酶抑制剂(DAC)处理肝癌细胞,焦磷酸测序法检测VIPR1启动子甲基化水平的变化;染色质免疫共沉淀检测AP-2α与VIPR1启动子的结合能力;Westernblot检测AP-2α的敲减作用以及VIPR1的表达;Westernblot检测两种细胞株中VIPR1的差异表达;qPCR和Westernblot检测VIPR1过表达和敲减效果;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;CCK8实验检测细胞增殖。建立裸鼠移植瘤模型,检测LV-NC组和LV-VIPR1组中肿瘤的体积和质量。结果与VIPR1启动子野生型组相比,启动子突变载体1+2与AP-2α表达质粒共转染后,荧光素酶活性明显恢复(P<0.05);DAC处理后,VIPR1启动子甲基化水平降低,并且随着甲基化程度减弱,与VIPR1启动子结合的AP-2α显著减少(P<0.01);敲减AP-2α后,VIPR1表达上升;Huh7细胞株中VIPR1表达低于Hep3B细胞株,在两种细胞株中成功构建了VIPR1过表达和敲减模型,VIPR1过表达增加了G2/M期的细胞数量(P<0.01),凋亡细胞显著增加(P<0.001),细胞增殖受到抑制(P<0.001),而VIPR1敲低则相反。体内实验表明VIPR1过表达组的肿瘤体积减小(P<0.001),肿瘤量降低(P<0.05)。结论HCC中VIPR1的启动子甲基化促进了转录因子AP-2α的结合,并且抑制了VIPR1表达,而VIPR1过表达可使细胞周期阻滞在G2/M期,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖和肿瘤生长。 展开更多
关键词 转录因子AP-2α 肝细胞癌 甲基化 肿瘤生长 血管活性肠肽受体1
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人亲磷脂酸磷脂酶A1基因的克隆与序列分析及真核表达载体的构建
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作者 班亚珂 苏何玲 +4 位作者 朱华 莫之婧 刘青波 陈莉 刘永明 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期6-10,共5页
目的克隆人亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因,分析该酶基因及其蛋白质的序列特征并构建PA-PLA1基因真核表达载体,为该酶生理功能的研究提供实验依据。方法从人的肾脏组织中提取总RNA,逆转录制备cDNA。扩增人PA-PLA1基因并克隆测序。以Vect... 目的克隆人亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因,分析该酶基因及其蛋白质的序列特征并构建PA-PLA1基因真核表达载体,为该酶生理功能的研究提供实验依据。方法从人的肾脏组织中提取总RNA,逆转录制备cDNA。扩增人PA-PLA1基因并克隆测序。以Vector NTI 8.0、DNASTAR、ORF finder分析所克隆的人PA-PLA1基因及其蛋白质序列。构建真核表达载体pcDNA3.1-PA-PLA1,测序证实后转染小鼠分泌胰岛素细胞株MIN6,以Western blotting检测PA-PLA1蛋白的表达水平。结果人PA-PLA1基因mRNA全长为2 923 bp,编码区长2 238 bp,编码1个由745个氨基酸残基组成的蛋白多肽。序列比对表明所克隆的人PA-PLA1基因与牛PA-PLA1基因同源,并与KIAA0725p和p125基因高度相似,三者在脂肪酶家族中形成亚家族,但KIAA0725p蛋白和p125蛋白具有常见的脂肪酶活性中心保守序列GX-S-XG,而PA-PLA1的该序列为SX-S-XG。真核表达载体pcDNA3.1-PA-PLA1构建正确并在所转染的MIN6细胞中过表达PA-PLA1蛋白。结论 PA-PLA1、KIAA0725p蛋白和p125蛋白在脂肪酶家族中形成亚家族,但PA-PLA1具有独特的脂肪酶活性中心保守序列SX-S-XG。所构建的PA-PLA1基因真核表达载体能在MIN6细胞中过表达小鼠PA-PLA1蛋白。该研究结果将为PA-PLA1生理功能的研究提供实验依据。 展开更多
关键词 亲磷脂酸磷脂酶A1 克隆 序列分析 真核表达载体
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生物化学设计性实验的收获与体会
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作者 尹本鹏 丁淑梅 +1 位作者 莫之婧 苏何玲 《现代农业科学》 2008年第7期94-95,共2页
传统的生物化学实验教学模式局限于验证性实验,不利于培养学生的创新能力与科研素质。在学生掌握了生物化学的基本理论知识和技能操作后,教师依据实验条件结合学生兴趣,选取维生素C含量测定作为设计性实验,并由学生自行设计实验方案及... 传统的生物化学实验教学模式局限于验证性实验,不利于培养学生的创新能力与科研素质。在学生掌握了生物化学的基本理论知识和技能操作后,教师依据实验条件结合学生兴趣,选取维生素C含量测定作为设计性实验,并由学生自行设计实验方案及操作。设计性实验在培养学生创新能力、协作精神及科研素质方面取得了较为理想的效果。 展开更多
关键词 生物化学 设计性实验 维生素C 体会
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高校医药生物技术实验室安全教育现状调查及改进对策 被引量:4
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作者 李康智 莫之婧 《广东化工》 CAS 2021年第7期225-226,共2页
该文采取问卷星网上调查方式,在一定范围内了解医药生物技术实验室生物安全教育存在的问题。根据现实情况,提出了八点建议:内容涵盖制度、课程及培训设置、安全检查、安全投入等等,对生物安全课程体系构建、医药生物技术实验室长治久安... 该文采取问卷星网上调查方式,在一定范围内了解医药生物技术实验室生物安全教育存在的问题。根据现实情况,提出了八点建议:内容涵盖制度、课程及培训设置、安全检查、安全投入等等,对生物安全课程体系构建、医药生物技术实验室长治久安等都具有长远积极的意义。 展开更多
关键词 生物安全 管理 教育
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生物化学教学中学生自主学习能力的培养与评价体系构建 被引量:1
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作者 莫之婧 朱华 +2 位作者 刘青波 孙其喆 陈颖 《中国卫生产业》 2019年第4期147-148,共2页
传统生物化学教学模式不能适应当今飞速发展的生物化学教学和科研需求。该文建立了生物化学课程自主学习能力培养模式以及构建了相应的自主学习能力评价体系,开辟了一条集教学科研为一体的综合人才培养模式。
关键词 自主学习能力 生物化学 教学 人才培养模式
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