BIOMED-2系统应用于B细胞非霍奇金淋巴瘤抗原受体基因重排检测的研究

目的:探讨BIOMED-2系统在检测B细胞非霍奇金淋巴瘤中的应用价值。方法:选取石蜡包埋组织B细胞非霍奇金淋巴瘤40例、其他淋巴结增生性病变10例,提取组织DNA,应用BIOMED-2系统中的61条引物分成9个组别进行PCR扩增,检测DNA质量及抗原受体基因重排克隆性。结果:94%(47/50)样本DNA长度在300 bp以上,BIOMED-2系统检测的敏感性和特异性均为100%,Ig H-A、Ig H-B、Ig H-C、Ig H-D、Ig H-E、Ig K-A、Ig K-B、Ig L组检出率分别为45%(18/40)、27.5%(11/40)、87.5%(35/40)、55%(22/40)、47.5%(19/40)、80%(32/40)、50%(20/40)、22.5%(9/40),Ig H-C联合Ig K-A组合检出率为100%。结论:BIOMED-2系统适用于石蜡包埋组织B细胞抗原受体基因重排检测,具有很高的敏感性和特异性。

SB-431542抑制乳腺癌细胞BT-549的增殖和侵袭及其机理研究

肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的最主要原因，TGF-β超家族成员Nodal分子被证实参与肿瘤细胞的增殖和转移，因而基于Nodal信号为靶标开展抗肿瘤研究成为可能。该研究应用Western blot检测乳腺癌细胞株BT-549、T-47D、MCF-7、SK-BR-3和MDA—MB-231中的Nodal和基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的表达水平，发现它们在BT-549细胞中表达量最高。然后采用不同浓度_Nodal信号抑制剂SB．431542（1-50μmol／L）处理BT-549细胞48h，利用MTT法揭示20～50gmol／L的SB-431542抑制该细胞增殖。进一步利用细胞划痕和Transwell实验证明，10μmol／L的SB-431542可抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭。最后，通过明胶酶谱和Westernblot显示，10～30gmol／L的sB．431542可剂量依赖性地抑制MMP-2的表达和活性。上述结果说明，SB-431542通过阻断Nodal信号通路可效抑制乳腺癌细胞BT-549的增殖、迁移和侵袭，其作用机制可能与降低MMP-2的表达和活性有关。

Nodal基因的剪接异构体分析

利用GenBank数据库中Nodal分子的核酸和蛋白相关信息,采用生物信息学方法分析Nodal的分子生物学特征及其剪接异构体.应用基因克隆方法克隆人Nodal基因.结果表明Nodal基因至少有四种剪接异构体,除研究较清楚的isoform 1相对完整外,其它剪接异构体信息并不完整、功能未知且表达可能有组织特异性.特别是虽然Nodal基因isoform 1的氨基酸编码序列已知,但是发现目前NCBI提供的Nodal基因mRNA参考序列并不完整.通过基因克隆发现一种新的Nodal基因剪接异构体,它可能具有TGF-β超家族的特征性结构,但功能未知.结果说明人Nodal基因可能至少存在5种剪接异构体,除isoform 1外,其它isoform具体功能还有待进一步研究.