橡胶树不同品种抗寒性综合鉴定

采用室内人工模拟低温胁迫下鉴定品种寒害平均级、可溶性糖含量、自由水/束缚水比值、电解质渗出率、超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及田间鉴定品种寒害平均级等6个指标对31个橡胶树品种的抗寒性进行综合评价。结果表明,93-114、云研77-2、闽林71-22、热研7-18-55、热研2-14-39和五星I3等品种的抗寒性比较强,热研78-3-5、RRIC100、Tjly1和BPM24等品种的抗寒性比较弱。

橡胶树不同品种(系)抗寒性的室内鉴定

[目的]筛选抗寒性较强的橡胶品种,为橡胶的生产及抗寒育种提供理论依据。[方法]以93-114作为对照,通过室内鉴定法,用人工气候箱模拟辐射寒害,对国家橡胶种质资源圃的31个品种(系)橡胶芽条进行了抗寒性的室内鉴定。[结果]31个品种(系)中,抗寒性强的品种(系)有3个,占9.68%;抗寒性较强的品种有13个,占41.94%;抗寒性中等的品种有4个,占12.90%;抗寒性较弱的品种有6个,占19.35%;抗寒性弱的品种有5个,占16.13%。[结论]热研7-18-55、93-114、热研2-14-39芽条抗寒性最强,徐育3I、AN873、针选1(4)、五星I3、热研4、保亭3412、红山67-15、湛试496-1、闽林71-22、云研77-2、文昌7-35-11、南牛田1-1、热研88-13芽条抗寒性较强,BPM24、IAN2887、RRIC52、热研7-20-59、针选5芽条抗寒性最弱。

药用植物艾纳香基因组DNA提取方法研究

以药用植物艾纳香为研究对象,以-20℃保存、4℃保存、室温自然干燥和硅胶干燥四种样品保存方式,并采用SDS法、CTAB法、SDS-CTAB法和改良CTAB法4种不同的基因组DNA提取方法进行了对比试验,以期建立艾纳香的较好的样品保存方法和基因组DNA提取方法。结果表明,-20℃保存是艾纳香的较理想的样品保存方式;改良CTAB法是艾纳香基因组DNA提取较适宜的方法,该方法提取的DNA经紫外检测,其A_(260)/A_(280)为1.8左右,明显优于SDS法(1.1～1.5)、CTAB法(1.2～1.5)和SDS-CTAB法(1.4～1.6),琼脂糖凝胶电泳、酶切检测和PCR扩增也得出了同样的结论。

艾纳香野生种群克隆多样性及克隆结构研究

艾纳香是具有克隆生长习性的多年生宿根性草本植物,其广布于中国南部,为了更有效地保护和合理利用艾纳香资源,本文利用RAPD分子标记技术,对4个野生艾纳香种群进行了克隆结构和克隆多样性(单克隆种群或多克隆种群)进行了初步研究。结果表明:(1)10对10bp随机引物共检测到70条谱带,其中多态带为60条,占85.71%,检测到64个基因型,且全部为局限基因型;(2)与Ellstrand & Roose(1987)总结的克隆多样性平均值(PD=0.17,D=0.62)相比艾纳香的种群克隆多样性水平稍高,Simpson指数平均为0.973,基因型比率PD平均为0.800;(3)遗传一致度和遗传距离分析表明,4个艾纳香野生种群被分成两组,一组是海南的所有种群,另外一组是云南类群。

全员参与管理模式在生殖医学科医生中的应用价值

目的探究全员参与管理模式在生殖医学科医生中的应用效果。方法选择2020年11月—2022年12月武汉大学人民医院生殖医学中心在职医生25名,根据时间不同分为管理前(2020年11月—2021年11月)和管理后(2021年12月—2022年12月)两组,管理前执行传统管理模式,管理后执行全员参与管理模式,对比管理前后医生笔试得分、临床思维能力、工作投入度。结果管理后医生笔试得分成绩显著高于管理前,差异有统计学意义(P<0.05);管理后医生莱斯特评估表LAP评分显著高于管理前,差异有统计学意义(P<0.05);管理后医生工作投入量表UWES评分显著高于管理前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生殖医学科医生应用全员参与管理模式可显著提高其笔试成绩、改善临床思维能力以及工作投入度。

次氯酸钠在香蕉开放式组织培养中的应用研究

以"巴西"香蕉继代培养获得的分化芽为材料,将不同浓度的次氯酸钠溶液加入香蕉培养基中,确定次氯酸钠作为香蕉开放式组织培养抑菌剂的有效浓度,以及增殖、生根培养的最佳浓度。结果表明,次氯酸钠浓度在0.01%以上可有效抑制培养基的污染,0.01%～0.02%之间外植体的成活率最高;浓度为0.014%时,芽的增殖系数及生根率较高,分别为2.48%、83.0%。

植物组织培养课程教学方法探讨

植物组织培养课程是我校农学、园艺和生物技术等本科专业的一门专业选修课。我们采取针对地域特点和目前此类教材的缺点编写适合的教材,制做和购买多媒体课件和光盘辅助课堂教学,合理安排实验课时和实验种类,参观和考察组培企业等措施,极大地提高了这门课程的教学效果。

“植物细胞工程”课程教材建设与教改实践

植物细胞工程(或植物组织培养)是植物生物技术的基础,在许多综合性大学的生命科学学院及农林院校都作为一门重要的专业课或专业基础课程。本文介绍了统编教材《植物细胞工程简明教程》的内容体系和编写特色,并介绍了华南热带农业大学农学院生物技术系在植物细胞工程和植物组织培养课程面向立体化和开放式教学方面的教改实践。

农学专业创新性实践教学体系的探索与建立

对海南大学农学专业创新性实践教学体系的探索和建立进行论述,内容包括设置创新性实践教学环节和模式、加强实践教学基地建设及贯彻“以能力培养为中心、以创新为导向”的实践教学理念。

组培工厂及植物组织培养实验室的安全管理

本文对组培工厂及植物组织培养实验室中几种主要危险源如高温高压灭菌锅,紫外线、甲醛和高锰酸钾、新洁尔灭(苯所溴铵溶液)等用于实验室消毒的常规消毒剂,次氯酸盐和氯化汞等用于外植体表面消毒的消毒剂,以及各种原因产生的火险进行了分析,并提出相关的注意事项和管理措施。

药用植物田基黄的组织培养与快速繁殖

以田基黄为材料,应用组织培养和快速繁殖技术,对适于活血丹增殖分化的培养基、培养方式进行了系统的研究。试验是以田基黄的茎尖为外植体,采用MS为基本培养基,附加不同植物生长调节剂进行试验;结果表明采用MS+6-BA3.0mg/L的培养基能成功地诱导愈伤组织的分化;MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L能成功地诱导芽的分化,对于芽增殖,以此培养基也比较好;诱导生根以1/2MS+NAA0.2mg/L培养基较好,培养20d后生根率可达90%以上。

巴西橡胶NBS类抗病基因同源序列的克隆与分析

[目的]探讨巴西橡胶NBS类抗病基因同源序列的克隆与序列分析。[方法]以高抗炭疽病的巴西橡胶无性系R042为材料,根据抗病基因Prf、L6、N等的P-loop和GLPL保守结构域设计简并引物,从R042扩增具有抗病基因同源序列的片段,对分离获得的抗病基因同源序列进行Blastn、氨基酸同源性分析、序列比较和系统进化分析。[结果]从巴西橡胶高抗炭疽病无性系R042基因组DNA中分离获得1个NBS类抗病基因同源序列,经Blastn比对后发现,该抗病基因同源序列与毛果杨中的一个CC-NBS-LRR抗病蛋白的mRNA的序列同源性为66%,Blastn的E值为2e-24,推测氨基酸序列与已知抗病基因的相似性在26.9%～43.2%。[结论]序列比对与系统进化分析表明,该抗病基因同源序列具有NBS类抗病基因的所有保守序列,且与Xa1的亲缘关系最近。

巴西橡胶NBS-LRR抗病基因类似物多样性分析

【目的】克隆巴西橡胶抗病基因同源序列，为巴西橡胶抗病R基因的获取奠定基础。【方法】根据已知抗病基因（Resistance gene， R gene）编码的蛋白质NBS-LRR保守结构设计一对简并引物 P1/P2，采集经水杨酸（SA）处理0、12、24、48 h的巴西橡胶叶片，进行cDNA同源序列克隆。【结果】序列分析结果表明，克隆获得的RGAs经系统进化分析分为TIR-NBS-LRR和non-TIR-NBS-LRR 两种类型和9个基因家族；多重比较发现，克隆获得的RGAs具有典型的NBS类抗病基因保守结构域，在与已知植物NBS类序列相似性比较中，与I2c-2基因相似性最高，为46.2%，而巴西橡胶NBS类RGAs之间氨基酸相似性为22.1%～100.0%。进一步研究发现，核苷酸非同义替换和同义替换的比率小于1，有低水平的重组，表明点突变逐步积累是导致纯化选择的主要力量。【结论】通过SA诱导作用和NBS类抗病基因结合得到的巴西橡胶NBS类RGAs具有广泛的遗传多样性，并与已知抗病基因氨基酸序列具高度相似性，这些RGAs候补序列可能与某抗病基因有密切联系。

热研7-33-97袋装苗叶片愈伤组织诱导培养研究

为扩大橡胶树组织培养外植体来源和建立高效稳定的橡胶树叶片离体再生体系,以1年生巴西橡胶树品种热研7-33-97袋装苗叶片为材料,研究叶片的预处理、0.1%升汞不同消毒时间、离体叶片切取部位、3种激素(6-BA、NAA、2,4-D)不同浓度配比对愈伤组织诱导的影响,筛选愈伤组织诱导最适培养基。结果表明:用液体培养基MS+3mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA对橡胶树袋装苗叶片进行预处理,可诱导出愈伤组织;用0.1%升汞对袋装苗叶片消毒15 min,其存活率达2.47%,为最佳消毒方法;用含主脉叶块和含主脉出愈叶块未出愈伤组织部分进行培养所诱导的愈伤组织质地较坚实、呈黄绿色,为橡胶袋装苗叶片培养的最适宜外植体;橡胶袋装苗叶片最佳愈伤组织诱导培养基是MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA+4%蔗糖+3 g/L植物凝胶,用此培养基对含主脉叶块和含主脉出愈叶块未出愈伤组织部分进行培养,其出愈率分别达49.07%和42.22%。结论:大田1年生橡胶树品种热研7-33-97袋装苗叶片经预处理后选择含主脉叶块为外植体,可诱导出理想的愈伤组织。

香蕉开放式组织培养中增殖培养基成分优化研究

[目的]优化香蕉开放式组培的增殖培养基成分,以提高香蕉丛生芽的增殖系数。[方法]以"巴西"香蕉继代培养获得的分化芽为材料,以MS培养基为基本培养基,并以0.014%的次氯酸钠为抑菌剂,通过观察不同浓度的蔗糖、植物生长调节剂及在不同pH值对芽增殖的影响,确定最佳的香蕉分化芽增殖培养条件。[结果]香蕉分化芽增殖的最佳培养条件为30 g/L蔗糖+1 mg/L 6-BA+0.03mg/L NAA,pH 5.8。[结论]在最佳条件下进行继代培养3代后,增殖系数分别是3.40、3.32和3.28,与传统组培方法相比差异不显著。

APX基因植物表达双元载体的构建及转化剑麻

剑麻是中国热带地区最重要的麻类经济作物。剑麻H.11648是中国唯一的当家品种,此品种虽高产但易感斑马纹病,而现有的化学农药防效差且病原菌易产生抗性。为了培育出剑麻抗病新品种,以Pcambia3300为基础质粒,构建由35S驱动的APX基因的植物表达载体Pcambia3300-35S-APX-nos,再通过农杆菌EHA105将其导入剑麻中,经PCR扩增后电泳检测分析,结果表明外源基因已整合到受体植物基因组中。

巴西橡胶Pto类抗病同源序列的克隆与系统发育重建（英文）

番茄Pto基因是一类可以编码丝氨酸/苏氨酸激酶(STK)序列的广谱抗性候选基因,其序列克隆与鉴定为深入了解番茄的抗病机制奠定了基础。在该研究中,一对依据Pto基因的保守序列设计的简并引物被用来扩增巴西橡胶中Pto基因抗病同源序列,扩增得到了一个约550 bp的基因片段,其随后被克隆并测序。序列分析发现,其中的7个抗病同源序列与Pto基因高度同源(BLASTX E value<3e-53),所以其被认为是Pto基因抗病同源序列(Pto-RGCs)。通过巴西橡胶的Pto-RGCs多序列比对表明,这些序列包含了多个STKs保守的次级结构域。此外,系统发育分析也表明,巴西橡胶的Pto-RGCs属于Pto基因同源的R基因。该研究结果中Pto-RGCs可为巴西橡胶抗病的发展提供一个有效的基因资源。