无症状HBsAg携带者血清补体C_3含量的变化及意义

目的 初步探讨补体C3 含量与无症状乙肝表面抗原携带者的关系。方法 随机抽取 80个无症状HBsAg携带者和 80个HBsAg阴性健康正常人的血清进行C3 含量比较 ;用酶联免疫吸附试验双抗夹心法检测HBsAg ,用免疫透射比浊法检测补体C3 。结果 无症状HBsAg携带者补体C3 含量均值为 (0 .71± 0 .19) ,对照组血清补体C3 含量均值为 (0 .98± 0 .30 ) ,两者经t检验 ,P <0 .0 5 ,有显著性差异。结论 无症状HBsAg携带者补体C3 值显著低于HBsAg阴性健康正常人 ,补体C3 与HBV感染有一定关系。

连接方法对重组效率影响的比较研究

[目的]为探索一种适于连接PCR产物和不同粘端的新方法。[方法]分别采用冻融法、割胶法、试剂盒法和牙签法连接PCR产物与质粒DNA以及酶切产物与质粒DNA,比较不同连接方法对重组效率的影响。[结果]采用冻融法和割胶法连接PCR产物与pMD18-T,其连接效率分别为94.00%和93.00%,略高于试剂盒法和牙签法。采用冻融法和割胶法连接酶切产物的重组效率分别为86.67%和88.00%,略高于试剂盒法和牙签法。牙签法简化了连接前DNA相关操作,具有较高的连接效率,完全能够满足普通连接反应,特别是粘端连接反应要求。[结论]割胶法具有很高的重组效率和转化效率,可以满足普通连接反应、文库构建对连接效率和转化效率的要求,具有一定的应用前景。

直肠癌患者血清中IL-3和sIL-2R的表达及意义

目的 检测直肠癌患者手术前后IL - 3(白细胞介素 - 3)和sIL - 2R(可溶性白细胞介素 - 2受体 )的表达情况。方法 采用双抗体夹心ELISA法。结果 直肠癌患者术前和术后血清中IL - 3表达低于正常对照组。sIL - 2R表达明显高于正常对照组。术前和术后血清IL3及sIL - 2R表达无差异性。结论 本文提示 ,对直肠癌患者采用免疫治疗 。

从159例HBsAg、Anti-HBs的测定谈乙型肝炎免疫预防的必要性

目的 对 15 9份血清进行HBsAg ,Anti -HBs检测 ,并进一步分析乙型肝炎 (以下简称乙肝 )的预防。 方法 HBsAg ,Anti-HBs的测定用ELISA法。结果 HBsAg携带者为 13人 ,无免疫力者为 78人 ,Anti-HBs阳性 6 8人。结论 血清学测定HBsAg .Anti-HBs对于及早发现乙肝病毒携带者或易感者有准确的效果 ,对于乙肝的防治有较好的辅助作用。

抗菌肽的结构特点·作用机理及其应用前景

抗菌肽是一种广泛存在于生物界的抵抗病原微生物入侵的重要防御分子,是生物先天免疫的重要防御物质,不仅具有广谱抗菌活性和抗病毒、抗真菌、抗寄生虫及抗肿瘤等生物活性,还具有随物种适应环境而产生的结构多样性以及区别于传统抗生素杀菌机理的独特性,且不易产生耐药性,是一类极具潜力的肽类抗生素。抗菌肽对靶细胞表现出选择性,有助于设计出活性更高的新型肽类抗生素。从抗菌肽的作用机制、结构特点、新型抗菌肽分子设计、抗菌肽基因工程等方面阐述了抗菌肽研究的新进展。

脂多糖性肺损伤大鼠血清白细胞介素1β和白细胞介素8的变化及低剂量环磷酰胺的干预作用

目的:观察低剂量环磷酰胺对脂多糖性肺损伤模型大鼠血白细胞介素1β和白细胞介素8的影响,并与地塞米松进行阳性对照。方法:实验于2003-03/12在遵义医学院外科动物实验室、中心实验、病理实验室进行。取160只SD大鼠随机分为4组(n=40):环磷酰胺组、模型组、地塞米松组和生理盐水组。除生理盐水组外,其他3组大鼠采用腹腔注射内毒素脂多糖5mg/kg制作肺损伤模型。注射脂多糖后,环磷酰胺组立即腹腔注射1mL环磷酰胺(4mg/kg);地塞米松组腹腔注射1mL地塞米松(5mg/kg);模型组腹腔注射1mL生理盐水。生理盐水组腹腔注射生理盐水2mL。各组于模型制作后第1,4,6,8小时分别取10只采血,以ELISA法测血清中白细胞介素1β和白细胞介素8水平,且于第6小时留取肺组织进行肺组织的病理学光镜检查。结果:160只大鼠全部进入结果分析。①肺组织的病理学变化:模型组大鼠肺泡腔见大量出血及炎性细胞浸润,支气管上皮剥脱、水肿等,环磷酰胺组和地塞米松组也可见炎细胞浸润、肺萎陷现象,与模型组比较,明显减轻(P<0.05)。②白细胞介素1β水平:模型组、环磷酰胺组和地塞米松组脂多糖腹腔注射后1h已显著高于生理盐水组,6h达到峰值(P<0.05);环磷酰胺组和地塞米松组各时间点均低于模型组(P<0.05),但两组间差异不显著(P>0.05)。③白细胞介素8水平:模型组、环磷酰胺组和地塞米松组脂多糖腹腔注射后1h已显著高于生理盐水组,8h达到峰值(P<0.05);环磷酰胺组和地塞米松组各时间点均低于模型组(P<0.05),但两组间差异不显著(P>0.05)。结论:低剂量环磷酰胺与地塞米松一样具有明显的抗炎作用,能降低肺损伤大鼠血清白细胞介素1β和白细胞介素8水平,减轻其肺组织损害。

恶性血液病患者81例血清EPO、TPO的联合测定及意义

目的探讨恶性血液病患者血清红细胞生成素(EPO)、血小板生成素(TPO)水平与血红蛋白,红细胞数及血小板数的关系及其意义。方法采用夹心酶联免疫法测定81例恶性血液病患者及28例健康人血清EPO、TPO,同时检测其红细胞数、血红蛋白、血小板数。结果恶性血液病病人血清EPO水平较正常组显著增高,各组病人血清EPO水平均与Hb、RBC呈负相关。急性白血病、慢性白血病、淋巴瘤血清TPO水平高于正常组,多发性骨髓瘤血清TPO水平低于对照组;急性白血病、淋巴瘤TPO水平与PLT呈负相关,慢性白血病、多发性骨髓瘤TPO水平与PLT数不相关。结论恶性血液病血清EPO、TPO水平较正常明显增高,且与Hb,PLT呈负相关。对于某些恶性血液病病人的贫血、血小板减少,使用rhEPO、rhTPO治疗可能有效。

杜仲总黄酮对体外培养大鼠成骨细胞增殖的影响

目的通过观察杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞增殖的影响,筛选杜仲防治骨质疏松的药效成分。方法乙醇分段法提取杜仲皮中总黄酮,以25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml浓度分别加入新生Wistar大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用MTT法评价对成骨细胞增殖的影响。结果50、100μg/ml杜仲总黄酮剂量组的OD570吸光值明显增高,与对照组比较,差异显著(P<0.05)。结论杜仲总黄酮能直接促进体外成骨细胞的增殖。

RT-PCR法检测杜仲总黄酮对大鼠成骨细胞骨钙素表达的影响

目的了解杜仲总黄酮对新生大鼠颅盖骨体外培养成骨细胞骨钙素的mRNA表达的影响。方法杜仲总黄酮以10 g.mL-1、100 g.mL-1、200 g.mL-1浓度分别加入2d的SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用Realtime-PCR法检测对骨钙素mRNA的表达。结果与对照组相比,各实验浓度的杜仲总黄酮均能促进骨钙素mRNA的合成。结论杜仲总黄酮成分能直接促进体外成骨细胞中骨钙素mRNA的表达。

高校改革对实验室技术人员自身素质的要求

高校实验室技术人员是教学、科研队伍的一个重要组成部分。提高实验技术人员的自身素质 。

都柏林沙门氏菌metk基因克隆及原核表达

目的获取都柏林沙门氏菌metk基因编码s-腺苷甲硫氨酸合成酶His-tag融合蛋白,为基因工程生产s-腺苷甲硫氨酸创造条件。方法利用都柏林沙门氏菌metk基因特异引物,以都柏林沙门氏菌临床分离株的基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到该基因编码区,并构建原核表达重组质粒载体pET30a-metk,经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导融合蛋白表达,Ni2+-NTA柱纯化重组蛋白。结果经IPTG24℃诱导6h后,12%SDS-PAGE电泳检测表明诱导表达的融合蛋白占细菌总蛋白高达40%以上,重组蛋白分子量约为58.8kDa。结论成功构建His-METK融合蛋白原核表达载体,并高效表达、纯化、复性,为进一步利用该蛋白奠定了基础。

siRNA技术及其在乳腺癌治疗中的应用

乳腺癌是一种环境因素与遗传因素相互作用所致的一类疾病,其发生发展是一个多因素、多阶段的复杂过程,在基因水平它涉及众多基因的相互作用。正常细胞中的癌基因和原癌基因等的动态平衡维持着机体内细胞的适当数量和功能。

医学院及其附院空气细菌时空分布及空气质量评价

目的了解医学院及附属医院学生主要活动场所空气细菌的时空分布及空气质量,为学校环境卫生学评价提供依据。方法采用平板沉降法与初夏晴天对遵义医学院校园及附属医院空气中的细菌、霉菌和嗜血链球菌数进行检测。结果除校外马路露天餐饮点外,校园不同环境空气中平均细菌数都达到国家非污染空气的标准。附属医院门诊部和住院部大厅、研究生男生宿舍、图书馆机房和学生餐厅则属于普通空气;校外马路露天餐饮点属于重污染空气。学生宿舍、二餐厅霉菌数稍高于其他环境,以浴室的空气中霉菌数最多。各测试点的嗜血链球菌数均低于相关标准。结论校园空气细菌的时空分布与人员活动密切相关,人员密集地及呼吸带轻度污染,校外马路露天餐饮点属于重污染空气,应加强管理。校园空气总体处于较清洁水平。

一株产糖纤维素分解青霉的分离及发酵条件优化

从云贵高原地区次生林朽木中分离得到1株具有较高纤维素分解活性的青霉,PCR扩增18srDNA结果显示该菌属青霉。2%纤维素羧甲基纤维素钠、滤纸、脱脂棉、玉米叶等底物发酵结果表明该酶系具有较强的分解纤维素能力,不同温度下培养,粗酶活变化较大,以29℃最佳。

遵义市部分人群中EB病毒壳抗原抗体分布调查

研究EB病毒在正常人群中存在的状态及其抗体的动态分布,是病毒和宿主相互关系的重要课题之一。大量文献已证实在鼻咽癌(NPC)高发区人群中普遍感染EB病毒。EB病毒壳抗原IgA抗体(VCA/IgA)

结直肠癌相关基因k-ras表达定量分析

目的研究直肠癌相关基因表达变化情况,寻找与直肠癌发生相关的分子标记物。方法收集30例直肠癌病人的基础资料及直肠癌切除组织和癌旁正常组织,分别提取总RNA,以GAPDH为内参,利用实时定量PCR技术分析k-ras基因表达水平。结果与癌旁正常组织相比,k-ras的mRNA表达水平分别升高1.87倍～4.29倍。结论与癌旁正常组织相比,直肠癌组织k-ras表达水平升高,直肠癌发展不同时期该基因的表达量不一致。

杂交瘤细胞短期保存方法

单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立,包括有大量的细胞冻存工作。免疫脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,将用各种敏感的检测方法来获得阳性的杂交瘤细胞克隆,然后再次克隆化。一株产生特异性的单克隆抗体细胞,往往要从众多的初次阳性克隆细胞中反复筛选。为了保持功能上稳定的杂交瘤细胞系,防止污染或其它原因丢失而绝种,在克隆化培养前应对每株阳性的杂交瘤细胞分几份冻存,一但培养成功。