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巴马香猪VRTN基因克隆、表达及其多态性与繁殖性状的关联分析 被引量:8
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作者 莫家远 高九昱 +5 位作者 孙乐 黄叶 奉玲丽 瞿秋红 梁晶 兰干球 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1007-1018,共12页
旨在研究VRTN(vertebrae development homolog)基因在巴马香猪群体中的编码区序列特征、组织表达情况、脊椎数性状因果突变位点ins291的等位基因频率及其与乳头数和产仔数性状的关联。本研究采集3头0日龄巴马香猪组织,利用cDNA克隆技术... 旨在研究VRTN(vertebrae development homolog)基因在巴马香猪群体中的编码区序列特征、组织表达情况、脊椎数性状因果突变位点ins291的等位基因频率及其与乳头数和产仔数性状的关联。本研究采集3头0日龄巴马香猪组织,利用cDNA克隆技术获得VRTN基因编码区全长序列并进行生物信息学分析,利用荧光定量PCR技术检测VRTN在心、肝、脾、肺、肾、背最长肌和皮下脂肪组织中的表达情况;采集279头经产巴马香猪母猪血液,检测ins291位点在该群体中的频率分布,并与乳头数、产仔数性状进行关联分析。结果表明,巴马香猪VRTN基因编码区全长2 097 bp,其编码的氨基酸序列在不同物种间存在大量保守区域;VRTN基因编码698个氨基酸,预测为亲水性蛋白质,存在1个螺旋转角螺旋域超家族结构功能区、2个低复杂度区域和2个内部重复结构,并与核受体辅抑制子1(NR6A1)、果蝇同源框基因Prospero的脊椎动物同源蛋白2(PROX2)和富亮氨酸重复序列74亚基(LRRC74A)等蛋白具有相互作用;VRTN基因在0日龄巴马香猪各组织中均有表达,其中在背最长肌组织中表达量最高;巴马香猪保种群体中VRTN基因有利突变位点ins291的等位基因频率为21.15%,不同基因型个体之间平均产仔数、总乳头数、左侧乳头数、右侧乳头数和单侧最大乳头数性状均无显著差异(P>0.05),但纯合突变型(ins/ins)个体的乳头数性状均高于其他基因型个体。结果提示,在巴马香猪产业化生产中可通过分子育种手段提高VRTN ins291有利等位基因频率,但不影响其产仔数性状。 展开更多
关键词 巴马香猪 VRTN基因 关联分析 乳头数 产仔数
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广西地方猪群体遗传结构、选择信号分析和ROH检测 被引量:10
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作者 莫家远 李月月 +8 位作者 路玉洁 史良玉 刘笑笑 陈奎蓉 綦文晶 朱思燃 奉玲丽 梁晶 兰干球 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第S01期206-213,共8页
为深入挖掘广西地方猪种的种质特性相关基因,用50K芯片对巴马香猪和隆林猪进行了基因分型,并下载了陆川猪、东山猪、杜洛克、长白猪和大白猪的60K芯片数据,将数据整合后通过多种软件进行群体遗传结构分析、选择信号分析和ROH检测,并对... 为深入挖掘广西地方猪种的种质特性相关基因,用50K芯片对巴马香猪和隆林猪进行了基因分型,并下载了陆川猪、东山猪、杜洛克、长白猪和大白猪的60K芯片数据,将数据整合后通过多种软件进行群体遗传结构分析、选择信号分析和ROH检测,并对相关位点和区域进行了基因定位与富集分析。结果显示:隆林猪近交程度最低但可能已经受西方商业猪种血液入侵,血统不纯;陆川猪近交程度最高,且与东山猪在遗传距离和亲缘关系上都比较近;去除隆林猪后,共有435个位点受到了选择,以50 kb作为受选择区域共定位到了175个基因,参与了31条信号通路,其中分别有5、9、7、9、1个基因与脂肪、糖尿病或胰岛功能、免疫、繁殖、热应激相关;广西地方猪种共检测到4491个ROH区域,高频ROH区域主要位于1、4、7、14号染色体,共定位到了48个基因,参与8条信号通路,其中4、3、2个基因分别与免疫、繁殖和肉质相关,4号染色体还存在一个区域被7个品种同时定位,包含的DECR1基因可能与广西地方猪种的独特肉质性状有关。本研究结论为广西地方品种中有DECR1、TNNC1和MTCH2等基因与肉质相关;IL12A、BCL11B和TLR9等基因与免疫功能相关;GNRHR、RBBP4和ALAS1等基因与繁殖性状相关;该结论为广西地方猪种种质资源开发、利用提供了重要理论依据。 展开更多
关键词 广西地方品种 商业猪种 群体遗传结构 选择信号 ROH
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巴马香猪产活仔数性状全基因组关联分析 被引量:5
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作者 莫家远 高九昱 +9 位作者 奉玲丽 李月月 田威龙 刘笑笑 程锋 梁靓 雷树桥 文蔚 梁晶 兰干球 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第12期3965-3975,共11页
为寻找与巴马香猪产活仔数相关的分子标记,试验利用全基因组关联分析(GWAS)定位并筛选了影响产活仔数性状的候选基因,采集297头具有多胎产仔记录的巴马香猪耳组织样品,提取DNA并利用猪50K SNP芯片进行基因分型,分型结果经质控与基因型... 为寻找与巴马香猪产活仔数相关的分子标记,试验利用全基因组关联分析(GWAS)定位并筛选了影响产活仔数性状的候选基因,采集297头具有多胎产仔记录的巴马香猪耳组织样品,提取DNA并利用猪50K SNP芯片进行基因分型,分型结果经质控与基因型填充后,使用Tassel软件对巴马香猪产活仔数性状进行全基因组关联分析。结果显示,巴马香猪平均窝产活仔数在1~9胎内随着胎次增加逐渐升高;经质控过滤后共获得32816个SNPs位点,利用全基因组关联分析共筛选到8个与巴马香猪产活仔数相关的SNPs位点,分别在基因组或染色体水平达到显著;对关联显著SNP位点上下游500 kb内的编码基因进行富集分析,并依据猪繁殖性状相关QTL区域及基因功能,最终筛选到4个基因(CAPZB、MSH3、CITED2和HSD17B7)作为影响巴马香猪产活仔数的候选基因。 展开更多
关键词 巴马香猪 产活仔数 全基因组关联分析(GWAS) 候选基因 芯片
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不同采样量、保存时间和温度对猪血常规测定结果的影响 被引量:3
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作者 莫家远 高九昱 +5 位作者 张琰芳 赵铭伟 黄叶 奉玲丽 梁晶 兰干球 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第11期57-62,共6页
为了提高猪血常规测定结果的准确性,试验采集6头广西巴马小型猪血液,利用全自动血细胞分析仪测定并分析了采血量、冷藏保存时间、冷冻温度对猪血常规测定结果的影响。结果表明:采血量较大(3 mL左右)时血常规测定结果的稳定性更差;血样... 为了提高猪血常规测定结果的准确性,试验采集6头广西巴马小型猪血液,利用全自动血细胞分析仪测定并分析了采血量、冷藏保存时间、冷冻温度对猪血常规测定结果的影响。结果表明:采血量较大(3 mL左右)时血常规测定结果的稳定性更差;血样采集后在4℃保存4 h内测定对血常规指标没有显著影响,8 h以后测定对白细胞指标有显著影响;-20℃、-40℃、-80℃冷冻后测定血常规均会对大多数指标有极显著影响;液氮冷冻30 min对猪血液红细胞总数、血红蛋白浓度、血红蛋白含量、血小板总数等指标没有显著影响。说明测定猪血常规应采集较少量(1 mL左右)血液于4℃保存并于4 h内完成测定。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 血常规指标 采血量 保存温度 保存时间
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胎次与公猪对巴马香猪产仔数影响及产仔数统计对样本量要求的研究 被引量:1
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作者 莫家远 高九昱 +7 位作者 赵铭伟 奉玲丽 黄叶 陈奎蓉 吕冬玲 张琰芳 梁晶 兰干球 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期63-69,共7页
为研究胎次与公猪对巴马香猪产仔数的影响并分析产仔数统计对样本量的要求,本实验采集了989头巴马香猪历年产仔数,使用Excel、R语言和SPSS19.0分析巴马香猪1~11胎产仔数Person相关系数、各胎次之间的影响差异,并选取159头9胎以上母猪进... 为研究胎次与公猪对巴马香猪产仔数的影响并分析产仔数统计对样本量的要求,本实验采集了989头巴马香猪历年产仔数,使用Excel、R语言和SPSS19.0分析巴马香猪1~11胎产仔数Person相关系数、各胎次之间的影响差异,并选取159头9胎以上母猪进行可靠性分析;分析巴马香猪公猪与杜洛克公猪对巴马香猪产仔数的影响差异;使用C#编写了Exceltools2.0软件对753头母猪平均产仔数进行以10%样本量为梯度的1~100次随机抽样,计算其变异系数。结果显示:巴马香猪平均产仔数为9.36±2.09头,对胎次的回归方程为Y=8.637+0.167X;第1~9胎产仔数大多相互呈中低度相关,6胎以内相邻胎次之间Person相关系数比更远的胎次间更大;产仔数随胎次增加升高,到8、9胎最高,第1胎的产仔数极显著低于其他胎次;与杜洛克公猪交配能极显著提高巴马香猪的平均产仔数;159头9胎以上母猪与753头母猪各胎次分析结果一致,第2~11胎的平均产仔数与第1~11胎和第3~11胎差异均不显著;抽取1次使变异系数达到1%以下需要的样本量为10%,抽取1次使变异系数达到1‰以下需要的样本量为70%。综上,巴马香猪母猪的可使用年限比其他猪种更长;可以使用第2~11胎平均产仔数作为总平均产仔数或者该品种的平均产仔数;随机抽取70%的母猪计算其平均产仔数准确度极高。 展开更多
关键词 巴马香猪 产仔数 胎次 样本量 变异系数
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巴马香猪回肠、结肠消化特征研究
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作者 莫家远 路玉洁 +7 位作者 綦文晶 朱思燃 奉玲丽 高九昱 梁靓 王晖 兰干球 梁晶 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期4342-4352,共11页
本试验旨在研究巴马香猪回肠、结肠的消化特征。采集了9头成年巴马香猪母猪回肠和结肠内容物,通过超高压液相色谱-串联质谱技术进行质谱检测。使用Compound Discover 3.1软件进行代谢物检测,SMICA-P软件和SPSS 19.0软件进行极显著差异... 本试验旨在研究巴马香猪回肠、结肠的消化特征。采集了9头成年巴马香猪母猪回肠和结肠内容物,通过超高压液相色谱-串联质谱技术进行质谱检测。使用Compound Discover 3.1软件进行代谢物检测,SMICA-P软件和SPSS 19.0软件进行极显著差异代谢物筛选,MetaboAnalyst 5.0、HMDB和KEGG网站进行代谢物性质和代谢途径分析。结果表明:本研究正、负离子模式分别获得了26119和16265个质谱峰,分别匹配了6403和1912种代谢物;无监督主成分分析中模型对X变量的解释率超过0.6,且9个质量控制样本均集中分布在中心点;监督正交偏最小二乘判别分析中模型对Y变量的解释率和模型预测能力均超过为0.93;200次迭代验证的模型回归直线截距均小于0.05;共检测到42种极显著差异代谢物,其中10个极显著差异代谢物与胆汁酸类物质有关,6个差异代谢物为氨基酸;14种差异代谢物参与了19条代谢途径;胆汁酸类物质在回肠内容物中含量比结肠高90~20574倍,氨基酸类物质含量在回肠内容物中比结肠高5~21倍,十二烷二酸和3-甲基二氧吲哚含量在结肠内容物中比回肠高约1000倍。结果提示,高胆汁酸和高氨基酸吸收效率是回肠的消化特征;高微生物代谢产物是结肠消化特征。 展开更多
关键词 巴马香猪 肠道内容物 代谢组学 胆汁酸 氨基酸 微生物
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不同来源大白猪总产仔数近交衰退评估 被引量:7
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作者 史良玉 王立刚 +4 位作者 张鹏飞 莫家远 李洋 王立贤 赵福平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2772-2782,共11页
旨在评估两个不同来源大白猪群体经过近8个世代的选育后总产仔数(total number of piglets born,TNB)近交衰退的程度。本研究对1937头大白猪使用GeneSeek GGP Porcine HD芯片进行分型,其中1039头来自加系大白猪和898头来自法系大白猪,... 旨在评估两个不同来源大白猪群体经过近8个世代的选育后总产仔数(total number of piglets born,TNB)近交衰退的程度。本研究对1937头大白猪使用GeneSeek GGP Porcine HD芯片进行分型,其中1039头来自加系大白猪和898头来自法系大白猪,且两品系均有表型记录和系谱记录,系谱共由3086头大白猪组成。分别使用系谱、SNP和ROH进行个体近交系数估计,并将近交系数作为协变量利用动物模型对总产仔数进行近交衰退评估。为了精准定位导致总产仔数衰退的基因组片段,又进一步对每条染色体以及显著染色体分段计算近交系数并估计其效应,检测是否能引起总产仔数发生近交衰退现象。对于加系群体,FROH、FGRM和FPED估计的近交系数均值分别为0.124、0.042和0.013,其中FROH和FPED相关最高,相关系数为0.358;对于法系群体,FROH、FGRM和FPED均值分别为0.123、0.052和0.007,其中FROH和FGRM相关最高,相关系数为0.371。利用3种不同计算方法所得近交系数用于估计近交衰退时,加系群体的总产仔数均检测到显著的近交衰退,而且当FROH、FGRM和FPED每增加10%时,总产仔数分别减少0.571、0.341和0.823头;但法系群体仅有FROH估计的总产仔数检测到显著近交衰退,FROH每增加10%时,总产仔数减少0.690头。为了锁定相关的染色体和基因组区段,首先利用ROH估计每条染色体近交系数并进行近交衰退分析发现,加系群体中检测到第6、7、8和13号染色体产生了显著近的总产仔数交衰退,而法系群体未检测到与近交衰退相关的染色体。然后,又将与加系总产仔数近交衰退显著相关的4条染色体平均分为2、4、6、8个片段进行近交衰退检测,其中平均分成8段后的染色片段的长度范围为15.1~25.8 Mb。在第6、7和8号染色体分别检测到1、2和3个与总产仔数相关的近交衰退染色体片段。这些区域注释到了CUL7、MAPK14和PPARD基因与胎盘发育相关,AREG和EREG基因与卵母细胞成熟有关。本研究利用3种近交系数计算方法对两个不同来源的大白猪总产仔数进行近交衰退评估,在加系大白猪中3种估计方法都能检测到近交衰退的现象,而法系群体中只有FROH才能检测到。而且通过ROH方法进一步确定了能引起加系大白猪总产仔数衰退的4条染色体和6个特定的染色体区段,还注释到了与繁殖相关的候选基因。这为揭示近交衰退的遗传机制提供了新的研究手段,也为基因组选种选配提供了参考依据。 展开更多
关键词 大白猪 总产仔数 连续纯合片段 近交系数 近交衰退
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鞣花酸对断奶仔猪小肠黏膜形态及肠黏膜屏障功能的影响 被引量:18
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作者 赵铭伟 奉玲丽 +5 位作者 张琰芳 莫家远 高九昱 司景磊 梁晶 兰干球 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第21期126-130,135,177,共7页
鞣花酸是一种广泛存在于各种软果、坚果植物组织中的天然多酚类成分。为了研究鞣花酸对生长发育阶段猪肠道屏障及肠道免疫功能的影响,试验选取30日龄断奶的健康二元(L×Y)杂交仔猪60头,随机分为试验组和对照组,对照组仔猪饲喂基础日... 鞣花酸是一种广泛存在于各种软果、坚果植物组织中的天然多酚类成分。为了研究鞣花酸对生长发育阶段猪肠道屏障及肠道免疫功能的影响,试验选取30日龄断奶的健康二元(L×Y)杂交仔猪60头,随机分为试验组和对照组,对照组仔猪饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加鞣花酸(含量为90%)500 g/t,饲喂40 d,比较对照组与试验组仔猪的生长情况、血清中二胺氧化酶(DAO)活性、仔猪肠道绒毛高度及隐窝深度、肠道黏膜中炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素6(IL-6)]、紧密连接蛋白[闭锁连接蛋白1(ZO-1),咬合蛋白(Occludin)]基因的表达情况。结果表明:试验组仔猪的平均日增重显著高于对照组仔猪(P<0.05),空肠和回肠绒毛高度显著高于对照组(P<0.05),空肠隐窝深度显著低于对照组(P<0.05),血清中DAO活性显著低于对照组(P<0.05)。试验组仔猪空肠黏膜中ZO-1的mRNA表达量极显著高于对照组(P<0.01),TNF-α的mRNA表达量极显著低于对照组(P<0.01),IL-6的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05);试验组仔猪回肠中Occludin的mRNA表达量极显著高于对照组(P<0.01),IL-6的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05)。说明鞣花酸能够提升仔猪的生长性能,降低血清中DAO的活性,增加小肠绒毛高度,降低隐窝深度,提高仔猪小肠黏膜中紧密连接蛋白相关基因的表达,同时降低仔猪炎症相关基因的表达,总体上提高了仔猪小肠的健康状态,减少了仔猪肠道炎症反应。 展开更多
关键词 鞣花酸 肠黏膜形态 黏膜屏障 断奶仔猪 免疫功能
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猪不同生长阶段肠道微生物组的变化及其影响因素 被引量:11
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作者 田威龙 李月月 +10 位作者 吕冬玲 刘笑笑 梁靓 程锋 陈奎蓉 莫家远 高九昱 司景磊 奉玲丽 兰干球 梁晶 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第2期509-515,共7页
肠道是机体重要的消化与免疫器官,维持肠道健康对猪的生长发育和疾病预防具有十分重要的意义。高通量测序技术的发展极大地促进了人们对肠道微生物功能的认知,猪肠道微生物组的研究正逐步成为热点。目前,尽管对某一生长阶段猪的肠道微... 肠道是机体重要的消化与免疫器官,维持肠道健康对猪的生长发育和疾病预防具有十分重要的意义。高通量测序技术的发展极大地促进了人们对肠道微生物功能的认知,猪肠道微生物组的研究正逐步成为热点。目前,尽管对某一生长阶段猪的肠道微生物组已有较为深入的理解,但仍缺乏有关商品猪整个生命周期范围内肠道微生物组动态变化的全面纵向研究。而从出生到出栏,猪在整个生长周期内的肠道微生物组并不是一成不变的,是一个动态的发育过程。作者综述了猪哺乳期、断奶期、育肥期和妊娠期等从出生到育肥过程中不同阶段肠道微生物组的纵向变化及其主要影响因素:一方面,肠道微生物群落结构的显著变化主要发生在断奶期;另一方面,虽然肠道微生物组成随着时间始终在不断变化,但仍有一部分优势菌是一直存在的,这部分优势菌被称为核心菌群,而只在特定时期才出现的菌只是胃肠道中的“过客”,也最易受外界因素影响。肠道微生物组与多种因素相关,如年龄、饮食、环境、抗生素使用等,其中饮食对塑造肠道微生物起到至关重要的作用。本文可为理解猪在不同生长发育阶段肠道微生物的动态变化规律及改善猪生长性能和健康水平的微生物技术手段提供理论参考。 展开更多
关键词 肠道微生物 微生物组 生长阶段
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高脂高糖饮食对小型猪肠道微生物的影响 被引量:7
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作者 田威龙 司景磊 +11 位作者 刘笑笑 綦文晶 陈奎蓉 程锋 李月月 吕冬玲 梁靓 高九昱 奉玲丽 莫家远 兰干球 梁晶 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1143-1153,共11页
高能饮食是肥胖发生的重要诱因之一,肠道微生物在其中发挥重要作用。为探究高脂高糖饮食过程中肠道微生物组成的动态变化并筛选与肥胖发展密切相关的肠道微生物,本研究以广西巴马小型猪为动物模型,随机分为普通饮食组(CN组)和高脂高糖... 高能饮食是肥胖发生的重要诱因之一,肠道微生物在其中发挥重要作用。为探究高脂高糖饮食过程中肠道微生物组成的动态变化并筛选与肥胖发展密切相关的肠道微生物,本研究以广西巴马小型猪为动物模型,随机分为普通饮食组(CN组)和高脂高糖饮食组(HFD组),进行为期30 d的饮食干预,分别在干预0、7、15和30 d时收集粪便样品,利用16S rRNA基因测序技术分析高脂高糖饮食对广西巴马小型猪肠道微生物组成、结构和功能的影响。结果显示:HFD组个体肠道微生物的多样性普遍低于CN组,高脂高糖饮食改变了小型猪肠道微生物的结构;随着高脂高糖饮食干预时间的增加,观察到了肠道微生物组的总体变化趋势:在门水平,HFD组个体肠道微生物中Firmicutes丰度增加而Bacteroidetes丰度逐渐下降;在属水平,HFD组中Lactobacillus丰度逐渐减少而Ruminococcus丰度则不断升高;CN组和HFD组之间存在一些显著差异的肠道微生物,其中g__Lactobacillus、g__norank_f__p_251_o5和g__unclassified_c__Bacilli等12个菌群在CN组显著富集,g__Peptococcus、g__Collinsella和g__Senegalimassilia等8个菌群在HFD组显著富集,可能是与肥胖发生相关的潜在微生物;微生物功能预测分析发现,两组之间微生物功能无显著性差异,均主要富集在氨基酸的生物合成、淀粉与蔗糖的代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢以及糖酵解和糖异生等方面。本研究发现,高脂高糖饮食降低了肠道微生物的多样性,使微生物结构发生了改变,存在一定菌群失调的现象,发现了与肥胖发展密切相关的潜在微生物。 展开更多
关键词 小型猪 肥胖 高脂高糖饮食 肠道微生物
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几个中国地方猪群体遗传结构和产仔数性状选择信号分析 被引量:5
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作者 路玉洁 莫家远 +6 位作者 綦文晶 朱思燃 杨丽丽 刘巧玲 卜亚歌 兰干球 梁晶 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期360-369,共10页
旨在对几个中国地方猪品种进行群体遗传结构分析,并筛选与中国地方猪产仔数相关的基因组选择信号及候选基因。本研究下载了6个中国地方品种猪共计102头个体的Illumina PorcineSNP60芯片数据,构建了包括19头迪庆藏猪、16头明光小耳猪、1... 旨在对几个中国地方猪品种进行群体遗传结构分析,并筛选与中国地方猪产仔数相关的基因组选择信号及候选基因。本研究下载了6个中国地方品种猪共计102头个体的Illumina PorcineSNP60芯片数据,构建了包括19头迪庆藏猪、16头明光小耳猪、16头五指山猪在内的低产仔数组和包括11头姜曲海猪、20头蓝塘猪、20头梅山猪在内的高产仔数组,经质控和基因型填充后,使用软件进行亲缘关系分析、主成分分析、连锁不平衡衰减分析、群体遗传结构分析、进化树构建和选择信号分析,并对受选择位点进行基因定位和功能富集分析。对数据进行质控和基因型填充后共获得33285个SNPs位点,6个中国地方猪品种间个体的亲缘关系较远,品种内个体亲缘关系较近;6个群体的LD衰减速度都非常快,依次为梅山猪<蓝塘猪<姜曲海猪<明光小耳猪<五指山猪或迪庆藏猪;梅山猪群体内存在3个亲缘关系较高的小群体,明光小耳猪有部分个体与迪庆藏猪聚集在一起,各个猪种在进化树的距离与其地理距离较为一致。选择信号分析共筛选到176个受选择的SNPs位点,在其上、下游12.68 kb范围内共检测到66个候选基因,富集到6条信号通路。通过文献查阅发现5个可能与繁殖性状相关的基因,其中CHD7与生长发育迟缓和生殖器异常相关,FBXO43与繁殖力相关并且影响呈圆周运动的精子数量,RUNX1控制雌激素、雄激素和前列腺素的分泌,STRBP与卵巢发育有关,TEDDM1在附睾中特异性表达。CHD7、FBXO43、RUNX1、STRBP和TEDDM1基因可能作为中国地方猪产仔数性状的候选基因。 展开更多
关键词 群体遗传结构 产仔数 选择信号 SNP位点 候选基因
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广西巴马小型猪CTGF基因真核表达载体构建及其相关生物信息学分析 被引量:5
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作者 黄叶 吴延军 +7 位作者 朱思燃 奉玲丽 瞿秋红 江雨航 夏琴 崔悦悦 莫家远 兰干球 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期468-476,共9页
【目的】构建广西巴马小型猪结缔组织生长因子(CTGF)基因真核表达载体并鉴定其活性,为深入研究CTGF在癌症发生中的作用及其分子机制提供参考,也为构建CTGF转基因广西巴马小型猪及研发基于CTGF的癌症基因治疗策略提供理论依据。【方法】... 【目的】构建广西巴马小型猪结缔组织生长因子(CTGF)基因真核表达载体并鉴定其活性,为深入研究CTGF在癌症发生中的作用及其分子机制提供参考,也为构建CTGF转基因广西巴马小型猪及研发基于CTGF的癌症基因治疗策略提供理论依据。【方法】利用RT-PCR从广西巴马小型猪肝脏组织中克隆CTGF基因,并将CTGF基因亚克隆到p DsRed-N1载体上,然后通过脂质体转染小鼠Hep3B细胞,转染48 h后于荧光显微镜下观察细胞是否表达红色荧光蛋白,同时利用在线生物信息学软件对其理化性质进行分析。【结果】成功克隆获得广西巴马小型猪CTGF基因编码区(CDS)序列,序列全长1050 bp,共编码349个氨基酸,与NCBI上已公布普通猪参考序列的同源性为99.5%,有5处碱基突变,且均为同义突变。将广西巴马小型猪CTGF基因亚克隆到pDsRed-N1载体上成功构建了阅读框架正确的广西巴马小型猪CTGF基因真核表达载体,转染小鼠Hep3B细胞48 h后有红色荧光蛋白表达。广西巴马小型猪CTGF蛋白具有较强的亲水性,其二级结构中α-螺旋、β-折叠、延伸链和无规则卷曲各占13.18%、5.73%、17.48%和63.61%。【结论】广西巴马小型猪CTGF基因在进化过程中的保守性非常稳定,通过构建的真核表达载体能转染小鼠Hep3B细胞并成功表达,可用于生产转基因广西巴马小型猪及研发与CTGF基因有关的疾病模型。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 CTGF基因 小鼠Hep3B细胞 脂质体转染 生物信息学
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基于16S rRNA测序揭示杜洛克猪早期体重与肠道微生物的关系 被引量:6
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作者 司景磊 黄叶 +11 位作者 陈奎蓉 吕冬玲 程峰 田威龙 刘笑笑 梁靓 李月月 奉玲丽 高久昱 莫家远 梁晶 兰干球 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第1期190-199,共10页
本研究旨在探讨肠道微生物与杜洛克猪早期体重的关系。从91头80日龄杜洛克公猪中根据个体体重排序选择体重较轻(lighter body weight,LBW)的9头猪和体重较重(heavier body weight,HBW)的9头猪。通过对16S rRNA基因V3-V4区测序,分析了HBW... 本研究旨在探讨肠道微生物与杜洛克猪早期体重的关系。从91头80日龄杜洛克公猪中根据个体体重排序选择体重较轻(lighter body weight,LBW)的9头猪和体重较重(heavier body weight,HBW)的9头猪。通过对16S rRNA基因V3-V4区测序,分析了HBW和LBW组猪粪便中微生物多样性、组成和预测功能。结果显示,HBW和LBW组之间微生物的Alpha多样性无显著差异(P>0.05)。杜洛克仔猪肠道微生物的核心菌门为厚壁菌门(HBW和LBW组分别为65.62%和66.57%)和拟杆菌门(HBW和LBW组分别为30.87%和29.80%),核心菌属为普雷沃菌属(HBW和LBW组分别为23.82%和20.84%)、乳杆菌属(HBW和LBW组分别为9.11%和16.55%)、未分类的瘤胃菌科(HBW和LBW组分别为10.32%和9.98%)和未分类的毛螺菌科(HBW和LBW组分别为6.33%和4.53%)。PCoA分析显示,肠道微生物在杜洛克仔猪个体之间差异较小,但两组间在微生物组成上存在一些显著差异的菌属。在属水平上,HBW组猪中北里孢菌属、g_norank_o_Tremblayales、未命名的丹毒丝菌属、未分类的普雷沃氏菌科和粪芽孢菌属的丰度显著高于LBW组(P<0.05),棒状杆菌属在LBW组中的丰度显著高于HBW组(P<0.05)。此外,KEGG通路差异分析发现,倍半萜类化合物生物合成、胰岛素信号通路、抗坏血酸和醛酸代谢及安沙霉素类合成的途径显著富集于HBW组(P<0.05),分泌系统途径显著富集于LBW组(P<0.05)。本研究结果有助于理解猪早期肠道微生物与宿主间的相互作用和猪的健康养殖。 展开更多
关键词 肠道微生物 断奶仔猪 体重 16S rRNA测序
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利用中芯一号SNP芯片检测隆林猪全基因组拷贝数变异 被引量:4
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作者 路玉洁 莫家远 +8 位作者 朱思燃 杨丽丽 陈奎蓉 吕冬玲 李月月 刘笑笑 梁靓 兰干球 梁晶 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第1期23-31,共9页
【目的】检测隆林猪的全基因组拷贝数变异。【方法】采集33头隆林猪的耳组织样本,通过酚-氯仿法提取DNA后,使用猪中芯一号50K SNP芯片进行基因分型,得到的原始数据通过Genomestudio软件和Linux系统进行处理,使用CNVPartition和PennCNV... 【目的】检测隆林猪的全基因组拷贝数变异。【方法】采集33头隆林猪的耳组织样本,通过酚-氯仿法提取DNA后,使用猪中芯一号50K SNP芯片进行基因分型,得到的原始数据通过Genomestudio软件和Linux系统进行处理,使用CNVPartition和PennCNV软件分别检测拷贝数变异(copy number variation,CNV),并利用Bedtools软件将CNV合并为拷贝数变异区域(copy number variation region,CNVR),使用Biomart对CNVR进行基因定位,利用David网站对定位到的基因进行GO和KEGG富集分析,使用猪QTL数据库对共同CNVR进行QTL注释。【结果】CNVPartition软件共检测到260个CNVs,合并为47个CNVRs,其中缺失型40个、获得型5个、混合型2个,共定位到84个基因,显著富集到13条信号通路;PennCNV软件共检测到96个CNVs,合并为15个CNVRs,其中缺失型9个、获得型1个、混合型5个,共定位到8个基因,显著富集到8条信号通路;2个软件检测结果定位到的基因主要富集在嗅觉相关通路和G-蛋白偶联相关通路中,其中INPP5B、NEURL1和GAPDHS基因显著富集到精子活力通路;2个软件获得了3个共同CNVRs,其中缺失型、获得型和混合型均为1个,共定位到8个基因,显著富集到涉及嗅觉感官知觉的化学刺激检测通路、嗅觉受体活性通路、嗅觉转导通路、G-蛋白偶联受体活性通路、G-蛋白偶联受体信号通路、膜整体组件通路和质膜通路共7条信号通路;共有130个QTLs与3个共同CNVRs重叠,其中与背膘厚、肉质和乳头数相关的QTLs分别有11、9和6个。【结论】隆林猪CNV可能与嗅觉功能、繁殖性能、背膘厚、肉质和乳头数性状相关。 展开更多
关键词 隆林猪 猪中芯一号50K SNP芯片 拷贝数变异 拷贝数变异区域
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基于16S rRNA测序探究杜洛克猪饲料利用率与肠道菌群的关系 被引量:3
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作者 田威龙 司景磊 +8 位作者 莫家远 刘笑笑 程锋 吕冬玲 李月月 陈奎蓉 梁靓 兰干球 梁晶 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期146-153,共8页
为探究杜洛克猪饲料利用率与肠道菌群的关系,本研究计算了91头杜洛克公猪30~100 kg的校正饲料转化率(FCR),选择FCR数值最高和最低各10头猪分别作为HFCR组和LFCR组,采用微生物16S rRNA基因测序技术分析两组间肠道微生物多样性、组成与结... 为探究杜洛克猪饲料利用率与肠道菌群的关系,本研究计算了91头杜洛克公猪30~100 kg的校正饲料转化率(FCR),选择FCR数值最高和最低各10头猪分别作为HFCR组和LFCR组,采用微生物16S rRNA基因测序技术分析两组间肠道微生物多样性、组成与结构差异,并对差异微生物功能进行预测。结果显示:两组间肠道微生物在总体Alpha多样性指标上无显著性差异,但在微生物组成上存在多个显著差异的菌属;Fimicutes和Bacteroidetes为杜洛克猪的优势菌门,Prevotella、norank_f_Ruminococcaceae和Lactobacillus是主要的优势菌属;在门水平上,HFCR组WPS-2的丰度显著高于LFCR组;在属水平上,HFCR组个体中unclassified_f_Ruminococcaceae、unclassified_o_Bacteroidales、norank_p_WPS-2和rc4-4的丰度显著高于LFCR组,Collinsella、norank_f_Enterobacteriaceae、Staphylococcus、1-68和norank_o__Streptophyta的丰度显著低于LFCR组。KEGG分析发现,LFCR组和HFCR组肠道菌群基因主要富集在Amino sugar and nucleotide sugar metabolism、Purine metabolism、Glycolysis/Gluconeogenesis和Pyrimidine metabolism等功能通路,但在两组间并无显著差异。本研究结果为利用肠道微生物提高猪的饲料利用率提供了一定的参考和数据基础。 展开更多
关键词 杜洛克 饲料利用率 肠道微生物
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不同乳蛋白水平中国荷斯坦奶牛DHI指标及其与月份间的相关性分析 被引量:1
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作者 梁靓 陈奎蓉 +7 位作者 程锋 田威龙 刘笑笑 李月月 吕冬玲 莫家远 兰干球 梁晶 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第11期63-68,152,共7页
为了明确不同乳蛋白水平中国荷斯坦奶牛乳蛋白含量与奶牛性能测定体系(dairy herd improvement, DHI)指标的相关性,以及乳蛋白水平与月份之间的关系,试验对黑龙江省某牧场中600头中国荷斯坦奶牛进行DHI数据测定,以DHI数据为基础分成低... 为了明确不同乳蛋白水平中国荷斯坦奶牛乳蛋白含量与奶牛性能测定体系(dairy herd improvement, DHI)指标的相关性,以及乳蛋白水平与月份之间的关系,试验对黑龙江省某牧场中600头中国荷斯坦奶牛进行DHI数据测定,以DHI数据为基础分成低水平组(乳蛋白含量≤3.3%)、正常水平组(乳蛋白含量>3.3%~≤3.7%)和高水平组(乳蛋白含量>3.7%),通过SPSS 22.0软件和桑基图对组间、组内、单项数据以及外界温度(不同月份)进行相关性分析。结果表明:不同乳蛋白水平中国荷斯坦奶牛的乳蛋白含量、产奶量、乳脂率、乳糖率和尿素氮含量间均存在极显著差异(P<0.01)。3组奶牛的乳蛋白含量均与产奶量和乳糖率呈极显著负相关(P<0.01),与乳脂率呈极显著正相关(P<0.01);产奶量与乳脂率呈极显著负相关(P<0.01),与乳糖率呈极显著正相关(P<0.01);乳脂率与乳糖率呈极显著负相关(P<0.01),与尿素氮含量呈极显著正相关(P<0.01);乳糖率与尿素氮含量呈显著或极显著正相关(P<0.05或P<0.01),与体细胞数呈极显著负相关(P<0.01)。在寒冷月份(2018年11月份—2019年2月份)中,高乳蛋白水平奶牛在试验奶牛群体中占比相对较高,为75.69%~89.24%;在温度较高的月份2018年7—9月份中占比相对较低,为49.62%~62.26%。说明乳蛋白含量与产奶量、乳糖率、乳脂率均极显著相关,外界温度对中国荷斯坦奶牛乳蛋白含量具有明显影响。 展开更多
关键词 奶牛 奶牛性能测定体系 乳蛋白 产奶量 乳糖率 乳脂率
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小型猪2型糖尿病模型肠道微生物分析 被引量:1
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作者 田威龙 綦文晶 +11 位作者 刘笑笑 司景磊 陈奎蓉 程锋 李月月 吕冬玲 梁靓 高九昱 奉玲丽 莫家远 兰干球 梁晶 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期768-776,共9页
目的近期研究证据表明,肠道微生物与2型糖尿病(T2DM)等代谢性疾病有关,相关机制研究多以啮齿类动物为模型,而在更适合研究人类疾病的猪模型上却鲜有报道。方法为了探究小型猪T2DM模型中肠道微生物的组成和结构的变化,本研究以广西巴马... 目的近期研究证据表明,肠道微生物与2型糖尿病(T2DM)等代谢性疾病有关,相关机制研究多以啮齿类动物为模型,而在更适合研究人类疾病的猪模型上却鲜有报道。方法为了探究小型猪T2DM模型中肠道微生物的组成和结构的变化,本研究以广西巴马小型猪为动物模型,通过高脂高糖饮食诱导T2DM,建模成功后采集T2DM发病组(T2DM组)和普通饮食饲喂的对照组(CN组)个体的新鲜粪便样品,采用16S rRNA基因测序技术进行肠道微生物组成与结构的比较分析。结果结果发现,T2DM组个体的肠道微生物的多样性发生了明显下降;在门水平上,与CN组相比,T2DM组厚壁菌门丰度显著增加(P<0.05),而拟杆菌门丰度下降;在属水平,PCoA分析发现CN组和T2DM组组成显著差异,T2DM组独有与产琥珀酸相关的光冈菌属,两组比较和LEfSe分析发现两组间存在多个显著性差异的菌属:颤螺旋菌属、普氏菌属和消化球菌属等在CN组显著富集,g;ntestinibacter在T2DM组中显著富集;功能预测未发现两组存在显著差异的代谢通路,两组均主要富集在氨基酸的生物合成、碳新陈代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢以及糖酵解和糖异生等方面。结论本研究发现了2型糖尿病小型猪肠道微生物的变化特征和与糖尿病发生密切关联的潜在微生物,为研究肠道微生物与2型糖尿病的关联及其作用机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 小型猪 糖尿病 肠道微生物
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16S rRNA测序揭示猪日增重与肠道微生物的关系 被引量:1
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作者 吕冬玲 司景磊 +5 位作者 莫家远 李月月 田威龙 刘笑笑 梁晶 兰干球 《畜牧与兽医》 北大核心 2021年第9期9-15,共7页
为了探讨杜洛克公猪肠道微生物菌群与日增重的关系,根据91头杜洛克公猪平均日增重的高低,选择极端高低组各10头分为低组(LADG)和高组(HADG),收集粪便,利用16S rRNA测序分析LADG和HADG 2组猪的粪便微生物多样性和组成,并对其功能进行预... 为了探讨杜洛克公猪肠道微生物菌群与日增重的关系,根据91头杜洛克公猪平均日增重的高低,选择极端高低组各10头分为低组(LADG)和高组(HADG),收集粪便,利用16S rRNA测序分析LADG和HADG 2组猪的粪便微生物多样性和组成,并对其功能进行预测。结果:2组的alpha多样性差异不显著(P>0.05);杜洛克猪的2个优势菌门是厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),优势菌属是普氏菌属(Prevotella)和乳酸菌属(Lactobacillus);LADG组中螺旋体门(Spirochaetes)、软壁菌门(Tenericutes)、WPS-2和疣微菌门(Verrucomicrobi)4个菌群的丰度要显著高于HADG组(P<0.05),HADG组中的巨球型菌(Megasphaere)、粪杆菌属(Faecalibacterium)和韦荣氏菌(unclassifiedfVeilionellacece)3个菌群的丰度显著高于LADG组;HADG组中的微生物在疾病代谢通路,如嘌呤代谢和核黄素代谢高度富集,LADG组微生物在分泌系统等通路高度富集。试验结果提示:HADG组可能有较高的代谢水平,LADG组的分泌系统可能更发达。本研究丰富了杜洛克猪的早期选种的理论依据,并为理解早期宿主与微生物的相互作用提供了帮助。 展开更多
关键词 16S rRNA 杜洛克 日增重 微生物多样性
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广西巴马小型猪BMP2基因克隆、生物信息学及组织表达分析
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作者 奉玲丽 司景磊 +7 位作者 莫家远 刘笑笑 田威龙 程锋 李月月 郭亚芬 梁晶 兰干球 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第7期2302-2312,共11页
本研究旨在对广西巴马小型猪骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)基因进行克隆及其结构和功能的预测,并检测其在广西巴马小型猪和长白猪中的表达差异。以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,通过测序鉴定BMP2基因外显子区... 本研究旨在对广西巴马小型猪骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic proteins 2,BMP2)基因进行克隆及其结构和功能的预测,并检测其在广西巴马小型猪和长白猪中的表达差异。以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,通过测序鉴定BMP2基因外显子区的单核苷酸多态性(SNPs),利用多种生物信息学软件对广西巴马小型猪BMP2基因启动子区、编码区(CDS)、3′UTR区进行了分析,预测分析广西巴马小型猪BMP2基因编码蛋白的基本理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、跨膜区域、亲疏水性、蛋白质修饰结构、二级结构和三级结构等,并对miRNA结合位点及其相关通路进行分析,绘制了广西巴马小型猪和长白猪的组织表达谱。结果显示,试验成功克隆了广西巴马小型猪BMP2基因CDS区,总共1188 bp,编码395个氨基酸;与猪参考基因组相比,广西巴马小型猪BMP2基因在G1663A、G1897C发生了同义突变,在C1896T(Pro→Leu)、T1971C(Gly→Ser)、G2000A(Leu→Ser)发生了3处错义突变;在3′UTR区域存在miR-142-5p、miR-129-5p等共13个miRNA结合区域;相似性比对结果显示,广西巴马小型猪与野猪、黄牛、水牛、山羊、绵羊、马、澳洲野犬、家犬、猕猴对应区段的相似性依次为99.92%、91.75%、91.84%、91.92%、91.92%、90.50%、89.43%、90.91%和90.91%;系统进化树结果表明,广西巴马小型猪与野猪的亲缘关系最近,与黄牛的亲缘关系相对较近,与猕猴亲缘关系较远;BMP2蛋白分子质量为44.55 ku,理论等电点为8.37,预测其有12个O-糖基化位点,42个磷酸化位点;预测分析发现该蛋白为亲水性蛋白,且是膜外蛋白。组织表达谱发现,广西巴马小型猪生长板软骨中BMP2基因表达量显著低于长白猪(P<0.05)。该研究为进一步探索广西巴马小型猪中BMP2基因的功能提供了理论基础,也为广西巴马小型猪品种资源的利用提供了重要参考。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 BMP2基因 生物信息学分析
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大白猪GABRR2基因SNP筛选及结构、功能的预测和分析
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作者 莫家远 高九昱 +4 位作者 吕冬玲 李月月 田威龙 梁晶 兰干球 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1471-1480,共10页
为了筛选大白猪GABRR2基因的SNP和对GABRR2基因进行结构、功能的预测和分析,本研究利用30头大白猪混池为模板,通过PCR扩增GABRR2基因外显子,测序后进行SNP筛选,并对测序结果进行拼接,利用多种生物信息学软件对大白猪GABRR2基因启动子区... 为了筛选大白猪GABRR2基因的SNP和对GABRR2基因进行结构、功能的预测和分析,本研究利用30头大白猪混池为模板,通过PCR扩增GABRR2基因外显子,测序后进行SNP筛选,并对测序结果进行拼接,利用多种生物信息学软件对大白猪GABRR2基因启动子区、编码区、3’UTR区进行了一系列的分析。结果显示,大白猪GABRR2基因在c615、c660、c798和c1134共有4个同义突变;RNGTT、SRSF12和ANKRD6 3个基因在GABRR2基因连锁区间内,且编码的蛋白具有相互作用;起始密码子上游2 000 bp区域在385~435号碱基和759~806号碱基区域有2个核心启动子区域,在核心启动子386~395、769~778有Sp1转录因子结合位点,757~766有CREB-2转录因子结合位点,775~784有NF-1转录因子结合位点,在1 593~1 752号碱基区间内有一个Cp G岛;3’UTR区域有14个miRNA结合位点,其中miR-365-3p、miR-497-5p、miR-5195-3p和miR-145-5p评分高于80。研究结果表明,大白猪GABRR2基因CDS区全长1 380 bp,存在4个同义突变,保守性高;编码一个具有4个跨膜结构、1个信号肽的亲水性蛋白,与RNGTT基因功能可能有密切联系;2个核心启动子区域内含有Sp1、CREB-2和NF-1三种共4个转录因子结合位点,且启动子区有一个特征的CpG岛;3’UTR区域存在miR-365-3p、miR-497-5p、miR-5195-3p和miR-145-5p共4个miRNA结合区域。 展开更多
关键词 大白猪 GABRR2基因 SNP 生物信息学分析
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