番茄红素对小鼠原始卵泡发育的影响及机制

旨在探究体外培养条件下番茄红素对小鼠原始卵泡激活的作用及机制。分离出生后3 d的ICR小鼠卵巢并对其在体外连续培养4 d,在培养过程中添加不同浓度番茄红素0(对照组)、5、50和500μmol/L,通过HE染色分析不同浓度番茄红素对小鼠原始卵泡发育的影响,通过过碘酸-希夫(periodic acid Schiff,PAS)染色及TUNEL染色检测卵泡闭锁及细胞凋亡情况,通过增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)染色检测颗粒细胞增殖情况,应用ELISA检测卵巢中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,通过Real-time PCR检测部分凋亡及抗氧化基因表达,并通过Western blot检测卵泡激活关键信号通路PI3K-AKT中部分成员蛋白的表达。结果显示,与对照组相比,500μmol/L番茄红素浓度培养条件下原始、过渡态、初级及次级卵泡数量均显著升高(P<0.05),而退化卵泡及凋亡细胞数量显著减少(P<0.05),处于增殖状态的颗粒细胞数量显著增多(P<0.05);与对照组相比,500μmol/L处理组中ROS水平明显降低(P<0.05),部分抗凋亡基因及抗氧化基因,包括Bcl-2、Xiap、Apaf-1、Cat、Prdx1、Gpx1的表达显著升高(P<0.05),而促凋亡基因Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达显著下调(P<0.05);500μmol/L处理组中PTEN、AKT和FOXO3A蛋白的表达水平与对照相比明显下调(P<0.05),而磷酸化AKT及磷酸化FOXO3A蛋白的表达水平显著上调(P<0.05)。综上所述,500μmol/L番茄红素可能通过增强细胞的抗氧化性和调控PI3K-AKT通路部分蛋白的表达促进原始卵泡的存活和激活。本试验为深入探讨番茄红素调控原始卵泡发育的分子机制提供了一定的试验数据,并为原始卵泡发育障碍引发的相关不孕症的治疗提供了新的思路。