Tim-3通过Nrf2/COX-2通路抑制巨噬细胞抗李斯特菌的机制研究

目的探讨T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子-3(Tim-3)在李斯特菌(Listeria)感染中通过核因子相关因子2(Nrf2)/环氧化酶2(COX-2)通路对巨噬细胞的影响及可能机制。方法提取Tim-3转基因小鼠和野生小鼠腹腔巨噬细胞,利用RT-PCR检测COX-2的表达;Tim-3融合蛋白阻断RAW264.7巨噬细胞系Tim-3信号,利用RT-PCR检测COX-2表达;李斯特菌感染RAW264.7细胞并用流式细胞术检测吞噬变化。结果经检测发现,Tim-3通过抑制COX-2的表达减弱了巨噬细胞对李斯特菌的吞噬作用。结论阻断巨噬细胞Tim-3信号,可以上调COX-2的表达,进而增强巨噬细胞等免疫细胞的抗感染功能。

Tim-3在单核细胞增生李斯特菌脑膜炎小鼠中的作用研究

目的构建李斯特菌脑膜炎小鼠模型,以评价T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3(Tim-3)在李斯特菌脑膜炎小鼠中的可能作用。方法体内实验通过延髓池注射李斯特菌的方法构建半数致死量的李斯特菌脑膜炎小鼠模型,应用Tim-3敲除(knock out,KO)模式小鼠和Tim-3抗体评价Tim-3对李斯特菌脑膜炎的作用。体外实验通过小胶质细胞BV2与Tim-3抗体共培养,检测阻断Tim-3对BV2细胞因子表达的影响。结果成功构建了半数致死剂量的脑膜炎小鼠模型,与对照组相比,KO小鼠及应用Tim-3抗体小鼠临床评分较高。小胶质细胞阻断Tim-3后,肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平升高。结论敲除及阻断Tim-3引起小鼠李斯特菌脑膜炎病情加重。