紫杉醇外泌体的载药工艺优化及体外抗肿瘤作用研究

目的优化紫杉醇(PTX)外泌体给药系统的载药工艺并评价其有效性和安全性,为开发新型抗肝癌制剂提供依据。方法采用超速离心法提取骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-Exo);电穿孔法包载紫杉醇,以药物包封率作为评价指标,通过响应面法优化载药工艺;高效液相色谱法测定紫杉醇外泌体(Exo-PTX)的载药量及考察释药行为;CCK-8法检测Exo-PTX对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用;溶血实验评价Exo-PTX的安全性。结果Exo-PTX的最佳电穿孔法载药工艺条件为:PTX药物浓度81.80μg·mL^(-1)、电压0.6 mV、电击次数8次,Exo-PTX的平均包封率为(22.38±0.08)%。同时Exo-PTX具有良好的缓释性能,且在微酸性的肿瘤微环境下可加速释放,在模拟正常体液和肿瘤环境下,48 h时的累计释放度分别为(49.35±0.67)%、(61.94±0.43)%。Exo-PTX对体外HepG2细胞具有显著的抑制作用且无溶血风险。结论在最佳载药工艺条件下制备的Exo-PTX具有较好的体外抗肝癌作用,并呈明显的浓度依赖性,缓释性良好,为PTX制剂的二次开发提供了依据。