基于胆汁泡相糖蛋白特征而研制诊断胆结石ELISA药盒的可行性分析

目的:分析胆汁泡相糖蛋白的特征并评估其ELISA药盒临床应用的可行性。方法:应用凝集素探针介导的点印迹法分析泡蛋白糖链的组成与结构,利用酶解方法测定泡蛋白各组分的构成,并分析其氨基酸组成。利用Westernblot法分析胆汁与血清泡蛋白的同源性,根据ELISAkit测定泡蛋白的含量分布,并以ROC曲线判别ELISAkit的临床应用价值。结果:化学分析泡蛋白由多肽和寡糖组成,其中多肽分子量约为21u,糖链约占总蛋白含量的37.3%,为核心岩藻糖丰富的多天线复杂型聚糖。泡蛋白具胆汁与血清分布两相性,胆固醇性结石组胆囊胆汁和血清33.5u泡蛋白含量分别为(213.4±70.1)μg/ml、(179.8±97.9)μg/ml,明显高于胆色素性结石症组和正常对照组(P<0.05),而后两者间差异无显著性(P>0.05)。ELISAkit判断胆固醇性结石的胆汁相敏感度和特异度分别为85%和90%,而血清相为61.7%和93.3%。结论:胆汁泡蛋白是一种新认识的胆结石促成核因子,其在不同人群中具有表达谱的异质性,ELISAkit辅助诊断胆石症具有一定的临床应用价值,但尚需更多病例的积累和验证。

糖脂的结构和功能

糖脂(glycolipids),顾名思义,就是由糖和脂二部分通过共价结合组成的一种复合糖类。因为脂的定义一直很含糊,所以从脂链部分来看,糖脂可以有下述几类: (1)从甘油衍生物而来的甘油糖脂(gly-

双盲交叉筛选分泌抗直肠腺癌神经节苷脂单克隆抗体杂交瘤细胞株PG 10

采用改良脾内免疫的方法,比较分析了甲、乙两组,经不同方法处理的直肠腺癌细胞株HR-8348的免疫效果(甲组未经酶处理;乙组用0.25％胰蛋白酶,37℃孵育20分钟)。实验结果表明:乙组对正常直肠和直肠腺癌神经节苷脂的阳性杂交瘤细胞集落数远远高于甲组。用分别分离、纯化自同一个体的正常直肠和直肠腺癌的神经节苷脂作检测抗原,交叉筛选出分泌抗直肠腺癌特异神经节苷脂单克隆抗体的PG10杂交瘤细胞株,经三次克隆,二次达百分之百阳性,培液中抗体的最高O.D.值(490nm)为1.85。描述了用双盲交叉法筛选抗直肠腺癌特异的神经节苷脂单克隆抗体的新方法。

结肠腺癌与正常结肠神经节苷脂的比较研究

我们对成人结肠腺癌和同一个体的远端正常结肠,分别分离、纯化出细胞膜神经节苷脂(GLS),经GLS定量分析,结果表明:癌组织中GLS的含量较正常结肠显著增加,结肠腺癌平均每克湿重组织含GLS39.7nmol,正常结肠平均为16.5nmol。高效薄层层析图谱显示,癌组织中,在含有单唾液酸GLS区段,存在二条肿瘤“特异”的条带,位于通常的GM2和GM1条带之后,它们分别占总神经节苷脂的3.9—6.0％、3.9—7.5％;在含有二唾液酸GLS区段,发现一条异常的GLS条带,位于GDla与GDlb之间,占总GLS5.1—6.7％,而5例正常对照中,有一例存在痕量,一例占总GLS的1.4％。比较结肠腺癌和正常结肠的不同GLS的百分含量可知:癌组织中GM3、GM2增加;GD3、GDla减少,同时GDlb和含三唾液酸以上的GLS呈减少的趋势。

超速离心法分离泡相胆汁

胆汁中的磷酯泡是胆固醇的主要携带者，在一般情况下，泡处于稳定状态，一旦存有影响其稳定性的因素，则单层泡趋于集聚成复层泡，进而胆固醇结晶成核乃至成石［１］。上述因素可能是泡相胆汁中的蛋白质［２］，后者仅占胆汁蛋白的２％［４］。本实验的目的在于通过超速离...

胆汁中促成核糖蛋白的检测及临床应用

胆汁中促成核糖蛋白的检测及临床应用蔡端励峰张延龄莫汉庆胆汁中存在促成核因子和抗成核因子，在化学上主要为糖蛋白。这二类因子的活性失衡是形成胆石的重要因素。分离提纯这些因子，并建立简捷有效的检测方法，对探讨胆石成因和溶石、防石疗法有重要价值。我们曾利用硫...

ELISA法检测胆汁200kD糖蛋白

目的：建立检测胆汁蛋白的ELISA方法，初步应用临床，开辟胆石症研究的新途径。方法：利用已提纯的具有强力促成核活性的200kD糖蛋白，免疫家兔获得特异性抗体，首次建立了该糖蛋白ELISA测定方法，并测定了15例患者．结果：胆石症患者血清中该糖蛋白的含量明显高于对照组。结论：该糖蛋白的ELISA检测法具有一定的临床价值。

PURIFICATION OF A GLYCOPROTEIN FROM PORCINE ADIPOCYTE PLASMA MEMBRANES

It is now well established that the insulin-binding macromolecules of fat cell membranes are proteins containing complex carbohydrates, and a number of biologically active molecules, such as hormones, lectins and toxins, can influence the metabolism of the adipocyte by interaction with glycosylated components on its surface membrane.