猫急性应激模型的建立及诊断标志物的筛选

本研究旨在建立猫急性应激模型,筛选诊断标志物,完善猫急性应激定义标准。选取18只猫随机分为对照组、应激组A和应激组B,每组6只。测量各组猫的生理指标,评估猫应激评分(CSS),采血进行血常规和血生化分析;ELISA法检测血清炎性因子、激素、五羟色胺(5-HT)和热休克蛋白-70(HSP-70)浓度;微量法检测血清氧化应激指标。结果表明,与对照组相比,应激组A的体温、呼吸频率、CSS、尿素氮(BUN)含量、肌酸激酶(CK)活性、IL-1β、TNF-α、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(COR)、肾上腺素(EPI)、5-HT浓度显著升高(P<0.05),红细胞(RBC)数目、血红蛋白(HGB)、IL-10浓度、天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)活性、总胆固醇(TC)含量显著降低(P<0.05),心率、白细胞(WBC)、淋巴细胞(LYM)、中性粒细胞(NEUT)数目、葡萄糖(GLU)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(CRE)、三酰甘油(TG)、丙二醛(MDA)含量、淀粉酶(AMY)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和HSP-70浓度无显著变化(P>0.05);应激组B的体温、呼吸频率、CSS、WBC、NEUT、RBC数目、GLU、BUN、TG含量、CK、AST、SOD、CAT活性、HGB、IL-1β、TNF-α、CRH、ACTH、EPI、HSP-70、5-HT浓度显著升高(P<0.05),IL-10和COR浓度显著降低(P<0.05),心率、LYM数目、ALT、AMY活性、TP、ALB、CRE、TC、MDA含量无显著变化(P>0.05)。结果提示,本研究设计的复合应激和束缚应激均能成功建立猫急性应激模型,并筛选出CRH、ACTH和CSS可用于完善猫急性应激的定义标准。

1-甲基海因对慢性疼痛大鼠钠离子通道蛋白Nav1.8的干预作用

旨在研究1-甲基海因(1-methylhydantoin,MH)对钠离子通道(Nav channels,Navs)1.8的干预作用,为临床科学治疗疼痛提供理论依据,为实现“疼痛最小化”终极目标拓宽途径。选取60只SPF级SD大鼠通过随机分组设计,各组分别使用1-甲基海因(MH组)、利多卡因(L组)、氨溴索(A组)处理,第21和28天使用蛋白免疫印记法检测大鼠L4~L6段背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)Nav1.8的蛋白表达,采用全细胞膜片钳技术检测MH作用下的Nav1.8通道峰电流。结果表明,与M组相比,MH能使Nav1.8表达显著下降(P<0.05)。MH对Nav1.8通道峰电流具有一定抑制作用,10和100μmol·L^(-1)MH对Nav1.8的电流抑制率分别为6.34%±3.13%和14.6%±1.52%,具有量效关系。提示MH能够下调慢性疼痛大鼠DRG中Nav1.8的表达,同时抑制Nav1.8电流,进而产生镇痛作用。

饲料中添加发酵中药对文昌鸡肝毒性研究

中药渣经微生物发酵可减少抗营养因子,增强功效,试验旨在研究饲料添加发酵中药渣对文昌鸡肝脏毒性影响。试验选用体重、日龄相近文昌鸡(43日龄,母)192只,随机分为4组,每组8个重复,每个重复6只。发酵中药渣添加水平为0%、0.5%、1.0%、1.5%,试验为期4周。结果显示,与组1相比,2、3、4组血清中谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、葡萄糖(GLU)含量均显著降低(P<0.05)。与组1相比,2、3组肝脏组织AST含量显著升高(P<0.05);3组谷丙转氨酶(ALT)含量显著升高(P<0.05),4组ALT含量显著降低(P<0.05);2、3、4组碱性磷酸酶(AKP)含量显著升高(P<0.05);3、4组肝脏组织中GLU和总蛋白(TP)显著升高(P<0.05)。表明,饲料中添加发酵中药渣可减少文昌鸡肝细胞损伤,促进肝脏的合成代谢和贮备功能,其中以1.0%添加量最适。

博来霉素致小鼠肺纤维化模型的建立及生物标志物的筛选

研究博来霉素(BLM)致小鼠肺纤维化模型中MMP-7、KL-6、SP-A、SP-D的表达和临床意义,探讨靶向性近红外荧光MMP-7探针及4种生物标志物联合检测在肺纤维化模型中的应用,旨在为肺纤维化的诊断、预后、动态监测及治疗提供参考。40只雄性C57BL/6小鼠随机分为BLM模型组和对照组,模型组气管滴注100μL低(2.0 mg·kg^(-1))、中(3.5 mg·kg^(-1))、高(5.0 mg·kg^(-1))剂量的盐酸博来霉素注射液建立肺纤维化模型,依次记为L组、M组和H组,对照组给予等量生理盐水。于建模后28 d,进行肺组织肺泡炎和肺纤维化评分,使用ELISA及RT-PCR技术检测MMP-7、KL-6、SP-A、SP-D的表达量,免疫组化法和Western blot检测MMP-7和KL-6蛋白在肺组织中的表达;腹腔注射近红外荧光MMP-7探针,于1.0、1.5、2.0、12.0、24.0、48.0 h进行荧光活体成像,观察MMP-7探针在体内的动态分布。结果表明,BLM摄入剂量与肺泡炎(P=0.008)及肺纤维化程度(P=0.03)显著相关(P<0.05), 2.0、3.5、5.0 mg·kg^(-1)剂量的BLM在一定程度上均能引起MMP-7、KL-6、SP-A、SP-D表达异常(P<0.05);近红外荧光MMP-7探针能特异性结合MMP-7靶点,探针注射12 h后靶向分布于肺部,信号稳定。4种生物标志物在肺纤维化模型小鼠肺组织中的表达随肺泡炎或纤维化的严重程度而增高或降低,提示它们是肺纤维化的生物标志物,联合检测可以提高方法的准确率和敏感性,非侵入性的MMP-7探针可用于小鼠肺纤维化的动态监测。

SD大鼠术后急性疼痛向慢性疼痛转化的差异代谢物分析

术后慢性疼痛病因十分复杂,迄今发生机制尚未明析。本研究旨在通过动物模型解析术后急性疼痛向慢性疼痛转化的相关物质,以期找到引发术后疼痛的关键物质。采用气相色谱-质谱(GC-MS)代谢组学技术,比较分析大鼠术后急性疼痛和慢性坐骨神经紧缩损伤疼痛的相关物质,筛选差异代谢物。结果经分析后得到224种代谢物,其中,35种代谢物具有显著差异(VIP>1,P<0.05,∣log_(2) FC∣≥2),代谢通路富集分析发现,45条潜在相关代谢通路(P<0.05)。分析表明,N-乙酰天冬氨酸(NAA)、泛酸、天冬氨酸、3-羟基丁酸、β-丙氨酸、葡萄糖等差异代谢物及其相关代谢通路可能与术后急性疼痛向慢性疼痛转变密切相关。解析出术后急性疼痛向慢性疼痛转化的相关物质,这为术后疼痛机制的研究提供了参考,也为术后疼痛的识别和治疗提供了新的方法和思路。